CellTracker Blue CMAC

别名: 7-amino-4-chloromethylcoumarin; 7-amino-4-(chloromethyl)-2H-chromen-2-one; 7-amino-4-(chloromethyl)chromen-2-one; CellTracker Blue CMAC; 147963-22-2; 7-amino-4-(chloromethyl)-2H-chromen-2-one; 7-amino-4-(chloromethyl)chromen-2-one; 2H-1-Benzopyran-2-one, 7-amino-4-(chloromethyl)-; CMAC cpd; CMAC; . 7-氨基-4-氯甲基香豆素
目录号: V49311 纯度: ≥98%
CellTracker Blue CMAC 是一种荧光染料试剂,其氯甲基可以与细胞蛋白质形成共价键。
CellTracker Blue CMAC CAS号: 147963-22-2
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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纯度: ≥98%

产品描述
CellTracker Blue CMAC 是一种荧光染料试剂,其氯甲基可与细胞蛋白形成共价键。CellTracker Blue CMAC 可稳定地附着并长期追踪细胞。激发/发射波长:353/466 nm。
CellTracker Blue CMAC(CAS 147963-22-2),又名 7-氨基-4-(氯甲基)-2H-1-苯并吡喃-2-酮,是一种细胞渗透性、硫醇反应性的蓝色荧光染料,用于活细胞的长期标记和追踪。其分子量为 209.63 g/mol,分子式为 C10H8ClNO2。该染料的氯甲基可与细胞蛋白形成共价键,从而实现稳定的附着并进行长期细胞追踪。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent dye
CellTracker Blue CMAC targets cellular proteins through its chloromethyl group, which forms covalent bonds with thiol groups on proteins. Once inside cells, the compound is converted to a fluorescent, glutathione-conjugated product that is well retained and passed to daughter cells while remaining non-toxic. The dye does not have a specific biological receptor target but is used as a cell labeling tool for tracking cell movement, migration, and proliferation.
体外研究 (In Vitro)
CellTrack Blue CMAC(也称为 CellTracker™ Blue CMAC,Molecular Probes 公司的商标)是一种荧光硫醇反应性细胞渗透探针,能够轻松穿过细胞膜。与含硫化合物反应后,该探针能很好地保留在细胞内,并能传递给子细胞数代,但不会转移到细胞群中的相邻细胞。负载该探针的细胞通常至少能保持 24 小时的荧光活性,因此这些探针是优良的长期细胞示踪剂。此外,该探针可用甲醛或戊二醛固定,以便长期保存标记的细胞或组织,从而便于安全处理潜在的致病性样本。
CellTracker Blue CMAC 的优势:
1) 使用简便 - 去除培养基,加入染料,孵育 30 分钟,即可进行细胞成像
2) 荧光信号保持时间 >72 小时(通常可传代 3 至 6 代)
3) 蓝色激发/发射光谱,适用于多通道技术(最大值 353/466 nm)
4) 低细胞毒性 - 不影响细胞活力或增殖
CellTracker Blue CMAC 是一种用于活细胞长期标记和追踪的荧光染料。该染料的氯甲基与细胞蛋白形成共价键,从而实现稳定的结合。进入细胞后,它会转化为荧光性的谷胱甘肽偶联物,该偶联物能够很好地保留并传递给子代细胞。这种染料会发出明亮的蓝色荧光,从而可以观察细胞运动。它常用于细胞迁移、癌症研究、免疫反应和干细胞追踪等领域的研究。
体内研究 (In Vivo)
本文提出了纺织品“活性”染色的包容性化学定义,涵盖了CI偶氮染料、CI媒染染料、CI活性染料、CI硫化染料和CI还原染料等应用类别。这种活性染色能够提高染料在纤维上的保留率,并使实际应用成为可能。本文概述了染料和荧光探针在生物学和医学中作为显微染色剂的类似应用,重点介绍了活性荧光探针在活细胞中的应用。文中指出了与纺织品染色的相似之处,例如,增强探针保留率和简化探针应用。然而,使用活性探针检测活细胞的主要目的是检测生物系统的特性:识别生物结构和化学/生化成分;评估生物功能和理化性质;以及确定细胞和细胞组分位置的变化。本文概述了此类探针存在的问题,特别是许多标准方案的缺陷,以及反应物和产物在理化性质上显著不同的活性探针所导致的定位假象。本文通过对活性氧探针可能产生的反应物/产物伪影的案例研究探讨了后一个问题。将探针定位的实验观察结果与使用定量构效关系 (QSAR) 模型预测的定位结果进行比较表明,这种伪影可能出现在相当一部分化学结构多样、广泛使用的市售探针以及文献报道的实验化合物中。本文提供了一个图形流程图,用于评估活性荧光探针在活细胞各种细胞器中定位时可能产生的反应物/产物伪影[1]。
在体内,CellTracker Blue CMAC 用于活体生物的细胞追踪。该染料的低毒性和稳定的保留性使其适用于长期细胞追踪研究。它可用于在移植或注射到动物模型之前标记细胞,以研究细胞迁移、归巢和植入。该染料的蓝色荧光可用于在组织中可视化标记的细胞。由于该染料用作细胞标记工具而不是治疗剂,因此不适用具体的体内疗效研究。
酶活实验
CellTracker Blue CMAC 染料是一种非常适合用于监测细胞运动或位置的荧光染料。CellTracker Blue CMAC 荧光染料可以自由穿过细胞膜进入细胞,并在细胞内转化为一种不会穿透细胞膜的活性产物。这种染料可以传递给子细胞,但不会传递给细胞群中的相邻细胞。CellTracker Blue CMAC 染料的设计使其至少能持续荧光 72 小时,并具有理想的追踪特性:在工作浓度下稳定、无毒、在细胞内保留良好,并在生理 pH 值下发出明亮的荧光。此外,CellTracker Blue CMAC 染料的激发光谱和发射光谱与 GFP(绿色荧光蛋白)和 RFP(红色荧光蛋白)的光谱完全分离,可以进行多重标记。体外标记实验中,CellTracker Blue CMAC 染料通常与浓度为 1-25 μM 的染料在 37°C 下孵育 15-45 分钟。将染料溶解于DMSO中配制成储备液,然后用无血清或低血清培养基稀释。孵育后,洗涤细胞以去除未结合的染料,然后在完全培养基中培养。使用蓝色荧光激发/发射滤光片通过荧光显微镜或流式细胞仪分析标记的细胞。评估染料的保留率和稳定性随时间的变化。
细胞实验
实验步骤:
1. 将CMAC固体溶解于无水DMSO中,配制成10 mM的储备液。使用无血清培养基将储备液稀释至0.5-25 μM的工作液。使用前将工作液预热至37℃。
2. 根据不同细胞类型,在不同的细胞培养条件下孵育15-45分钟。对于悬浮细胞,离心上清液并收集细胞沉淀。用预热的染色液重悬细胞;对于贴壁细胞,当细胞生长至合适的细胞密度时,移除上清液并加入预热的染色液。
3. 移除染色液,加入新鲜的预热细胞培养基,并在37℃下孵育30分钟。
4. 对于悬浮细胞,取约5 μl染色液滴于载玻片上。盖上盖玻片,并在荧光显微镜下观察。对于贴壁细胞,直接观察即可。(可选)如果需要固定细胞,可以先跳过步骤 4,待固定完成后再进行观察。
5. 用 PBS 洗涤细胞。
6. 用含 3.7% 多聚甲醛的 PBS 固定细胞,室温孵育 15 分钟。
7. 用 PBS 洗涤细胞。
8. 如有必要,可以进行细胞膜通透化处理。当需要用抗体标记细胞时,需要进行细胞膜通透化以促进抗原进入细胞。可以使用冷丙酮处理细胞 10 分钟,以增加细胞膜的通透性。
CellTracker Blue CMAC 的体外细胞实验通常包括标记细胞以进行追踪和增殖研究。将细胞与浓度为 1-25 μM 的染料在 37°C 下孵育 15-45 分钟。标记后的细胞经培养后,利用荧光显微镜或流式细胞仪进行长期监测。细胞增殖通过细胞分裂时荧光强度的稀释来评估。细胞迁移则通过Transwell小室或划痕愈合实验进行评估。该染料的无毒特性使其能够进行长期追踪。
动物实验
CellTracker Blue CMAC 的体内动物研究通常包括先用染料标记细胞,然后再将其移植到动物模型中。标记后的细胞通过注射(静脉注射、皮下注射或局部注射)给药,并通过组织荧光成像对细胞进行长期追踪。该染料的稳定保留使其能够长期追踪细胞的迁移、归巢和植入情况。组织切片通过荧光显微镜进行检查。该染料的低毒性使其适用于体内应用。
药代性质 (ADME/PK)
CellTracker Blue CMAC 的分子量为 209.63 g/mol,分子式为 C10H8ClNO2。它是一种可渗透细胞的染料,溶于 DMSO。建议储存于 -20°C,避光保存。纯度 ≥98%。该染料通常以粉末形式供应,应干燥保存。由于该细胞标记染料不用作治疗剂,因此不提供详细的药代动力学参数。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
CellTracker Blue CMAC 对细胞毒性低,因此适用于长期活细胞追踪。该化合物仅供研究使用,未获准用于人体治疗。与所有化学化合物一样,操作时应采取适当的安全预防措施,包括佩戴手套和护目镜。染料应避光保存,以防止光降解。
参考文献

[1]. Reactive dyes for living cells: Applications, artefacts, and some comparisons with textile dyeing. Coloration technology, 2022,138(1):3-15.

其他信息
CellTracker Blue CMAC(CAS 147963-22-2)是一种细胞渗透性、硫醇反应性蓝色荧光染料,用于活细胞的长期标记和追踪。其分子量为209.63 g/mol,分子式为C10H8ClNO2。该染料的氯甲基与细胞蛋白形成共价键,从而实现稳定的结合。它常用于细胞迁移、癌症研究、免疫反应和干细胞追踪等领域。该化合物也称为7-氨基-4-氯甲基香豆素。目前尚未获准用于临床。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H8NO2CL
分子量
209.62902
精确质量
209.024
CAS号
147963-22-2
PubChem CID
2762598
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.399 g/cm3
沸点
410.3ºC at 760 mmHg
闪点
201.9ºC
蒸汽压
6.1E-07mmHg at 25°C
折射率
1.633
LogP
2.695
tPSA
56.23
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
14
分子复杂度/Complexity
277
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC2=C(C=C1N)OC(=O)C=C2CCl
InChi Key
VIEYMVWPECAOCY-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H8ClNO2/c11-5-6-3-10(13)14-9-4-7(12)1-2-8(6)9/h1-4H,5,12H2
化学名
7-amino-4-(chloromethyl)chromen-2-one; 7-AMINO-4-CHLOROMETHYLCOUMARIN
别名
7-amino-4-chloromethylcoumarin; 7-amino-4-(chloromethyl)-2H-chromen-2-one; 7-amino-4-(chloromethyl)chromen-2-one; CellTracker Blue CMAC; 147963-22-2; 7-amino-4-(chloromethyl)-2H-chromen-2-one; 7-amino-4-(chloromethyl)chromen-2-one; 2H-1-Benzopyran-2-one, 7-amino-4-(chloromethyl)-; CMAC cpd; CMAC; .
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~596.29 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.7703 mL 23.8515 mL 47.7031 mL
5 mM 0.9541 mL 4.7703 mL 9.5406 mL
10 mM 0.4770 mL 2.3852 mL 4.7703 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们