Ceramides Mixture

别名: 100403-19-8; N-(1,3,4-TRIHYDROXYOCTADECAN-2-YL)OCTADEC-9-ENAMIDE; RefChem:124459; Ceramide VI (AP); SCHEMBL29009460; 神经酰胺; N-硬脂酰神经鞘氨醇;芦根提取物;神经酰胺(魔芋提取);神经酰胺-1;神经酰胺-2;神经酰胺-3;己酰基神经鞘氨醇;神经酰胺NP;神经酰胺混合物
目录号: V39113 纯度: ≥95%
神经酰胺混合物是一种内源性神经酰胺,由含有羟基和非羟基脂肪酸的神经酰胺组成。
Ceramides Mixture CAS号: 100403-19-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
50mg
100mg
250mg
500mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: =99.12%

产品描述
神经酰胺混合物是一种内源性神经酰胺,由含有羟基和非羟基脂肪酸的神经酰胺组成。神经酰胺混合物是表皮渗透屏障的主要脂质成分。神经酰胺混合物参与生长抑制、细胞周期停滞和端粒酶活性调节。
神经酰胺代谢的补救途径:外源性短链神经酰胺(C₆-神经酰胺)通过补救途径代谢,涉及神经酰胺酶脱酰基生成神经鞘氨醇,然后由CoA依赖性神经酰胺合酶(被FB1抑制)再酰基生成内源性长链神经酰胺。该过程具有立体特异性(需要D-erythro构型)且需要完整的高尔基体。[1]
神经酰胺的双重生物学功能:神经酰胺独立介导凋亡和细胞周期阻滞。在A549细胞中,C₆-神经酰胺不诱导凋亡,但内源性长链神经酰胺介导生长抑制、G₀/G₁期细胞周期阻滞和端粒酶抑制。在HL-60细胞中,D-和L-erythro-C₆-神经酰胺同样诱导凋亡,不依赖于内源性神经酰胺生成。[1]
特应性皮炎中的神经酰胺缺乏:特应性皮肤显示ω-羟基神经酰胺(蛋白结合型)和超长链脂肪酸(游离可提取型)显著缺乏,这些对表皮通透性屏障功能至关重要。即使在非皮损区也存在这种缺乏,表明存在潜在易感性。皮损区神经酰胺和葡萄糖神经酰胺的从头合成显著减少。[2]
生物活性&实验参考方法
靶点
Dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV), calcium-sensing receptor (CaSR), telomerase, cell cycle regulators (Rb, Cdk2). Ceramide (endogenous long chain species such as C₁₆:₀ and C₂₄:₁) mediates growth inhibition, G₀/G₁ cell cycle arrest, and telomerase inhibition in A549 lung adenocarcinoma cells. It also acts as a competitive inhibitor of DPP-IV and activates CaSR to impart kokumi taste. No specific IC₅₀ or Kᵢ values were reported for ceramide in these studies. [1,2]
Endogenous metabolite
体外研究 (In Vitro)
A549细胞内源性神经酰胺生成:用外源性D-erythro-C₆-神经酰胺(20 μM,24 h)处理A549人肺腺癌细胞,导致内源性长链神经酰胺(主要为C₁₆:₀和C₂₄:₁)增加5-6倍。这种增加被CoA依赖性神经酰胺合酶抑制剂fumonisin B1(FB1,50 μM)抑制,但不受丝氨酸棕榈酰转移酶抑制剂myriocin(MYR,50 nM)影响。[1]
内源性神经酰胺生成机制:使用双标记C₆-神经酰胺([sphingosine-3-³H]D-erythro-C₆-神经酰胺和N-[N-hexanoyl-1-¹⁴C]D-erythro-C₆-神经酰胺)证明,神经鞘氨醇骨架而非脂肪酸链被掺入新合成的长链神经酰胺中。这种掺入被FB1阻断,表明涉及脱酰基(由神经酰胺酶)和再酰基(由神经酰胺合酶)的补救途径。[1]
立体特异性和高尔基体需求:内源性长链神经酰胺的生成具有立体特异性,仅发生在D-erythro-C₆-神经酰胺,而不发生在L-erythro-C₆-神经酰胺或D-erythro-C₆-二氢神经酰胺。该过程被引起高尔基体解体的brefeldin A(10 μg/mL)完全阻断,表明需要完整的高尔基体。[1]
内源性神经酰胺介导的生物活性:D-erythro-C₆-神经酰胺(20 μM,24 h)在A549细胞中诱导G₀/G₁期细胞周期阻滞、生长抑制(约50%)和端粒酶抑制。这些效应被FB1阻断,表明内源性长链神经酰胺介导这些反应。不产生内源性神经酰胺的L-erythro-C₆-神经酰胺和D-erythro-C₆-二氢神经酰胺无此效应。[1]
HL-60细胞凋亡:D-erythro-和L-erythro-C₆-神经酰胺在HL-60人髓系白血病细胞中诱导凋亡的效果相同,24 h的IC₅₀值分别为11 μM和13 μM。该效应不依赖于内源性长链神经酰胺的生成。[1]
特应性皮炎皮肤屏障脂质:在人表皮中,蛋白结合型ω-羟基神经酰胺(ω-OH-Cer)占健康皮肤总蛋白结合脂质的46-53 wt%,但在非皮损区降至23-28 wt%,在皮损区降至10-25 wt%。游离超长链脂肪酸(VLCFA,>C24)在皮损区降至对照组的25%。[¹⁴C]-丝氨酸代谢标记显示,与健康对照相比,皮损区特应性皮肤中游离神经酰胺和葡萄糖神经酰胺的从头合成分别减少46%和77%。[2]
在 A549 人肺癌细胞系中,内源性神经酰胺(由细菌鞘磷脂酶过度表达或柔红霉素治疗产生)通过失活 c-Myc 转录因子和端粒酶活性来抑制端粒酶逆转录酶 mRNA 的产生 [1]。 C6-神经酰胺的鞘氨醇主链的生化回收对于长链内源性神经酰胺的连续生产是必要的。该过程需要对神经酰胺进行脱酰化和再酰化,以产生内源性长链神经酰胺,主要是 C16:0- 和 C24:1-神经酰胺。这些神经酰胺最可能的来源是 CoA 依赖性神经酰胺合酶,伏马菌素 B1 会抑制该酶。 A549 细胞中的长链内源性神经酰胺合成介导外源性 C6-神经酰胺对端粒酶活性调节、细胞周期停滞和生长抑制的影响 [1]。
酶活实验
二酰甘油激酶法测定神经酰胺:使用DGK法测定总内源性神经酰胺水平。提取总细胞脂质,干燥后重悬。DGK测定利用大肠杆菌二酰甘油激酶在放射性标记ATP存在下磷酸化神经酰胺和二酰甘油。磷酸化产物(神经酰胺磷酸和磷脂酸)通过TLC分离,与标准品比对鉴定,并通过闪烁计数定量。结果归一化至内源性磷酸盐水平。[1]
HPLC/MS分析神经酰胺亚型:使用正相HPLC结合大气压化学电离质谱分析内源性神经酰胺种类(C₁₂–C₂₆)。使用ThermoFinnigan LCQ离子阱质谱仪进行分离。[1]
DPP-IV抑制测定:使用荧光法DPP-IV抑制剂筛选试剂盒测定DPP-IV抑制活性。实验在黑色96孔板中进行,使用DPP-IV测定缓冲液(20 mM Tris-HCl,pH 8.0,含100 mM NaCl和1 mM EDTA)。在30分钟内监测360/460 nm处的荧光变化。通过对数回归分析计算IC₅₀值。[1]
表皮神经酰胺生物合成:新鲜制备的人表皮漂浮在含[³-¹⁴C]-丝氨酸(1 μCi/mL)的MCDB 153培养基上,在37°C、5% CO₂中孵育24 h。孵育后,提取脂质,通过TLC分离,用液体闪烁计数定量掺入的放射性,并用磷屏成像仪显影。[2]
气相色谱法分析脂肪酸:用重氮甲烷甲酯化游离可提取脂肪酸,使用HP-1毛细管柱(聚二甲基硅氧烷)进行毛细管气相色谱分析。温度程序为:150°C保持4 min,然后以4°C/min升温至250°C,保持10 min。脂肪酸甲酯通过火焰离子化检测器检测,通过与参考标准品比较保留时间进行鉴定。[2]
细胞实验
细胞活力测定(MTT和台盼蓝):A549细胞(5 × 10³个/孔,96孔板)用递增浓度的C₆-神经酰胺处理72 h,然后加入MTT(25 μL)孵育4-5 h。裂解后,在570 nm处读取吸光度。台盼蓝拒染法:细胞(1 × 10⁵个)在6孔板中处理24 h,然后用血细胞计数器与台盼蓝溶液计数。[1]
流式细胞术细胞周期分析:用C₆-神经酰胺(20 μM,24 h)处理的A549细胞经RNase处理后用碘化丙啶(50 μg/mL)染色,通过流式细胞术分析DNA含量(每样本15,000个事件)。[1]
端粒酶活性测定(TRAP法):使用TRAPeze试剂盒测定端粒酶活性。细胞提取物(50-100 ng蛋白)加入含dNTP、TS引物、反向引物混合物和Taq聚合酶的TRAP反应混合物中。通过PCR(94°C 30 s,60°C 30 s,27个循环)扩增延伸产物。产物通过12.5%丙烯酰胺凝胶电泳分离,放射自显影显像。[1]
Western blot分析(PARP裂解):总蛋白(50 μg/泳道)经4-15% SDS-PAGE分离,转移至Immobilon膜,用兔多克隆抗PARP抗体(1 μg/mL)和过氧化物酶标记的二抗(1:2500)孵育。[1]
[³H]棕榈酸代谢标记:A549细胞(1 × 10⁵个)在6孔板中用[³H]棕榈酸(1 μCi/mL)与或不与20 μM C₆-神经酰胺在不同时间点培养。用Bligh和Dyer法提取脂质,用氯仿/甲醇/2× NH₄OH(40:10:1)通过TLC分离。[1]
参考文献

[1]. Biochemical mechanisms of the generation of endogenous long chain ceramide in response to exogenous short chain ceramide in the A549 human lung adenocarcinoma cell line. Role for endogenous ceramide in mediating the action of exogenous ceramide. J Biol Chem. 2002 Apr 12;277(15):12960-9.

[2]. Deficiency of epidermal protein-bound omega-hydroxyceramides in atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 2002 Jul;119(1):166-73.

其他信息
N-油酰植物鞘氨醇是一种植物神经酰胺,其N-酰基为油酰基(9Z-十八碳烯酰基)。它在功能上与油酸相关。神经酰胺NP是一种脂质分子,属于神经酰胺类脂质分子。神经酰胺是人体皮肤角质层的主要脂质成分。神经酰胺3由植物鞘氨醇骨架和饱和脂肪酸(硬脂酸)N-酰化而成。它广泛用作各种化妆品和个人护理产品的保湿剂。神经酰胺3与神经酰胺1协同作用,可增强人体皮肤屏障功能。另见:神经酰胺3(注释已移至此处)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C46H82N2O23
分子量
1031.14288
精确质量
581.538
CAS号
100403-19-8
PubChem CID
57378373
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
LogP
12.4
tPSA
89.8
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
32
重原子数目
41
分子复杂度/Complexity
568
定义原子立体中心数目
3
SMILES
CCCCCCCCCCCCC/C=C/[C@H]([C@H](COC1O[C@H](CO)[C@@H](O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O[C@@H]4O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]4O)[C@H](O)[C@H]3NC(=O)C)[C@H]2O)[C@H](O)[C@H]1O)NC(=O)C)O
InChi Key
ATGQXSBKTQANOH-UWVGARPKSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H71NO4/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-18-19-21-23-25-27-29-31-35(40)37-33(32-38)36(41)34(39)30-28-26-24-22-20-16-14-12-10-8-6-4-2/h17-18,33-34,36,38-39,41H,3-16,19-32H2,1-2H3,(H,37,40)/b18-17-/t33-,34+,36-/m0/s1
化学名
(Z)-N-[(2S,3S,4R)-1,3,4-trihydroxyoctadecan-2-yl]octadec-9-enamide
别名
100403-19-8; N-(1,3,4-TRIHYDROXYOCTADECAN-2-YL)OCTADEC-9-ENAMIDE; RefChem:124459; Ceramide VI (AP); SCHEMBL29009460;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL
H2O : ~33.33 mg/mL
MEthanol : ~25 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (Infinity mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9698 mL 4.8490 mL 9.6980 mL
5 mM 0.1940 mL 0.9698 mL 1.9396 mL
10 mM 0.0970 mL 0.4849 mL 0.9698 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

相关产品
联系我们