| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Src (IC50s = 5-40 nM)
CGP-77675 targets Src family kinases (SFKs), including Src, Lck, and Fyn, which are key regulators of signal transduction in cell growth, differentiation, and immune responses. By inhibiting SFK activity, CGP-77675 blocks downstream signaling pathways involved in cancer progression and immune modulation. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
CGP77675 可剂量依赖性地抑制聚谷氨酸-酪氨酸 (poly-Glu-Tyr) 磷酸化 (IC50 = 5.5 nM) 和最佳 Src 底物 (OSS) 肽 (IC50 = 16.7 nM) 的磷酸化。这些 IC50 值与使用 20 nM 鸡 Src 的结果相似 [1]。CGP77675 的 IC50 值为 0.8 μM，可抑制大鼠胎儿长骨培养物中甲状旁腺激素引起的骨吸收 [1]。 CGP77675（0.04-10 μM；2 小时）对 IC8.1 细胞中的 Src 活性影响甚微（IC50 值分别为 0.2、0.5 和 5.7 μM），但能有效抑制 Src 底物 Fak 和 paxillin 的酪氨酸磷酸化 [1]。体外实验表明，CGP-77675 对 Src、EGFR、KDR、v-Abl 和 Lck 的抑制作用 IC50 值分别为 20、150 和 1000 nM。它对其他蛋白激酶也具有选择性，包括 Cdc2（抑制倍数 >500 倍）、EGF 受体（抑制倍数 7.5 倍）、VEGFR（抑制倍数 >50 倍）、v-Abl（抑制倍数 15 倍）和 FAK（抑制倍数 >25 倍）。
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| 体内研究 (In Vivo) |
小鼠每日两次皮下注射CGP77675（1、5和25 mg/kg）可预防IL-1β诱导的高钙血症[1]。在年轻的卵巢切除（Ovx）大鼠中，口服CGP77675（10和50 mg/kg；每日两次，持续6周）可恢复骨微结构特征并部分预防骨丢失[1]。体内实验表明，CGP-77675具有口服生物活性，并已被用于研究多种模型中的Src家族激酶信号通路。它与GSK3抑制剂CHIR99021联合使用，用于维持小鼠胚胎干细胞（ES细胞）。该化合物对细胞生长、分化和免疫反应的影响也已被研究。
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| 酶活实验 |
蛋白激酶活性测定[1]
使用人Src酶进行基于33P的酪氨酸激酶活性测定，激酶缓冲液包含20 mmol/L Tris（pH 7.4）、10 mmol/L MgCl2、0.1 mmol/L钒酸钠和1 mmol/L二硫苏糖醇（DTT），底物为浓度为1和0.5 mg/mL的聚谷氨酸-酪氨酸（4:1）或最佳Src底物（OSS）肽；50 μmol/L三磷酸腺苷（ATP），以及每次测定0.5–2 μCi的33P-γATP。室温孵育15分钟。反应用33 mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA）终止，并将产物点样至磷酸纤维素滤纸片上。将纸片用0.5%磷酸洗涤三次，用无水乙醇洗涤一次，风干后，用液体闪烁计数器定量测定纸片上的放射性。鸡Src的表达和纯化方法如前所述；该检测方法与人Src的检测方法类似，不同之处在于常规筛选时使用6 μmol/L ATP，并且磷酸化的聚谷氨酸-酪氨酸（poly Glu-Tyr）被保留在Immobilon-P膜上。人Lck在杆状病毒系统中表达为His标签蛋白，纯化后，在含有25 mmol/L Hepes（pH 7.4）、10 mmol/L MnCl₂、0.1 mmol/L钒酸钠、0.2 mmol/L DTT、6 μmol/L ATP和0.5 mg/mL聚谷氨酸-酪氨酸底物的激酶缓冲液中进行检测。EGF受体、v-Abl和Cdc2的检测方法如前所述。通过测定合成底物poly-Glu-Tyr (3 μg/mL) 的磷酸化水平，检测了人血管内皮生长因子 (VEGF) 受体 KDR 和 Flt-1 的激酶活性。所用融合蛋白为纯化的谷胱甘肽 S-转移酶与受体激酶结构域的融合蛋白。激酶缓冲液包含 20 mmol/L Tris（pH 7.6）、3 mmol/L MnCl2、3 mmol/L MgCl2、1 mmol/L DTT、10 μmol/L 钒酸钠和 8 μmol/L ATP。 激酶自磷酸化反应 [1] 将人 Src 激酶（UBI；1.5 U/反应）在含有 20 mmol/L Tris（pH 7.4）、10 mmol/L MgCl2、0.1 mmol/L 钒酸钠、1 mmol/L DTT 和 10 μCi [32P]ATP（3000 Ci/mmol）的激酶缓冲液中于 37°C 孵育 10 分钟。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 分离蛋白质后，进行放射自显影分析，并在 PhosphorImager 屏幕（Molecular Dynamics，Sunnyvale，CA）上曝光后进行定量。使用单克隆抗体 2A7（UBI）免疫沉淀粘着斑激酶，并按上述方法洗涤免疫复合物。用激酶缓冲液（30 mmol/L Tris，pH 7.5，2 mmol/L MgCl₂ 和 5 mmol/L MnCl₂）进行额外洗涤。蛋白激酶活性测定在 30 μL 激酶缓冲液和 10 μCi [³²P]ATP（3000 Ci/mmol）的反应体系中于 37°C 下进行 10 分钟。免疫复合物用 1 mL 冰冷的 TNE（Tris-NaCl-EDTA）缓冲液（参见免疫沉淀部分）洗涤三次，以去除游离的 [³²P]ATP。抗原通过在 50 μL SDS 上样缓冲液中煮沸从磁珠上释放下来，并进行 12% SDS-PAGE 电泳。通过放射自显影法分析自磷酸化，并在磷光成像仪屏幕曝光后进行定量分析。 体外Src家族激酶抑制活性测定通常使用重组Src、Lck或Fyn酶以及合适的肽底物。将酶与ATP和底物在不同浓度的CGP-77675存在下孵育。通过放射法或发光法检测底物的磷酸化来测定激酶活性。IC50值由剂量反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： MC3T3-E1 细胞 测试浓度： 0.2、1 和 5 μM 孵育时间： 3 天 实验结果： 处理长达 3 天不影响细胞活力。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： Src 过表达 IC8.1 细胞 测试浓度： 0.04、0.2、1、5 和 10 μM 孵育时间： 2 小时 实验结果： Fak 和 paxillin 磷酸化呈剂量依赖性抑制，但 Src 磷酸化不受影响。 SFK 抑制剂的体外细胞实验通常使用癌细胞系或免疫细胞。将细胞用不同浓度的 CGP-77675 处理，并通过蛋白质印迹法评估 SFK 介导的下游靶点（例如 FAK、paxillin）的磷酸化。使用适当的检测方法测量细胞增殖、迁移和侵袭能力。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性小鼠（Tif:MAGf；诺华动物农场），体重 25-30 g [1]
剂量： 1、5 和 25 mg/kg 给药途径： 皮下注射；每日两次 实验结果： 预防小鼠 IL-1β 诱导的高钙血症，且不影响血清淀粉样蛋白水平。 动物/疾病模型： 8 周龄（175-209 g）雌性大鼠，SD（SD（Sprague-Dawley））衍生品系 Tif:RAlf[1] 剂量： 10 和 50 mg/kg 给药途径： 口服；每日两次，持续 6 周。 实验结果：部分预防骨质流失。 SFK 抑制剂的体内动物研究通常使用异种移植瘤模型或免疫介导疾病模型。动物口服不同剂量的 CGP-77675。监测肿瘤生长或疾病进展。通过蛋白质印迹或免疫组织化学方法在组织样本中评估 SFK 靶点结合和通路调控。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
CGP-77675 具有良好的口服生物活性和生物利用度。作为一种小分子激酶抑制剂，它能分布于多种组织。该化合物在肝脏代谢，其代谢产物经肾脏和胆汁排泄。临床前研究已提供了详细的药代动力学参数，例如半衰期、Cmax 和 AUC。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CGP-77675 的临床前毒性研究通常包括啮齿动物的急性毒性和重复给药毒性试验，以及遗传毒性和安全性药理学评估。作为一种激酶抑制剂，应监测其对其他激酶和免疫功能的潜在脱靶效应。该化合物在治疗剂量下通常耐受性良好。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CGP-77675 (ZINC1488120) 是一种强效且选择性的 Src 家族激酶抑制剂，包括 Src、Lck 和 Fyn。它能以 5-20 nM 的 IC50 值抑制肽底物磷酸化，并以 40 nM 的 IC50 值抑制 Src 的自身磷酸化。该化合物具有口服生物活性，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C26H29N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
443.54
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| 精确质量 |
443.232
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| 元素分析 |
C, 70.41; H, 6.59; N, 15.79; O, 7.21
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| CAS号 |
234772-64-6
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| 相关CAS号 |
CGP77675 hydrate
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| PubChem CID |
5311381
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
4.196
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| tPSA |
89.43
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
608
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
COC1=CC=CC(=C1)C2=CN(C3=CC=C(C=C3)CCN4CCC(CC4)O)C5=NC=NC(=C25)N
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| InChi Key |
WUPXZZWTHIZICK-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H29N5O2/c1-33-22-4-2-3-19(15-22)23-16-31(26-24(23)25(27)28-17-29-26)20-7-5-18(6-8-20)9-12-30-13-10-21(32)11-14-30/h2-8,15-17,21,32H,9-14H2,1H3,(H2,27,28,29)
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| 化学名 |
1-(4-(4-amino-5-(3-methoxyphenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)phenethyl)piperidin-4-ol
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| 别名 |
CGP77675; CGP 77675; CGP-77675
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~26.0 mg/mL (~58.62 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2546 mL | 11.2729 mL | 22.5459 mL | |
| 5 mM | 0.4509 mL | 2.2546 mL | 4.5092 mL | |
| 10 mM | 0.2255 mL | 1.1273 mL | 2.2546 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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