| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HSP72 ( IC50 = 19 nM )
CCT251236 targets pirin, an iron-dependent co-transcription factor. It binds to pirin with a Ki of 28 nM. By binding to pirin, CCT251236 inhibits the activity of heat shock transcription factor 1 (HSF1). HSF1 is a master regulator of the heat shock response, which is often upregulated in cancer to promote cell survival under stress conditions. CCT251236 inhibits HSF1-mediated induction of heat shock proteins such as HSP72 and HSP27. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CCT251236 (0-100 nM；24 小时) 抑制 HSF1 介导的 HSP72 诱导，pIC50=7.73 ± 0.07 (IC50=19 nM)，表明其在体外特性方面具有适当的平衡，同时保持了优异的细胞活性。基于细胞测定中的游离分数，SK-OV-3 细胞中游离 GI50 为 1.1 nM[1]。
CCT251236（0-100 nM；24 小时）以浓度依赖的方式抑制 SK-OV-3 细胞中 HSF1 介导的热休克蛋白 HSP72 和 HSP27 的表达[1]。 CCT251236（0-100 nM；24 小时）抑制 17-AAG 剂量依赖性地诱导 HSPA1A mRNA 的表达，该诱导是在用 250 nM 17-AAG 预处理 6 小时后进行的[1]。 CCT251236 是 HSF1 介导的 HSP72 诱导的强效抑制剂，IC50 为 19 nM。它与 pirin 结合的 Ki 值为 28 nM。在U2OS细胞中，该化合物抑制HSF1介导的热休克蛋白27 (Hsp27) 的诱导。它对人SK-OV-3卵巢癌细胞具有抗增殖活性，GI50值为1.1 nM。该化合物还具有抗骨髓瘤活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在免疫功能正常的无肿瘤BALB/c小鼠中，口服CCT251236（5或20 mg/kg）的游离Cav0-24h值分别为2.0 nM和1.2 nM [2]。
口服CCT251236（20 mg/kg，连续33天）在小鼠中显示出明确的治疗效果，基于最终肿瘤体积的肿瘤生长抑制率（%TGI）为70%。与对照组相比，33天后平均肿瘤重量下降了64%。此外，肿瘤中CCT251236的浓度高达940 nM，表明该化合物具有碱性和较宽的分布容积[2]。 体内实验表明，CCT251236是一种口服有效的化合物，已在人卵巢癌异种移植模型中证实了其疗效。其口服生物利用度高，且对 HSF1 具有强效抑制作用，因此是研究 HSF1 和 pirin 在癌症中作用的宝贵工具。 |
| 酶活实验 |
蛋白质结合[1]
采用快速平衡透析法测定蛋白质结合。从雌性BALB/c和Ncr-Foxn1nu小鼠中采集血浆，并储存于-20°C。细胞培养基为DMEM，并添加10%胎牛血清（FCS）、2 mmol/L L-谷氨酰胺和1×非必需氨基酸。透析前，将RED透析板、缓冲液、血浆和培养基溶液加热至37°C。将DMSO中的测试化合物/化合物26（CCT251236）加入到稀释的血浆（用100 mM磷酸盐缓冲液稀释10倍）或细胞培养基中，使透析浓度达到5 PM，其中含有1% DMSO。将 300 PL 的稀释血浆或培养基加入 RED 板的供体侧，并将 500 PL 的 100 mM 磷酸盐缓冲液加入接收孔。用透气性 S70 盖密封板，并在 37 °C 下振荡透析 4 小时。 皮林表面等离子体共振 (SPR)[1] 所有表面等离子体共振 (SPR) 实验均在灵敏度增强至 T200 的 Biacore T100 上进行。采用胺偶联化学方法将皮林蛋白固定在研究级 CM5 传感器芯片上。固定化步骤中使用的运行缓冲液为1×磷酸盐缓冲液（10×74 mM NaHPO₄/NaH₂PO₄，pH 7.4，2.7 mM KCl，137 mM NaCl）。芯片表面用100 mM N-羟基琥珀酰亚胺和400 mM 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺的1:1混合物活化10分钟。将Pirin以约5 µg/mL的浓度注入pH 5.5的10 mM乙酸缓冲液中，并加入5 µM三苯基化合物A以保护活性位点赖氨酸。实时监测反应，当达到约5000 RU的目标固定化水平时终止反应。最后，用pH 8.5的1 M乙醇胺溶液封闭表面7分钟。上述所有步骤的流速均保持在 10 µL/min。流动池 1 未做任何修饰，用作参比表面。 CCT251236 作为吡林配体和 HSF1 抑制剂的活性通过体外结合实验进行评估，以测定其对吡林的亲和力。结合实验测得其 Ki 值为 28 nM。其抑制 HSF1 介导的转录活性的能力通过报告基因检测或测量 HSF1 靶基因（如 HSP72 和 HSP27）的表达进行评估。 |
| 细胞实验 |
细胞系：SK-OV-3 细胞 浓度：0 nM；10 nM；100 nM 孵育时间：24 小时 结果：10 nM 浓度下抑制 HSP72 和 HSP27 的表达。
体外细胞活力检测 [1] CellTiter Blue (CTB) 细胞活力检测提供了一种均相荧光法，用于评估活细胞数量。它使用深蓝色指示染料刃天青来测量细胞的代谢能力，而代谢能力是细胞活力的指标。活细胞能够将刃天青还原为具有强荧光的试卤灵（粉红色）。简而言之，将细胞（约 6 x 10³ 个细胞/mL）接种于 384 孔板中，并孵育 24 小时。使用 ECHO 550 液体处理工作站加入化合物（不同浓度），然后在 37°C 下孵育 96 小时。将Titer Blue试剂加入每个孔中，并在37℃下孵育3-4小时。使用Envision仪器测量荧光强度。通过非线性回归将数据拟合到无限制剂量反应曲线，确定50%生长抑制浓度（GI50）。每个浓度均测试两次。 CCT251236的细胞活性检测包括用该化合物处理癌细胞系，例如SK-OV-3卵巢癌细胞，并测量细胞增殖和活力。通过Western blot或qRT-PCR检测HSP72和HSP27的水平来评估该化合物抑制HSF1介导的热休克蛋白诱导的能力。使用CellTiter Blue或类似方法评估其抗增殖活性。 |
| 动物实验 |
无胸腺小鼠（SK-OV-3细胞）
20 mg/kg；33天 口服给药 小鼠药代动力学[1] 雌性BALB/c和Ncr-Foxn1nu小鼠在给药前适应实验室条件至少1周，并可自由摄取食物和水。化合物26 (CCT251236) 以静脉注射或口服（0.1 mL/10g）的方式给药，溶于10% DMSO、5% Tween 20的生理盐水（BALB/c PK）或10% DMSO、25% (w/v) 羟丙基-β-环糊精的50 mM柠檬酸钠缓冲液（Ncr-Foxn1nu PK）。给药后24小时内，在8个时间点从尾静脉采集血样（20 µL），并点样至Whatman FTA-DMPK B卡（VWR），同时点样至校准曲线和添加对照血的质控样品中。将卡片在室温下干燥至少2小时。从卡片上冲取直径为6 mm的圆片，并用含500 nM奥洛莫辛（olomoucine）作为内标的200 µL甲醇进行提取。离心后，使用配备Phenomenex Kinetex™ C18（5 cm × 2.6 µm，2.1 mm内径）超高效液相色谱柱的QTRAP 4000液相色谱-电喷雾串联质谱仪（LC-ESIMS/MS），采用0.1%甲酸和甲醇的短梯度洗脱，通过多反应监测（MRM）检测前体离子和产物离子。采用 Phoenix（型号 200 和 201）Pharsight WinNonlin® 6.1/6.3 版本进行非房室模型分析，获得药代动力学参数。 小鼠耐受性研究[1] 无菌溶剂制备：将柠檬酸一水合物 (10.5 g) 和柠檬酸三钠二水合物 (14.8 g) 分别溶于 500 mL 无菌水中，制备制剂（10% DMSO，90% 25% (2-羟丙基)-E-环糊精，溶于 50 mM pH 5 柠檬酸缓冲液）。然后将柠檬酸溶液 (87.5 mL) 加入柠檬酸钠二水合物溶液 (163 mL) 中，配制成 pH 5 的柠檬酸缓冲液。将 (2-羟丙基)-E-环糊精 (50 g，平均分子量约 1460) 加入到 pH 5 的柠檬酸缓冲液 (150 mL) 中，测得 pH 值为 5.07。将化合物 26 (CCT251236) 溶解于 DMSO (20.6 mL) 中，然后加入到 25% (2-羟丙基)-E-环糊精的 50 mM pH 5 柠檬酸缓冲液 (185 mL) 中。将混合物超声处理至澄清。未使用的制剂在 5℃ 下保存最多 1 周。化合物 26 (CCT251236) 溶于 10% DMSO，并用 90% 无菌溶剂（25% w/v 羟丙基-β-环糊精，溶于 50 mM pH 5 的柠檬酸钠缓冲液）稀释，使小鼠每 10 g 体重接受 0.1 mL 最终溶液，剂量为所需剂量。对照组仅接受等体积的溶剂。在多剂量耐受性研究中，雌性 NCr 无胸腺小鼠 (n=2) 每天灌胃给予 30 mg/kg 的化合物 26 (CCT251236)，连续 5 天。监测动物的不良反应并每日测量体重，直至观察到完全恢复。 小鼠疗效研究[1] 在疗效研究中，将SK-OV-3细胞（每点500万个）皮下注射到6至8周龄雌性NCr无胸腺小鼠（n=16）的侧腹部。当肿瘤形成良好（直径约5-6毫米）时开始给药。使用游标卡尺测量肿瘤的两个垂直直径，并按照先前描述的方法计算体积10。研究结束后，采集肝素化血液样本，分离血浆并储存在-80℃的S72缓冲液中。切除肿瘤，称重后立即速冻于-80℃，用于后续的药代动力学（PK）和药效学（PD）分析。 CCT251236的体内动物模型方案包括将其口服给药给荷瘤小鼠，例如在人卵巢癌异种移植模型中。通过测量肿瘤生长抑制率来评估该化合物的抗肿瘤疗效。在肿瘤组织中测量药效学标志物，例如 HSF1 靶基因表达，以确认靶点结合情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠药代动力学数据分析表明，二酰胺 26 (CCT251236) 的总血清除率较低（仅占肝血流量的 10%），具有中等的口服生物利用度，且半衰期足以支持每日一次给药。体外血浆蛋白结合率和血浆蛋白比值评估显示，26 与血浆蛋白的结合率很高（约 99%）；因此，其游离清除率较高，口服 5 mg/kg 剂量后的游离暴露量较低，相当于游离 Cav0–24h = 2.0 nM。较高的游离分布容积表明 26 易于与组织结合，这与该化合物的碱性相符。[1]
CCT251236 是一种口服有效的化合物。其分子量为 552.62，分子式为 C32H32N4O5。现有文献中没有详细说明具体的药代动力学参数，例如生物利用度和半衰期。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
现有文献中关于CCT251236的具体毒理学数据并不详尽。作为一种研究用化合物，它仅供研究用途，不得用于人体。临床开发需要进行标准的安全性评估。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
表型筛选侧重于测量和量化离散的细胞变化，而非对单一重组蛋白的亲和力，近年来作为一种高效的药物发现策略重新受到关注。本文描述了一种新型化学探针二酰胺（CCT251236）的发现，该探针是通过无偏表型筛选鉴定的，用于检测HSF1应激通路抑制剂。该化学探针具有口服生物利用度，并在人卵巢癌异种移植模型中显示出疗效。通过构建基于细胞的构效关系（SAR）并应用化学蛋白质组学，我们鉴定出吡啶是其高亲和力分子靶点，并通过表面等离子共振（SPR）和晶体学证实了这一结果。[1]
CCT251236（CAS# 1693731-40-6）是一种用于研究HSF1和pirin在癌症中功能的研究化合物。它是一种口服有效的pirin配体，可抑制HSF1介导的热休克蛋白诱导。它的分子量为552.62，分子式为C32H32N4O5。它尚未获准用于临床，仅供研究用途。 |
| 分子式 |
C32H32N4O5
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|---|---|
| 分子量 |
552.620287895203
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| 精确质量 |
552.24
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| 元素分析 |
C, 69.55; H, 5.84; N, 10.14; O, 14.48
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| CAS号 |
1693731-40-6
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| PubChem CID |
117996749
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.8
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| tPSA |
102
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
41
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| 分子复杂度/Complexity |
884
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
KLHOCHQJHXNKAS-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H32N4O5/c1-21-4-8-25(33-31(37)24-6-10-28-29(19-24)40-17-16-39-28)20-27(21)35-32(38)23-5-9-26-22(18-23)7-11-30(34-26)41-15-14-36-12-2-3-13-36/h4-11,18-20H,2-3,12-17H2,1H3,(H,33,37)(H,35,38)
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| 化学名 |
N-[5-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxine-6-carbonylamino)-2-methylphenyl]-2-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)quinoline-6-carboxamide
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| 别名 |
CCT251236; CCT 251236; CCT251236; 1693731-40-6; N-(5-(2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxine-6-carboxamido)-2-methylphenyl)-2-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy)quinoline-6-carboxamide; CHEMBL4087666; N-[5-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxine-6-amido)-2-methylphenyl]-2-[2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy]quinoline-6-carboxamide; N-[5-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxine-6-carbonylamino)-2-methylphenyl]-2-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)quinoline-6-carboxamide; SCHEMBL16621340; CCT-251236
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 150 mg/mL (~271.4 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8096 mL | 9.0478 mL | 18.0956 mL | |
| 5 mM | 0.3619 mL | 1.8096 mL | 3.6191 mL | |
| 10 mM | 0.1810 mL | 0.9048 mL | 1.8096 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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