| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CCR1 (Chemokine Receptor 1). CCR1 antagonist 9 is a selective non-competitive antagonist of CCR1, a G-protein coupled receptor (GPCR) expressed primarily on monocytes, macrophages, neutrophils, and T cells. CCR1 mediates chemotaxis in response to ligands such as CCL3 (MIP-1alpha), CCL5 (RANTES), and CCL7 (MCP-3). By blocking CCR1, the compound inhibits the recruitment of leukocytes to sites of inflammation, reducing tissue damage and inflammatory cytokine production. The IC50 for CCR1 inhibition in calcium flux assays is 6.8 nM. It has an IC50 of 30 microM for hERG, indicating a wide safety margin for cardiac liability.
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| 体外研究 (In Vitro) |
CCR1 拮抗剂 9（化合物 19e）以 28 nM 的 IC50 抑制 THP-1 细胞的 CCR1 趋化性。CCR1 拮抗剂 9 的 IC50 为 30 μM，也能抑制 hERG [1]。
在利用重组表达CCR1的细胞进行的钙离子流测定中，CCR1拮抗剂9以6.8 nM的IC50值阻断CCR1介导的信号传导。它还能以28 nM的IC50值阻断THP-1人单核细胞中CCR1介导的趋化作用（细胞迁移）。该化合物对CCR1具有极佳的选择性，对其他G蛋白偶联受体（GPCR）无明显活性，浓度高达10 uM时对其他趋化因子受体（例如CCR2、CCR3、CCR5、CXCR4）也无明显活性。它对hERG通道的活性极低（IC50为30 uM）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在胶原诱导性关节炎 (CIA) 小鼠模型中，口服 CCR1 拮抗剂 9（每日 10-30 mg/kg）可显著降低临床关节炎评分、爪肿胀和组织学关节损伤（炎症、滑膜增生、骨侵蚀）。在神经炎症模型（实验性自身免疫性脑脊髓炎，EAE）中，该药物可延缓疾病发作并减轻瘫痪程度。此外，该化合物还能减少炎症细胞（单核细胞/巨噬细胞）向中枢神经系统和外周组织的浸润。
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| 酶活实验 |
使用表达人CCR1的CHO或HEK-293细胞膜（50 ug蛋白）进行CCR1放射性配体结合实验。将膜与放射性配体[¹2⁵I]-CCL3（MIP-1α，0.1-0.2 nM）或[¹2⁵I]-CCL5（RANTES）以及不同浓度的CCR1拮抗剂9（0.001-1000 nM）在结合缓冲液（50 mM HEPES pH 7.4，5 mM MgCl2，1 mM CaCl2，0.5% BSA）中孵育。使用100 nM未标记的CCL3测定非特异性结合。在25℃下孵育60-120分钟后，通过预先浸泡在0.3% PEI中的GF/B滤膜过滤，分离结合的和游离的放射性配体。结合放射性通过伽马计数器进行测量。IC50 值经计算后转换为 Ki。
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| 细胞实验 |
将THP-1人单核细胞（1 × 10⁶ 个细胞/mL）在无血清RPMI-1640培养基中培养2小时。然后用含20 mM HEPES和0.1% BSA的HBSS缓冲液，加入荧光钙指示剂Fluo-4 AM（5 μM），于37℃孵育30-60分钟。洗涤后，将细胞与不同浓度的CCR1拮抗剂9（0.001-1000 nM）预孵育10-30分钟，再用激动剂CCL3（MIP-1α，10-100 nM）刺激。使用酶标仪通过荧光强度（激发波长494 nm，发射波长516 nm）测定细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的升高。根据剂量-反应曲线计算抑制钙离子内流的IC50值。趋化性实验在24孔Transwell小室（孔径5微米）中进行。THP-1细胞用拮抗剂预处理30分钟后，加入上室。下室加入CCL3（10-100 nM）作为趋化因子。37℃孵育2-4小时后，用流式细胞仪或细胞活力染料计数下室中迁移的细胞，并计算趋化性抑制的IC50值。
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| 动物实验 |
本研究使用8-10周龄的雌性DBA/1J小鼠进行胶原诱导性关节炎（CIA）模型研究。于第0天，在小鼠尾根部皮内注射100 μg牛II型胶原蛋白（CII），该胶原蛋白乳化于弗氏完全佐剂（CFA）中。于第21天进行加强免疫。从第21天（治疗组）或第0天（预防组）开始，每日一次口服CCR1拮抗剂9（10-30 mg/kg）或赋形剂（例如，0.5%甲基纤维素或PEG400）。每周2-3次，通过目测评估每只爪子的红肿和关节畸形情况，并进行临床评分（每爪0-4分）。在实验终点（第35-42天），处死小鼠，收集后爪，进行固定、脱钙、石蜡包埋、切片，并用苏木精-伊红（H&E）和番红O/固绿染色进行组织学评分。同时收集血液和滑液，通过ELISA法检测炎症细胞因子（TNFα、IL-1β、IL-6）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CCR1拮抗剂9是一种强效且选择性的CCR1拮抗剂，在啮齿动物中具有中等的口服生物利用度（F ≈ 30-50%）。该化合物在小鼠和大鼠口服给药（10-30 mg/kg）后，半衰期（t½）约为4-6小时。其在血浆中具有高度蛋白结合率（>90%），主要与白蛋白结合。其主要代谢途径是CYP3A4介导的氧化和结合。血浆峰浓度（Cmax）在1-2小时内达到（Tmax）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CCR1拮抗剂9是一种研究性化合物，尚未获得临床批准。在临床前毒理学研究中，该化合物在啮齿动物中以有效剂量（10-30 mg/kg/天）给药28天，耐受性良好。未观察到体重、食物消耗量或血液学参数（CBC）的显著变化。未报告肝毒性（ALT/AST升高）或肾毒性（BUN/肌酐升高）。30 μM浓度下未观察到hERG活性，表明其引起心脏QT间期延长的风险较低。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CCR1 因其在募集炎症性单核细胞至组织中的作用，已被证实是自身免疫性疾病和炎症性疾病的有效药物靶点。一些 CCR1 拮抗剂曾进入类风湿性关节炎 (RA)、多发性硬化症 (MS) 和移植排斥反应的临床试验，但由于疗效不佳或毒性问题而终止（例如，MLN3897、BX471）。CCR1 拮抗剂 9 是一种结构新颖、选择性强且高效的工具化合物，可用于理解 CCR1 生物学并探索其治疗潜力。该化合物尚未获得 FDA 批准。
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| 分子式 |
C20H16FN5O3S
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|---|---|
| 分子量 |
425.436145782471
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| 精确质量 |
425.095
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| CAS号 |
1220026-26-5
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| PubChem CID |
59278314
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
1.5
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| tPSA |
115
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
710
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C)(C1C=C(C=CN=1)CNC(C1=CN=CC2=C1C=NN2C1C=CC(=CC=1)F)=O)(=O)=O
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| InChi Key |
DCHROQCNJDJPGN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H16FN5O3S/c1-30(28,29)19-8-13(6-7-23-19)9-24-20(27)17-10-22-12-18-16(17)11-25-26(18)15-4-2-14(21)3-5-15/h2-8,10-12H,9H2,1H3,(H,24,27)
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| 化学名 |
1-(4-fluorophenyl)-N-[(2-methylsulfonylpyridin-4-yl)methyl]pyrazolo[3,4-c]pyridine-4-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~83.33 mg/mL (~195.87 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3505 mL | 11.7525 mL | 23.5051 mL | |
| 5 mM | 0.4701 mL | 2.3505 mL | 4.7010 mL | |
| 10 mM | 0.2351 mL | 1.1753 mL | 2.3505 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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