| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AhR (aryl hydrocarbon receptor)
CH-223191 is a selective antagonist of the aryl hydrocarbon receptor (AhR). It exhibits an IC50 of 0.4 nM in an AhR-responsive luciferase reporter assay (HepG2 cells transfected with AhR and DRE-luciferase plasmid) and a Ki of 0.6 nM in a competitive AhR binding assay using [³H]-TCDD as the radioligand. It shows no significant binding to other nuclear receptors (e.g., PPARα, RARγ) at concentrations up to 1 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CH-223191（0.1-10 μM；预处理1小时）以剂量依赖性方式抑制TCDD产生的细胞色素P450 1A1 mRNA的表达[1]。 CH-223191（0.1-10 μM；预处理1小时）以浓度依赖性方式抑制TCDD产生的细胞色素P450酶活性[1]。
HepG2细胞AhR激活抑制：CH-223191（0.1-10 nM）处理24小时，呈剂量依赖性抑制2,3,7,8-TCDD（1 nM）诱导的AhR激活。1 nM浓度时，较TCDD单独处理组抑制DRE-荧光素酶活性85%；10 nM时抑制率>95%。RT-PCR分析显示，1 nM CH-223191使TCDD诱导的CYP1A1 mRNA表达降低78%，Western blot证实CYP1A1蛋白水平降低72%[1] - 保护TCDD诱导的细胞凋亡：HepG2细胞经TCDD（10 nM）处理48小时，凋亡率升高35%（Annexin V-FITC/PI染色）。TCDD暴露前1小时用CH-223191（1 nM）预处理，可将凋亡率降至8%，与正常对照组接近。这种保护作用与抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高2.3倍、促凋亡蛋白Bax表达降低45%相关（Western blot检测）[1] - 原代肝细胞实验：分离的小鼠原代肝细胞经TCDD（1 nM）处理后，CYP1A1活性（EROD实验）升高5.2倍。与CH-223191（0.5 nM）共孵育后，CYP1A1活性仅较基线升高1.8倍，证实其可抑制AhR介导的靶基因功能[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受 TCDD 治疗的小鼠中，CH-223191（10 mg/kg；每天一次；25 天）降低了 AST 和 ALT 的活性，并降低了肝脏中细胞色素 P450 1A1 的表达和肝细胞内脂肪含量[1]。
C57BL/6小鼠TCDD诱导毒性模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）腹腔注射TCDD（30 μg/kg）诱导全身毒性。TCDD给药前1小时腹腔注射CH-223191（10 mg/kg），可显著缓解毒性。72小时后，CH-223191+TCDD组血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平分别为32 U/L和45 U/L，而TCDD单独处理组为128 U/L和156 U/L（正常范围：20-40 U/L）。肝、肾组织Western blot显示，CH-223191使TCDD诱导的CYP1A1蛋白表达在肝脏中降低68%，在肾脏中降低75%[1] - 预防小鼠体重下降：TCDD（30 μg/kg）处理72小时后，小鼠体重下降12%；而CH-223191+TCDD组仅下降3%，与溶媒对照组（无TCDD、无CH-223191）接近[1] |
| 酶活实验 |
在这项研究中，通过筛选由大约10000种化合物组成的化学文库，我们鉴定了一种新的化合物，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸（2-甲基-4-邻甲苯偶氮-苯基）-酰胺（CH-223191），它能有效抑制TCDD诱导的AhR依赖性转录。此外，CH-223191阻断TCDD与AhR的结合，并抑制TCDD介导的AhR的核转位和DNA结合。CH-223191的这些抑制作用阻止了细胞色素P450酶（AhR的靶基因）的表达。与许多已知的AhR拮抗剂不同，CH-223191不具有可检测的AhR激动剂样活性或雌激素效力，这表明CH-22319l是AhR的特异性拮抗剂[1]。
AhR响应性荧光素酶报告基因实验：HepG2细胞以5×10⁴细胞/孔接种于24孔板，含10% FBS的DMEM培养24小时。用转染试剂共转染0.5 μg人AhR表达质粒、0.5 μg二噁英响应元件（DRE）-荧光素酶报告质粒和0.1 μg β-半乳糖苷酶质粒（内参）。24小时后，更换为含CH-223191（0.1、0.3、1、3、10 nM）和1 nM TCDD的无血清DMEM，继续孵育24小时。用报告基因裂解缓冲液裂解细胞， luminometer检测荧光素酶活性，比色法检测β-半乳糖苷酶活性以校正转染效率，通过非线性回归（四参数逻辑模型）计算IC50[1] - AhR竞争结合实验：大鼠肝脏经匀浆缓冲液（含10%甘油、20 mM HEPES、1 mM EDTA、10 mM钼酸钠）匀浆后，离心（4°C，100,000×g，60分钟）制备胞质组分。200 μL结合反应体系包含50 μg肝胞质蛋白、1 nM [³H]-TCDD和CH-223191（0.01-10 nM）。4°C孵育2小时后，加入50 μL羟基磷灰石（0.5 g/mL结合缓冲液）分离结合态与游离态[³H]-TCDD。离心（3,000×g，5分钟）后，沉淀用冷结合缓冲液洗涤3次，液体闪烁计数仪检测沉淀的放射性，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki[1] |
| 细胞实验 |
RT-PCR[1]
细胞类型： HepG2 细胞 测试浓度： 0.1-10 μM 孵育时间： 1小时 实验结果：抑制TCDD诱导的细胞色素P450 mRNA表达。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： HepG2 细胞 测试浓度： 0.1-10 μM 孵育时间：1小时 实验结果：减少TCDD引起的细胞色素P450 1A1蛋白处理。 HepG2细胞荧光素酶活性检测：HepG2细胞以2×10⁴细胞/孔接种于96孔板，培养24小时。转染DRE-荧光素酶和AhR质粒（同酶活性实验）后，用CH-223191（0.1-10 nM）+1 nM TCDD处理24小时。每孔加入荧光素酶底物，酶标仪检测发光强度，结果以β-半乳糖苷酶活性归一化[1] - RT-PCR检测CYP1A1 mRNA：HepG2细胞（5×10⁵细胞/6孔板）用CH-223191（0.1-10 nM）+1 nM TCDD处理24小时。RNA提取试剂盒提取总RNA，逆转录合成cDNA。以CYP1A1特异性引物（正向：5'-GAGCTGTTTGGCAATGGCTAC-3'，反向：5'-CAGGTAGGGTTGAGCATGTTG-3'）和GAPDH引物（内参）进行RT-PCR。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离，ImageJ定量条带灰度[1] - Western blot检测CYP1A1蛋白：HepG2细胞（1×10⁶细胞/10 cm培养皿）用CH-223191（1 nM）+1 nM TCDD处理48小时。含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度。30 μg蛋白经10% SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，一抗孵育CYP1A1和β-肌动蛋白（内参），HRP标记二抗结合后ECL显色[1] - 细胞凋亡检测：HepG2细胞（2×10⁵细胞/6孔板）用CH-223191（1 nM）预处理1小时，再暴露于10 nM TCDD 48小时。收集细胞，Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）室温染色15分钟，流式细胞术分析，凋亡率以Annexin V阳性细胞百分比计算[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性ICR小鼠（6周龄）[1]
剂量：10 mg/kg 给药途径：10 mg/kg；每日一次；25天 实验结果：预防了TCDD诱导的小鼠细胞色素P450诱导、肝毒性和消耗综合征。 C57BL/6小鼠TCDD诱导毒性模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，22-25 g）饲养于SPF级条件下（22±2°C，12小时光照/黑暗循环，自由摄食饮水）。小鼠被随机分为4组（每组n=6）： 1. 溶剂对照组：腹腔注射玉米油（10 mL/kg）+ DMSO（0.1%，10 mL/kg）； 2. 仅TCDD组：腹腔注射TCDD（30 μg/kg，溶于玉米油）+ DMSO（0.1%）； 3. 仅CH-223191组：腹腔注射CH-223191（10 mg/kg，溶于DMSO和玉米油）+ 玉米油； 4. CH-223191+TCDD组：在注射TCDD（30 μg/kg）前1小时腹腔注射CH-223191（10 mg/kg）。注射TCDD数小时后，用二氧化碳处死小鼠。通过腹主动脉采集血液，使用比色法试剂盒测定血清ALT和AST水平。取出肝脏和肾脏：一部分用4%多聚甲醛固定，用于组织病理学检查（苏木精-伊红染色）；另一部分匀浆，用于Western blot检测CYP1A1蛋白[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性体外毒性：用CH-223191（0.1-100 nM）处理HepG2细胞48小时，未观察到明显的细胞毒性——所有浓度下细胞活力均保持在95%以上（MTT法）[1]
- 急性体内毒性：在C57BL/6小鼠中，单次腹腔注射CH-223191（10 mg/kg或20 mg/kg）未引起异常行为（例如嗜睡、腹泻）、体重减轻（低于基线的2%）或血清ALT、AST、BUN或肌酐水平的变化，与溶剂对照组相比无明显差异。肝脏、肾脏和脾脏的组织病理学检查未见组织损伤迹象[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CH-223191 是一种合成的小分子 AhR 拮抗剂，它通过与 AhR 的配体结合域竞争性结合发挥作用，阻止 TCDD（一种强效的 AhR 激动剂和环境毒素）激活 AhR。这种抑制作用阻断了 AhR 的核转位以及随后介导 TCDD 诱导毒性的靶基因（例如 CYP1A1）的转录[1]。该化合物被广泛用作研究工具，用于体外和体内研究 AhR 信号通路，特别是研究 AhR 在环境毒素诱导的疾病（例如肝毒性、致癌性）中的作用。与某些AhR拮抗剂不同，CH-223191在高浓度下不表现出部分激动剂活性，使其成为一种高度特异性的AhR抑制剂[1]
- 文献[1]表明，CH-223191对TCDD诱导的小鼠肝损伤和全身毒性具有显著的保护作用，提示其在减轻AhR激活环境污染物（例如二恶英、多环芳烃）引起的不良健康影响方面具有潜在的应用价值[1] |
| 分子式 |
C19H19N5O
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|---|---|
| 分子量 |
333.39
|
| 精确质量 |
333.158
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| 元素分析 |
C, 68.45; H, 5.74; N, 21.01; O, 4.80
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| CAS号 |
301326-22-7
|
| PubChem CID |
3091786
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
469.4±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
237.7±28.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.633
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| LogP |
3.48
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| tPSA |
75.13
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
482
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(C1=CC=NN1C)NC2=CC=C(/N=N/C3=CC=CC=C3C)C=C2C
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| InChi Key |
LKTNEXPODAWWFM-GHVJWSGMSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H19N5O/c1-13-6-4-5-7-17(13)23-22-15-8-9-16(14(2)12-15)21-19(25)18-10-11-20-24(18)3/h4-12H,1-3H3,(H,21,25)/b23-22+
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| 化学名 |
(E)-1-methyl-N-(2-methyl-4-(o-tolyldiazenyl)phenyl)-1H-pyrazole-5-carboxamide
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| 别名 |
CH223191; CH-223191; CH 223191.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 66 mg/mL (198.0 mM)
Water:<1 mg/mL Ethanol: 4 mg/mL (12.0 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.33 mg/mL (0.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 3.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 20 mg/mL (59.99 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9995 mL | 14.9975 mL | 29.9949 mL | |
| 5 mM | 0.5999 mL | 2.9995 mL | 5.9990 mL | |
| 10 mM | 0.2999 mL | 1.4997 mL | 2.9995 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
BAY-218
PDM-11
UM729
芳香烃受体抑制剂StemRegenin 1
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