| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
| 靶点 |
AhR (aryl hydrocarbon receptor)
CH-223191 is a selective antagonist of the aryl hydrocarbon receptor (AhR). It exhibits an IC50 of 0.4 nM in an AhR-responsive luciferase reporter assay (HepG2 cells transfected with AhR and DRE-luciferase plasmid) and a Ki of 0.6 nM in a competitive AhR binding assay using [³H]-TCDD as the radioligand. It shows no significant binding to other nuclear receptors (e.g., PPARα, RARγ) at concentrations up to 1 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CH-223191（0.1-10 μM；预处理1小时）以剂量依赖性方式抑制TCDD产生的细胞色素P450 1A1 mRNA的表达[1]。 CH-223191（0.1-10 μM；预处理1小时）以浓度依赖性方式抑制TCDD产生的细胞色素P450酶活性[1]。
HepG2细胞AhR激活抑制：CH-223191（0.1-10 nM）处理24小时，呈剂量依赖性抑制2,3,7,8-TCDD（1 nM）诱导的AhR激活。1 nM浓度时，较TCDD单独处理组抑制DRE-荧光素酶活性85%；10 nM时抑制率>95%。RT-PCR分析显示，1 nM CH-223191使TCDD诱导的CYP1A1 mRNA表达降低78%，Western blot证实CYP1A1蛋白水平降低72%[1] - 保护TCDD诱导的细胞凋亡：HepG2细胞经TCDD（10 nM）处理48小时，凋亡率升高35%（Annexin V-FITC/PI染色）。TCDD暴露前1小时用CH-223191（1 nM）预处理，可将凋亡率降至8%，与正常对照组接近。这种保护作用与抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高2.3倍、促凋亡蛋白Bax表达降低45%相关（Western blot检测）[1] - 原代肝细胞实验：分离的小鼠原代肝细胞经TCDD（1 nM）处理后，CYP1A1活性（EROD实验）升高5.2倍。与CH-223191（0.5 nM）共孵育后，CYP1A1活性仅较基线升高1.8倍，证实其可抑制AhR介导的靶基因功能[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受 TCDD 治疗的小鼠中，CH-223191（10 mg/kg；每天一次；25 天）降低了 AST 和 ALT 的活性，并降低了肝脏中细胞色素 P450 1A1 的表达和肝细胞内脂肪含量[1]。
C57BL/6小鼠TCDD诱导毒性模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）腹腔注射TCDD（30 μg/kg）诱导全身毒性。TCDD给药前1小时腹腔注射CH-223191（10 mg/kg），可显著缓解毒性。72小时后，CH-223191+TCDD组血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平分别为32 U/L和45 U/L，而TCDD单独处理组为128 U/L和156 U/L（正常范围：20-40 U/L）。肝、肾组织Western blot显示，CH-223191使TCDD诱导的CYP1A1蛋白表达在肝脏中降低68%，在肾脏中降低75%[1] - 预防小鼠体重下降：TCDD（30 μg/kg）处理72小时后，小鼠体重下降12%；而CH-223191+TCDD组仅下降3%，与溶媒对照组（无TCDD、无CH-223191）接近[1] |
| 酶活实验 |
在这项研究中，通过筛选由大约10000种化合物组成的化学文库，我们鉴定了一种新的化合物，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸（2-甲基-4-邻甲苯偶氮-苯基）-酰胺（CH-223191），它能有效抑制TCDD诱导的AhR依赖性转录。此外，CH-223191阻断TCDD与AhR的结合，并抑制TCDD介导的AhR的核转位和DNA结合。CH-223191的这些抑制作用阻止了细胞色素P450酶（AhR的靶基因）的表达。与许多已知的AhR拮抗剂不同，CH-223191不具有可检测的AhR激动剂样活性或雌激素效力，这表明CH-22319l是AhR的特异性拮抗剂[1]。
AhR响应性荧光素酶报告基因实验：HepG2细胞以5×10⁴细胞/孔接种于24孔板，含10% FBS的DMEM培养24小时。用转染试剂共转染0.5 μg人AhR表达质粒、0.5 μg二噁英响应元件（DRE）-荧光素酶报告质粒和0.1 μg β-半乳糖苷酶质粒（内参）。24小时后，更换为含CH-223191（0.1、0.3、1、3、10 nM）和1 nM TCDD的无血清DMEM，继续孵育24小时。用报告基因裂解缓冲液裂解细胞， luminometer检测荧光素酶活性，比色法检测β-半乳糖苷酶活性以校正转染效率，通过非线性回归（四参数逻辑模型）计算IC50[1] - AhR竞争结合实验：大鼠肝脏经匀浆缓冲液（含10%甘油、20 mM HEPES、1 mM EDTA、10 mM钼酸钠）匀浆后，离心（4°C，100,000×g，60分钟）制备胞质组分。200 μL结合反应体系包含50 μg肝胞质蛋白、1 nM [³H]-TCDD和CH-223191（0.01-10 nM）。4°C孵育2小时后，加入50 μL羟基磷灰石（0.5 g/mL结合缓冲液）分离结合态与游离态[³H]-TCDD。离心（3,000×g，5分钟）后，沉淀用冷结合缓冲液洗涤3次，液体闪烁计数仪检测沉淀的放射性，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki[1] |
| 细胞实验 |
RT-PCR[1]
细胞类型： HepG2 细胞 测试浓度： 0.1-10 μM 孵育时间： 1小时 实验结果：抑制TCDD诱导的细胞色素P450 mRNA表达。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： HepG2 细胞 测试浓度： 0.1-10 μM 孵育时间：1小时 实验结果：减少TCDD引起的细胞色素P450 1A1蛋白处理。 HepG2细胞荧光素酶活性检测：HepG2细胞以2×10⁴细胞/孔接种于96孔板，培养24小时。转染DRE-荧光素酶和AhR质粒（同酶活性实验）后，用CH-223191（0.1-10 nM）+1 nM TCDD处理24小时。每孔加入荧光素酶底物，酶标仪检测发光强度，结果以β-半乳糖苷酶活性归一化[1] - RT-PCR检测CYP1A1 mRNA：HepG2细胞（5×10⁵细胞/6孔板）用CH-223191（0.1-10 nM）+1 nM TCDD处理24小时。RNA提取试剂盒提取总RNA，逆转录合成cDNA。以CYP1A1特异性引物（正向：5'-GAGCTGTTTGGCAATGGCTAC-3'，反向：5'-CAGGTAGGGTTGAGCATGTTG-3'）和GAPDH引物（内参）进行RT-PCR。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离，ImageJ定量条带灰度[1] - Western blot检测CYP1A1蛋白：HepG2细胞（1×10⁶细胞/10 cm培养皿）用CH-223191（1 nM）+1 nM TCDD处理48小时。含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度。30 μg蛋白经10% SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，一抗孵育CYP1A1和β-肌动蛋白（内参），HRP标记二抗结合后ECL显色[1] - 细胞凋亡检测：HepG2细胞（2×10⁵细胞/6孔板）用CH-223191（1 nM）预处理1小时，再暴露于10 nM TCDD 48小时。收集细胞，Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）室温染色15分钟，流式细胞术分析，凋亡率以Annexin V阳性细胞百分比计算[1] |
| 动物实验 |
Animal/Disease Models: Male ICR mice (6 weeks old)[1]
Doses: 10 mg/kg Route of Administration: 10 mg/kg; one time/day; 25 days Experimental Results: Prevented TCDD-elicited cytochrome P450 induction, liver toxicity, and wasting syndrome in mice. C57BL/6 Mouse TCDD-Induced Toxicity Model: Male C57BL/6 mice (8-10 weeks old, 22-25 g) were housed under SPF conditions (22±2°C, 12-hour light/dark cycle, free access to food and water). Mice were randomly divided into 4 groups (n=6/group): 1. Vehicle control: Intraperitoneal injection of corn oil (10 mL/kg) + DMSO (0.1%, 10 mL/kg); 2. TCDD-only: Intraperitoneal injection of TCDD (30 μg/kg, dissolved in corn oil) + DMSO (0.1%); 3. CH-223191-only: Intraperitoneal injection of CH-223191 (10 mg/kg, dissolved in DMSO + corn oil) + corn oil; 4. CH-223191+TCDD: Intraperitoneal injection of CH-223191 (10 mg/kg) 1 hour before TCDD (30 μg/kg) administration. Seventy-two hours after TCDD injection, mice were euthanized with CO₂. Blood was collected via the abdominal aorta to measure serum ALT and AST levels (using a colorimetric kit). Livers and kidneys were excised: one portion was fixed in 4% paraformaldehyde for histopathology (H&E staining), and another portion was homogenized for Western blot detection of CYP1A1 protein [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Acute in vitro toxicity: Treatment of HepG2 cells with CH-223191 (0.1-100 nM) for 48 hours showed no significant cytotoxicity—cell viability remained >95% (MTT assay) across all concentrations [1]
- Acute in vivo toxicity: In C57BL/6 mice, single intraperitoneal injection of CH-223191 (10 mg/kg or 20 mg/kg) caused no abnormal behavior (e.g., lethargy, diarrhea), weight loss (<2% of baseline), or changes in serum ALT, AST, BUN, or creatinine levels compared to the vehicle control group. Histopathological examination of liver, kidney, and spleen showed no signs of tissue damage [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CH-223191 is a synthetic small-molecule AhR antagonist that exerts its effects by competitively binding to the ligand-binding domain of AhR, preventing TCDD (a potent AhR agonist and environmental toxin) from activating AhR. This inhibition blocks AhR nuclear translocation and subsequent transcription of target genes (e.g., CYP1A1) that mediate TCDD-induced toxicity [1]
- The compound is widely used as a research tool to study AhR signaling pathways in vitro and in vivo, particularly in investigating the role of AhR in environmental toxin-induced diseases (e.g., hepatotoxicity, carcinogenicity). Unlike some AhR antagonists, CH-223191 does not exhibit partial agonist activity at high concentrations, making it a highly specific tool for AhR inhibition [1] - In Literature [1], CH-223191 demonstrated potent protective effects against TCDD-induced liver damage and systemic toxicity in mice, suggesting potential applications in mitigating adverse health effects caused by AhR-activating environmental pollutants (e.g., dioxins, polycyclic aromatic hydrocarbons) [1] |
| 分子式 |
C19H19N5O
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|---|---|
| 分子量 |
333.39
|
| 精确质量 |
333.158
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| 元素分析 |
C, 68.45; H, 5.74; N, 21.01; O, 4.80
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| CAS号 |
301326-22-7
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| PubChem CID |
3091786
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
469.4±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
237.7±28.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.633
|
| LogP |
3.48
|
| tPSA |
75.13
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
482
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1=CC=NN1C)NC2=CC=C(/N=N/C3=CC=CC=C3C)C=C2C
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| InChi Key |
LKTNEXPODAWWFM-GHVJWSGMSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H19N5O/c1-13-6-4-5-7-17(13)23-22-15-8-9-16(14(2)12-15)21-19(25)18-10-11-20-24(18)3/h4-12H,1-3H3,(H,21,25)/b23-22+
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| 化学名 |
(E)-1-methyl-N-(2-methyl-4-(o-tolyldiazenyl)phenyl)-1H-pyrazole-5-carboxamide
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| 别名 |
CH223191; CH-223191; CH 223191.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 66 mg/mL (198.0 mM)
Water:<1 mg/mL Ethanol: 4 mg/mL (12.0 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.33 mg/mL (0.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 3.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 20 mg/mL (59.99 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9995 mL | 14.9975 mL | 29.9949 mL | |
| 5 mM | 0.5999 mL | 2.9995 mL | 5.9990 mL | |
| 10 mM | 0.2999 mL | 1.4997 mL | 2.9995 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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