| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Fluorescent Dye; Emission (Em) = 515; Excitation (Ex) = 489
Substrate for ABC transporters, specifically used as a probe to measure the activity of ABCB1 (P-glycoprotein) and ABCC1 (Multidrug Resistance Protein) like transporters. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在体腔液或ISO-EDTA孵育的体腔细胞中，钙黄绿素会积累。与对照组相比，在体腔液中培养的体腔细胞中钙黄绿素的荧光强度更高。
钙黄绿素-AM是一种非荧光分子，可被动扩散穿过细胞膜。进入细胞后，它会被细胞内酯酶裂解，生成荧光染料钙黄绿素。钙黄绿素不是ABC转运蛋白的底物，因此会在细胞内积累。细胞内钙黄绿素荧光的积累量与ABC转运蛋白的活性成反比：高荧光强度表明转运蛋白活性低（外排），低荧光强度表明转运蛋白活性高。[1] 利用流式细胞术和荧光显微镜测量细胞内钙黄绿素荧光的积累量，评估了海胆体腔细胞和牡蛎血细胞中ABC转运蛋白的活性。 [1] 在对海胆（Echinometra lucunter）体腔细胞的实验中，观察到不同细胞亚群中钙黄绿素积累模式的差异：吞噬细胞的荧光强度最高，其次是无色球形细胞，然后是振动细胞，而红色球形细胞的荧光强度最低或无荧光。[1] 与在人工抗凝剂溶液ISO-EDTA中孵育相比，在天然体腔液中孵育体腔细胞导致钙黄绿素积累显著降低（44.4 ± 3.36 au vs. 187.1 ± 6.39 au），表明天然介质中ABC转运蛋白活性更高。 [1] 用 ABCC1 转运体阻断剂 MK571（10 μM）处理后，两种海胆（E. lucunter 和 Echinus esculentus）的体腔细胞以及两种牡蛎（Crassostrea gasar 和 Crassostrea gigas）的所有血细胞类型中的钙黄绿素荧光强度均显著增加，表明 ABCC1 样转运体具有功能活性。荧光强度的增加幅度为 55.7% 至 249.2%，具体数值取决于细胞类型和物种。 [1] 用ABCB1转运体阻断剂reversin 205（10 μM）处理后，E. lucunter体腔细胞和牡蛎C. gasar透明细胞中的钙黄绿素荧光强度显著增加，但对E. esculentus体腔细胞或其他血细胞类型无影响，这表明ABCB1样转运体具有物种和细胞类型特异性活性。[1] |
| 酶活实验 |
体腔细胞和血细胞用ABC转运体底物钙黄绿素-AM染色，并通过流式细胞术分析染料积累情况。使用Reversin 205（ABCB1转运体阻断剂）和MK571（ABCC1转运体阻断剂）作为药理学工具来研究ABC转运体活性。在体腔细胞中观察到不同的钙黄绿素积累模式：吞噬细胞 > 无色球形细胞 > 振动细胞 > 红色球形细胞。MK571处理增加了两种海胆体腔细胞中的钙黄绿素荧光强度。然而，Reversin 205处理未能增加E. esculentus体腔细胞中的钙黄绿素荧光强度。这些数据表明，两种海胆均存在ABCC1样转运体活性，但ABCB1样转运体活性可能仅存在于E. lucunter体腔细胞中。在两种双壳类动物的所有细胞类型中均观察到了ABCC1样转运蛋白的活性。然而，逆转素205仅增加了牡蛎（C. gasar）透明细胞中的钙黄绿素积累，表明在所有其他细胞类型（包括牡蛎（C. gigas）的透明细胞）中均不存在ABCB1样转运蛋白活性。此外，我们的结果表明，C. gigas在所有血细胞类型中均表现出比C. gasar更高的ABCC1样转运蛋白活性。本研究首次对海胆（E. lucunter和E. esculentus）以及牡蛎免疫系统细胞中的ABCB1和ABCC1样转运蛋白活性进行了表征。我们的发现鼓励开展关于海洋无脊椎动物免疫系统细胞在应激条件下ABC转运蛋白活性/表达的研究，以及ABC转运蛋白作为生物标志物的潜在应用[1]。
钙黄绿素-AM本身并非酶。它被用作底物来测量ABC转运酶（外排泵）的功能活性。该检测原理依赖于细胞内酯酶将Calcein-AM转化为荧光钙黄绿素，随后非荧光Calcein-AM（或其荧光产物？文中指出钙黄绿素并非底物，因此很可能是Calcein-AM被外排）被转运蛋白排出。阻断转运蛋白会导致荧光钙黄绿素的积累增加。[1] |
| 细胞实验 |
示例：
钙黄绿素是一种具有黄绿色荧光的荧光探针，可用于测定活性铁池并测量Fe(III)与配体的结合亲和力。 方法：用于细胞染色。 1. 将细胞（10~6/mL）与20 µM Fe(II)在37°C下孵育2小时。 2. 通过离心（1000 rpm；5分钟）收集细胞，并在D'hanks缓冲液（pH 7.4）中与钙黄绿素（0.5 µM；15分钟；37°C）孵育。 3. 用D'hanks缓冲液（pH 7.4）洗涤细胞两次。 4. 使用流式细胞仪和共聚焦激光扫描显微镜监测荧光。 描述：钙黄绿素是一种具有黄绿色荧光的荧光探针，可用于毛细血管样管形成实验。 方法：用于细胞染色。 1. 将细胞以 5×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 Matrigel 包被的 96 孔板中，并在常氧或低氧条件下用条件培养基处理 5.5 小时。 2. 用钙黄绿素染色细胞（0.5 小时）。 3. 使用 Lion Heart（Biotec）捕获形成完整网络的管状结构，并通过计数管状结构的数量进行定量。 描述：钙黄绿素是一种具有黄绿色荧光的荧光探针，可用于管状结构形成实验。 方法：用于细胞染色。 1. 将培养的细胞悬浮于条件培养基中，并以 5×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 Matrigel 包被的 96 孔板中，在常氧或低氧条件下培养 6 小时。 2. 用钙黄绿素染色细胞（10 分钟）。 3. 使用 Lion Heart 捕获形成完整网络的管状结构，并通过管状结构的长度进行定量。使用 Image J 计算分支点数量。 海胆体腔细胞实验方案：将体腔细胞悬浮于体腔液或 ISO-EDTA 中，浓度为 1 × 10⁶ 个细胞/mL。将细胞悬液与 200 nM Calcein-AM 在 26°C 下孵育 30 分钟。在抑制实验中，细胞在加入 Calcein-AM 前 30 分钟用 10 μM 的 reversin 205（ABCB1 阻断剂）或 MK571（ABCC1 阻断剂）预处理。孵育后，使用流式细胞仪（FL1 检测器，530/30 nm）测量钙黄绿素荧光，或使用荧光显微镜（激发滤光片 510-550 nm）观察。显微镜观察中，图像采集采用固定曝光时间（500 ms），并使用图像分析软件量化荧光强度。[1] 牡蛎血细胞实验方案：收集并过滤血淋巴，细胞浓度未作调整。将血细胞悬液用 10 μM reversin 205 或 MK571 预处理 30 分钟，然后在 26°C（适用于 C. gasar）或 18°C（适用于 C. gigas）下与 200 nM Calcein-AM 孵育 30 分钟。通过流式细胞仪测量 Calcein 荧光强度，并根据不同血细胞亚群（透明细胞、粒细胞、成淋巴细胞样细胞）的前向散射和侧向散射特性分别分析数据。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
钙黄绿素是一种具有荧光特性的荧光染料，其功能与荧光素化合物相关。钙黄绿素，也称为Fluorexon，用作眼科溶液中软性或硬性隐形眼镜的染色剂。它是一种荧光染料或发光剂。
钙黄绿素-AM是钙黄绿素的一种非荧光、可透过细胞膜的衍生物。“AM”（乙酰氧基甲基）酯基团使该分子具有亲脂性，使其能够穿过细胞膜。[1] 进入细胞后，普遍存在的细胞内酯酶会裂解AM基团，生成亲水性、带负电荷且具有高荧光性的钙黄绿素，后者保留在细胞质中。 [1] ABC转运蛋白对Calcein-AM（或可能是裂解的Calcein？文中明确指出Calcein并非底物，因此外排的可能是无荧光的Calcein-AM）的排出与其胞内水解竞争，使得荧光强度的增加速率可直接反映转运蛋白的活性。[1] 本研究使用Calcein-AM作为功能探针，证实了来自不同气候区域的海洋无脊椎动物免疫细胞（体腔细胞和血细胞）中ABCB1和ABCC1样外排转运蛋白的存在及其活性。[1] 该研究强调了使用天然培养基（海胆的体腔液，牡蛎的血淋巴）进行此类检测的重要性，因为人工培养基会改变转运蛋白的活性和细胞行为。[1] |
| 精确质量 |
622.143
|
|---|---|
| 元素分析 |
C, 57.88; H, 4.21; N, 4.50; O, 33.41
|
| CAS号 |
1461-15-0
|
| 相关CAS号 |
Calcein (tetraethyl ester);1170856-93-5
|
| PubChem CID |
65079
|
| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
|
| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
952.7±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
200 °C
|
| 闪点 |
530.0±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.775
|
| LogP |
1.56
|
| tPSA |
231.67
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
15
|
| 可旋转键数目(RBC) |
12
|
| 重原子数目 |
45
|
| 分子复杂度/Complexity |
1070
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C21C1C([H])=C(C([H])([H])N(C([H])([H])C(=O)O[H])C([H])([H])C(=O)O[H])C(=C([H])C=1OC1C([H])=C(C(C([H])([H])N(C([H])([H])C(=O)O[H])C([H])([H])C(=O)O[H])=C([H])C2=1)O[H])O[H])=O
|
| InChi Key |
DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C30H26N2O13/c33-21-7-23-19(5-15(21)9-31(11-25(35)36)12-26(37)38)30(18-4-2-1-3-17(18)29(43)45-30)20-6-16(22(34)8-24(20)44-23)10-32(13-27(39)40)14-28(41)42/h1-8,33-34H,9-14H2,(H,35,36)(H,37,38)(H,39,40)(H,41,42)
|
| 化学名 |
2-[[7'-[[bis(carboxymethyl)amino]methyl]-3',6'-dihydroxy-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-2'-yl]methyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid
|
| 别名 |
Fluorexon; 1461-15-0; Oftasceine; Oftasceinum; Oftasceina; 2,2',2'',2'''-(((3',6'-Dihydroxy-3-oxo-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthene]-2',7'-diyl)bis(methylene))bis(azanetriyl))tetraacetic acid; Oftasceine [INN];
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
0.1 M NaOH : ~10 mg/mL (~16.06 mM)
DMSO : ~5 mg/mL (~8.03 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 20 mg/mL (32.13 mM) in 2% NaHCO3 in ddH2O (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 需要超声波并用NaHCO3调节pH至6。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01892670 | COMPLETED | Other: Donation of 1 whole blood unit | Austere Environment Blood Bank Buddy Transfusion Trauma |
Haukeland University Hospital | 2013-03 | Not Applicable |
| NCT05948930 | RECRUITING | Behavioral: Progressive aerobic exercise Behavioral: Adaptive cognitive training Behavioral: Combined |
Mild Cognitive Impairment | University of Maryland, Baltimore | 2024-01-08 | Not Applicable |
Apotracker Red
18:1-18:1-C11 BODIPY 505/515 TG
18:1-6:0 DNP-C11 BODIPY 505/515 TG
Anisoin
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
