Cibinetide   中文名称: 西比奈肽

Erythropoietin/CD131 heteroreceptor

Cibinetide (ARA290) 促进内皮集落形成细胞 (ECFC) 的运动、增殖和对 H2O2 诱导的细胞凋亡的抵抗力[1]。 Cibinetide (ARA290) 是一种 EPO 类似肽，可能具有神经营养和抑郁特性，但没有血液学副作用[2]。

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ARA290通过抗凋亡作用增加体外氧化应激后的ECFC存活率[1]
ARA290在1ng/mL（70.4%（53.3；77.5），P<0.05）、100ng/mL（72.3%（52.1；79.9），P<0.01）和1000ng/mL（77.1%（53.8；86.8）时显著降低了H2O2暴露的ECFCs的LDH释放；图1A）与对照细胞的比较。与用作阳性对照的EPO 5 IU/mL治疗相比，ARA290治疗以相当的方式提高了生存率（67.6%（59.6；79.8）P<0.01）

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ARA290在体外增加ECFC增殖和迁移[1]
ARA290显著增加了培养液中ECFCs的增殖，如浓度为100 ng/mL的BrdU掺入所示（136.4%（111.6；170.0），P<0.01）和1000 ng/mL时128.4%（116.3；151.4），P<0.05；图2A）。ARA290治疗后增殖增加与用作阳性对照的EPO 5 UI/mL治疗相当（136.8%（127.2；147.5），与对照组相比P<0.01）。ARA290 1 ng/mL诱导的增殖增加（125.1%（116.3；123.9）不显著（P=0.1）。

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ARA290改善GK胰岛β细胞分泌功能[2]
为了评估ARA290是否对β细胞分泌功能产生直接影响，这可能是GK大鼠葡萄糖稳态改善的原因，我们通过在W和GK大白鼠ARA290治疗4周后分离的胰岛上进行GSIS实验，以及批量培养和胰岛融合实验，评估了ARA290对胰岛素分泌的影响。在ARA290治疗的GK大鼠的胰岛中，与基础（3.3 mmol/L）葡萄糖相比，对16.7 mmol/L葡萄糖的胰岛素反应显著增加了约两倍，反应增加的倍数分别为3.8±0.5和2.0±0.4（p<0.05）。
从未经治疗的W和GK大鼠分离的胰岛在3.3和16.7 mmol/L葡萄糖下暴露于1至10 ng/mL范围内的ARA290。在W大鼠胰岛中，ARA290在基础或高糖刺激期间均未改变胰岛素分泌（图2A）。在GK大鼠胰岛中，在基础葡萄糖条件下暴露于ARA290并没有增强胰岛素分泌，尽管在高葡萄糖浓度下，1 ng/mL ARA290显著改善了胰岛素分泌，是单独使用16.7 mmol/L葡萄糖的2.7倍（图2B）。更高浓度的ARA290进一步增加了胰岛素分泌。
胰岛融合实验表明，ARA290显著增强了第一阶段胰岛素反应（对照组0.076±0.017，而ARA290在34分钟时为0.303±0.184μU/胰岛/min，p<0.01）（图2C）。相比之下，ARA290对第二相胰岛素分泌没有显著影响。然而，添加KCl和ARA290进一步增加了胰岛素分泌（图2C），表明ARA290不仅影响葡萄糖刺激途径，还影响扩增途径。

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ARA290改善胰岛葡萄糖代谢[2]
为了解决A290对葡萄糖代谢的有益作用是否会改善第一相胰岛素分泌，我们评估了ARA290对胰岛葡萄糖氧化和ATP产生的影响。在高血糖条件下，ARA290显著增加了GK胰岛中的葡萄糖氧化（图3A）。ARA290治疗1小时也改善了GK胰岛中ATP的产生（图3B）。这些结果表明，ARA290通过增加线粒体的克雷布斯循环活性和ATP产生，对葡萄糖代谢有直接影响。

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ARA290增强胰岛素分泌途径[2]
为了研究ARA290是否对胰岛素分泌途径中的胰岛KATP通道有影响，我们使用了KATP通道开放剂二氮嗪。在3.3 mmol/L葡萄糖下，二氮嗪不会抑制基础胰岛素分泌，ARA290也不会显著调节通过添加二氮嗪和KCl刺激胰岛素分泌（图4A）。然而，在16.7 mmol/L葡萄糖的存在下，GK大鼠胰岛与10 ng/mL ARA290和0.25 mmol/L二氮嗪的共孵育中和了ARA290对GSIS的刺激作用（图4B）。这表明ARA290对GSIS的刺激作用是通过KATP通道介导的。然而，在高葡萄糖浓度下，当KATP通道被二氮嗪保持开放并被30 mmol/L KCl去极化时，ARA290增强了GK胰岛的GSIS（图4B）。这些结果表明，ARA290在KATP通道远端的胰岛素分泌途径中具有额外作用。事实上，当GK胰岛与10 ng/mL ARA290和10μmol/L蛋白激酶A（PKA）抑制剂H89共孵育时，ARA290对GSIS的影响被消除（图4C）。总之，这些结果表明，ARA290通过KATP通道和PKA的胰岛素扩增途径对GSIS产生影响。最后，我们研究了ARA290的作用是否依赖于Ca2+信号传导。添加L型钙通道阻断剂尼莫地平（5μmol/L）可阻断ARA290对GSIS的影响（图4D）。这表明ARA290改善胰岛素分泌涉及Ca2+通过L型Ca2+通道进入。

CLI 小鼠 ECFC 移植 28 天后，单次注射 Cibinetide (ARA290) 可改善后肢血流量和毛细血管密度。它还可以改善移植后 4 小时放射性标记的移植细胞向缺血腿部的归巢[1]。大鼠体重不受西哌肽（ARA290；30 μg/kg，皮下注射）的影响，西哌肽可抑制葡萄糖调节的日益恶化。在 GK 大鼠中，西哌肽显着降低 IPGTT 中的葡萄糖 AUC[2]。用低剂量 Cibinetide（35 μg/kg，腹膜内注射）治疗的大鼠 EAE 的严重程度仅略有减轻。接受库奈肽治疗（70 μg/kg，腹腔注射）的组以剂量依赖性方式显着推迟了 EAE 的发作，降低了神经系统严重程度，并缩短了 EAE 的持续时间[3]。

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体内联合应用ARA290和ECFC可增强血管生成反应[1]
与对照组（第28:53.0±4.1%）相比，ARA29010μg/kg（第28:61.6±4.2%，P<0.05）、ECFC（第28:65.4±2.3%，P<0.05）和ECFC+ARA29010µg/kg组（第28/79.2±4.6%，P<0.001）的缺血后肢血流恢复明显增加（图3A）。损伤后第7天进行的双向方差分析和Bonferroni检验表明，与单独使用ARA29010μg/kg组（ARA29010µg/kg:54.0±2.29%，P<0.001）或ECFCs组（ECFC:46.9±3.1%，P<0.001）和对照组（50.6±1.36%，P<0.001）相比，联合治疗显示后肢血液灌注的早期改善（ECFC+ARA29010微克/千克：74.5±3.6%）。
损伤后第28天，ECFC+ARA29010μg/kg组腓肠肌缺血/非缺血毛细血管密度比（1.255（1.16；1.39））高于对照组（0.66（0.57；0.88）；P<0.001）、ARA29010μg/kg组（0.87（0.73；0.97）；P<0.01）或ECFC组（1.02（0.8；1.15）；P<0.01）（图3B）。此外，单独使用ECFC的比例高于对照组（P<0.01）；单独使用ARA29010μg/kg往往会增加这一比率（P=0.13）。
在损伤后第7天，与对照组（1（1；6）相比，ECFC（0（0；1），P<0.05）、ARA29010μg/kg（0（1），P<0.05）和ECFC+ARA29010微克/kg（0（01），P<0.05）组的临床坏死评分显著降低（图3C）。尽管方差分析不显著，但ECFC（0（2））、ARA29010μg/kg（0（3））和ECFC+ARA29010微克/kg（0（0；2））组在第7天的活动能力损害往往低于对照组（2（0；4））。

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ARA290诱导内皮细胞CD31上调，参与内皮细胞在体内对缺血部位的归巢增强[1]
与单独使用ECFC（96.2%（50.5；102.0））相比，ARA290与ECFC联合给药可增加移植细胞向缺血肢体的归巢，如缺血/非缺血计数比（163.2%（139.3；185.0），P<0.001）所示。
Western blot实验显示，在ECFCs的全细胞裂解物中鉴定出120 kDa至130 kDa的CD31蛋白。用1ng/mL的ARA290孵育4小时后，CD31的表达水平（以对照ECFCs的百分比表示）显著增加：146.0%（121.6；205.2），P<0.05；100 ng/mL:147.4%（116.6；211.9），P<0.05；1000 ng/mL呈上升趋势：129.0%（110.2；174.3）。P=0.07）。EPO治疗产生了不显著的增加（135.9%（100.2；174.0），NS）（图4A）。
当在移植前将ECFC与抗CD31阻断抗体一起孵育时，我们观察到与未孵育的细胞相比，ECFC+ARA29010μg/kg中的缺血/非缺血99mTc-ECFC比率显著降低（93.68%（28.0；115.0），P<0.001），并且ECFC组中缺血/非缺血性99mTc-ECF比率呈下降趋势（34.0%（16.3；76.6），P=0.06）（图4B）。

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研究了ARA290对2型糖尿病Goto Kakizaki（GK）大鼠葡萄糖稳态的影响。在GK大鼠中，每天接受ARA290治疗长达4周，3周和4周后血糖浓度降低，血红蛋白A1c（HbA1c）降低了约20%，全身和肝脏胰岛素敏感性没有变化。ARA290治疗的大鼠胰岛中葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加。此外，与安慰剂相比，在葡萄糖、卡巴胆碱和KCl的作用下，胰岛细胞质游离Ca2+浓度[Ca2+]i较高，[Ca2+]i振荡频率增强。ARA290还改善了GK大鼠胰岛中葡萄糖的刺激-分泌偶联，如改善的葡萄糖氧化速率、ATP产生和急性增强的葡萄糖刺激胰岛素分泌所示。ARA290还对胰岛素外切细胞途径的ATP敏感性钾（KATP）通道远端产生影响，因为当KATP通道被二氮嗪保持开放时，KCl使胰岛去极化后胰岛素反应得到改善。最后，抑制蛋白激酶A完全消除了ARA290对胰岛素分泌的影响。总之，ARA290改善了糖尿病GK大鼠的葡萄糖耐量，而不影响红细胞压积。这种效应似乎是由于γ细胞葡萄糖代谢和[Ca2+]i处理的改善，从而增强了葡萄糖诱导的胰岛素释放。[2]

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ARA290是促红细胞生成素（EPO）的非造血类似物，含有11个氨基酸，在不刺激造血的情况下提供EPO的抗炎和神经保护作用。在这里，我们研究了ARA290对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）Lewis大鼠的治疗作用。治疗性（从第7天到第18天或从第9天到第19天）给EAE大鼠每天一次ARA290（35，70μg/kg，腹膜内）显著降低了严重程度，缩短了临床评分的持续时间，减少了EAE脊髓中炎性细胞的积聚，并抑制了EAE大鼠脊髓中白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-17、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、基质金属蛋白酶9（MMP9）和转录因子T-bet的mRNA水平。此外，ARA290治疗减少了EAE淋巴结和循环中的辅助T细胞数量。体外研究表明，ARA290也能剂量依赖性地抑制抗原特异性和抗原非特异性淋巴细胞增殖。此外，ARA290改变了细胞因子环境，有利于Th2和调节性T（Treg）细胞的极化，但抑制了EAE淋巴结中Th1和Th17细胞的极化。总之，我们在这里的研究表明，ARA290可以改变T细胞功能以抑制炎症，从而改善EAE，这表明ARA290可能是治疗多发性硬化症的新候选药物[3]。

批量孵化实验[2]
过夜培养后，将胰岛在37°C的克雷布斯-林格碳酸氢盐缓冲溶液（KRB）中预孵育30分钟，补充2 mg/mL牛白蛋白、10 mmol/L HEPES和3.3 mmol/L葡萄糖，pH 7.4。预孵育后，将三批胰岛在37°C的摇水浴中在300μL KRB中与3.3或16.7 mmol/L葡萄糖一起孵育60分钟。在这两种情况下，用或不加1、5或10ng/mL ARA290处理胰岛。当分析ARA290对胰岛素分泌途径的影响时，将含有3.3 mmol/L或16.7 mmol/L葡萄糖的KRB补充0.25 mmol/L二氮氧化物±30 mmol/L KCl，以分析ARA290在ATP敏感性钾（KATP）通道上的近端或远端作用，或使用10μmol/L PKA抑制剂H89或5μmol/L尼莫地平阻断L型Ca2+通道。孵育后，取等分培养基进行胰岛素放射免疫测定（11）。

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小岛边缘化[2]
在RPMI中培养过夜后，将GK大鼠胰岛在补充了3.3 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液中预孵育30分钟。在包埋室中，将50个胰岛分批放置在两层生物凝胶（bio-Rad）之间，在37°C下以200μL/min的流速与KRB和3.3 mmol/L葡萄糖包埋20分钟，然后开始收集样品。为了确定胰岛素分泌的动态反应，首先用3.3 mmol/L葡萄糖包埋胰岛20分钟，然后用3.3 mmol/L的葡萄糖加10 ng/mL的ARA290包埋胰岛10分钟，然后在10 ng/mL ARA290存在或不存在的情况下用16.7 mmol/L的葡萄糖包埋30分钟，然后再在10 ng/mL ARA290存在和不存在的条件下用30 mmol/L的KCl包埋胰岛15分钟，然后仅用3.3 mol/L的葡萄糖包封胰岛30分钟。每2分钟收集一次样本，并将其储存在-20°C下，直至通过放射免疫法分析胰岛素。

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葡萄糖氧化[2]
在RPMI中培养过夜后，将GK大鼠胰岛在补充了3.3 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液中预孵育30分钟。将10个胰岛放入玻璃培养瓶中，在100μL KRB（pH 7.4）中加入3.3 mmol/L或16.7 mmol/L葡萄糖，有或没有10 ng/mL ARA290，也含有1μCi D-[U-14C]葡萄糖。然后将培养瓶放入含有1.5 mL水的20 mL闪烁瓶中，在95%O2、5%CO2下用配备橡胶膜的盖子密封，并在37°C的水浴中培养2小时。通过橡胶膜注射100μL 0.05 mmol/L抗霉素的70%乙醇溶液，然后在闪烁瓶中注射250μL透明质酸，在培养瓶中注射100μL 0.4 mmol/L磷酸钠缓冲液（pH 6.0），终止培养。14CO2被允许吸收到玻璃胺中过夜。丢弃培养瓶，在闪烁瓶中加入5mL闪烁液。用液体闪烁分析仪测量14CO2中的放射性，结果表示为每2小时pmoles葡萄糖氧化/胰岛。

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ATP测定[2]
如上所述预孵育后，在37°C的振荡水浴中，将20个胰岛分批在300μL KRB中与3.3 mmol/L或16.7 mmol/L葡萄糖一起孵育1小时，并加入或不加入10 ng/mL ARA290。根据制造商的说明，使用ATP生物发光测定试剂盒HS II测量ATP水平。使用GloMax 96微孔板光度计在1秒延迟后和1秒积分时间内测量生物发光。通过Bradford蛋白质测定法（Bio-Rad）测定裂解悬浮液中的蛋白质浓度，结果表示为pmol-ATP/mg蛋白质。

体外实验[1]
对于所有实验，ARA290在不同剂量下进行了测试：1 ng/mL、100 ng/mL和1000 ng/mL。EPO 5 UI/mL已被用作阳性对照。

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存活试验[1]
通过LDH释放试验测量氧化应激后的ECFC存活率。根据制造商的建议，使用细胞毒性检测试剂盒测量因细胞裂解而释放的LDH。简而言之，将ECFC镀在96孔板上，并将处理液加入孔的对照培养基中，在24小时内进行预处理。随后清洗预处理的ECFC，并用1100μM的H2O2将其暴露于0.5%的FBS/EBM-2中18小时。然后，将上清液与试剂盒试剂一起孵育，并在20°C下孵育30分钟。使用ELISA平板读数器测量492 nm处的吸光度。通过减去平均培养基吸光度值对平均吸光度值进行归一化。结果以H2O2处理的对照细胞的百分比表示，每组n=3至4。[1]
使用7AAD Annexin V-FITC试剂盒（Beckman Coulter，Villepinte，France）测定ARA290对H2O2诱导的ECFCs凋亡的影响。在FC500流式细胞仪中读取样本。膜联蛋白V和7-AAD染色均较低的细胞被认为是促存活细胞。无论7-AAD状态如何，具有高Annexin V染色的细胞都被认为是凋亡细胞。结果以H2O2处理的对照细胞的百分比表示，每组n=4。

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BrdU公司[1]
根据制造商的说明，通过使用细胞增殖ELISA BrdU测定法定量掺入复制ECFC的新合成DNA中的溴脱氧尿苷（BrdU）来测量ECFC增殖。简而言之，将1×10~4个细胞/孔的ECFC接种在EGM-2的96孔塑料板中并培养48小时。然后，在检测前24小时，在ARA290（1-1000 ng/mL）存在或不存在的情况下，将BrdU标记试剂加入培养基中。然后使细胞变性，将细胞裂解物与结合过氧化物酶的1:100稀释的小鼠抗BrdU单克隆抗体一起孵育90分钟，洗涤并加入底物溶液20分钟。最后，使用ELISA平板读数器在405nm处测量吸光度，参考波长为530nm。结果以对照细胞的百分比表示，每组n=4。

本研究中使用的糖尿病Goto-Kakizaki (GK)大鼠源自Wistar大鼠，由本部门培育。正常Wistar (W)大鼠用作非糖尿病对照组。所有动物在开始治疗时均约6周龄，体重为100至150克。除下文所述的夜间禁食外，动物饲养于22℃、12小时光照/12小时黑暗反转循环的条件下，并可自由摄食。大鼠接受为期4周的Cibinetide (ARA290)治疗，每日一次皮下注射，剂量为30 μg/kg体重，或注射PBS。每周在早晨皮下注射ARA290或安慰剂前，通过尾部小切口采集血样进行血糖测定。在实验期间，每周测量体重。

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小鼠后肢缺血模型 [1]
手术操作时，动物用 1.5 vol% 异氟烷（30% 氧气和 70% 氮气的混合气体）麻醉，并置于恒温毯上。沿切口注射局部镇痛布比卡因（5 mg/kg）。如前所述，切除股动脉后进行单侧后肢缺血。24 小时后，将小鼠随机分配到各治疗组；分别静脉注射PBS（对照组）（n = 6）、每只小鼠105个ECFC（ECFC组）（n = 7）、10 μg/kg西比奈肽（ARA290）（ARA290,10 μg/kg组）（n = 7）或每只小鼠105个ECFC + 10 μg/kg西比奈肽（ECFC + ARA290,10 μg/kg组）（n = 7）。西比奈肽（ARA290）的给药剂量确定为单次注射10 μg/kg，因为之前的研究表明该剂量具有保护作用，并且单次注射EPO足以增强短暂性局灶性脑缺血模型中ECFC移植诱导的血管生成。术后第1天至第28天采用激光多普勒血流成像评估血管重建情况。灌注结果以缺血肢体与非缺血肢体血流量的比值表示。后肢缺血性损伤在第7天进行量化，方法如前所述。简而言之，每只小鼠的运动障碍评分计算如下：0分，活动自如；2分，足部活动受限但趾无法张开；3分，足部活动受限，无跖屈；4分，足部拖曳。每只小鼠的坏死评分计算如下：0分，无坏死；1分，足部水肿；2分，一个趾坏死；3分，两个或两个以上趾坏死；4分，足部坏死；5分，腿部坏死；6分，整条腿自截。评分由经过培训的实验人员以随机和盲法的方式进行。

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非造血促红细胞生成素类似物Cibinetide (ARA290)由11个氨基酸组成（分子量1258道尔顿），由Araim Pharmaceuticals公司提供。它以2 mg/mL的浓度溶解于磷酸盐缓冲液（PBS）中，并在4°C下保存长达4周。
糖尿病Goto-Kakizaki (GK)大鼠由Wistar大鼠衍生而来，由本部门饲养。正常Wistar (W)大鼠购自商业养殖场，用作非糖尿病对照组。所有动物在开始治疗时均约6周龄，体重100至150克。除下文所述的夜间禁食外，它们在22°C下饲养，采用12小时光照/12小时黑暗的昼夜节律，并可自由摄食。所有体内实验均采用盲法进行。大鼠接受为期 4 周的 Cibinetide (ARA290) 治疗，每日一次皮下注射，剂量为 30 μg/kg 体重，或注射 PBS。每周在早晨皮下注射 Cibinetide (ARA290) 或安慰剂之前，通过尾部小切口采集血样进行葡萄糖测定。实验期间，每周测量体重。[2]

[1]. ARA290, a Specific Agonist of Erythropoietin/CD131 Heteroreceptor, Improves Circulating Endothelial Progenitors' Angiogenic Potential and Homing Ability. Shock. 2016 Oct;46(4):390-7.

[2]. ARA290 Improves Insulin Release and Glucose Tolerance in Type 2 Diabetic Goto-Kakizaki Rats. Mol Med. 2015; 21(1): 969–978.

[3]. Therapeutic effects of nonerythropoietic erythropoietin analog ARA290 in experimental autoimmune encephalomyelitis rat. J Neuroimmunol. 2014 Mar 15;268(1-2):64-70.

Cibinetide 已用于抑郁症基础科学研究的临床试验。

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药物适应症
治疗结节病

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背景：促红细胞生成素 (EPO) 可通过 EPOR/CD131 异源受体介导的替代信号通路发挥 EPO 在多种损伤（尤其是缺血性疾病）中的组织保护作用。循环内皮祖细胞有助于慢性缺血性损伤后的内皮修复和出生后血管生成。本研究旨在探讨 EPOR/CD131 复合物特异性激动剂 ARA290 对内皮祖细胞亚群（称为内皮集落形成细胞 (ECFC)）的影响，并阐明其在外周缺血后 ECFC 诱导的血管生成中的作用。方法：采用体外细胞培养方法研究 ARA290 对 ECFC 特性的影响。我们向接受慢性后肢缺血（CLI）的小鼠注射了ARA290，并联合进行了内皮祖细胞（ECFC）移植。采用SPECT/CT成像评估了移植的ECFC在体内向缺血组织的归巢情况。结果：体外实验表明，ARA290增强了ECFC的增殖、迁移和对H₂O₂诱导的细胞凋亡的抵抗力。在CLI小鼠中，单次注射ARA290后，28天后缺血/非缺血侧后肢血流量比值和毛细血管密度均有所提高，并且移植后4小时放射性标记的移植细胞向缺血侧肢体的归巢也得到改善。预先中和移植细胞表达的血小板-内皮细胞黏附分子-1（CD31）可抑制ARA290诱导的归巢改善作用。讨论：ARA290可特异性地增强ECFC的生物活性。 ARA290 与 ECFC 联合给药对体内缺血后血管生成具有协同作用。这种增强作用似乎至少部分依赖于 CD31 依赖性的移植细胞向缺血组织的归巢增加。[1]

C51H84N16O21

1257.32

1256.599

C, 48.72; H, 6.73; N, 17.82; O, 26.72

1208243-50-8

1208243-50-8;Cibinetide acetate;

91810664

{Glp}-Glu-Gln-Leu-Glu-Arg-Ala-Leu-Asn-Ser-Ser; H-Pyr-Glu-Gln-Leu-Glu-Arg-Ala-Leu-Asn-Ser-Ser-OH; L-pyroglutamyl-L-alpha-glutamyl-L-glutaminyl-L-leucyl-L-alpha-glutamyl-L-arginyl-L-alanyl-L-leucyl-L-asparagyl-L-seryl-L-serine

{Glp}-EQLERALNSS; XEQLERALNSS

Typically exists as solid at room temperature

1.6±0.1 g/cm3

1.661

-6.59

623

20

22

42

88

2560

11

O=C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])=O)N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C(=O)O[H])N([H])C([C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N1[H])=O)=O)=O)=O)N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C(=O)O[H])C([H])([H])O[H])=O)C([H])([H])O[H])=O)C([H])([H])C(N([H])[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/N=C(\N([H])[H])/N([H])[H])=O)C([H])([H])C([H])([H])C(=O)O[H]

WZTIQQBMSJTRBR-WYKNNRPVSA-N

InChI=1S/C51H84N16O21/c1-22(2)17-30(47(84)65-32(19-36(53)71)48(85)66-33(20-68)49(86)67-34(21-69)50(87)88)63-40(77)24(5)57-41(78)25(7-6-16-56-51(54)55)59-43(80)29(11-15-39(75)76)62-46(83)31(18-23(3)4)64-45(82)27(8-12-35(52)70)60-44(81)28(10-14-38(73)74)61-42(79)26-9-13-37(72)58-26/h22-34,68-69H,6-21H2,1-5H3,(H2,52,70)(H2,53,71)(H,57,78)(H,58,72)(H,59,80)(H,60,81)(H,61,79)(H,62,83)(H,63,77)(H,64,82)(H,65,84)(H,66,85)(H,67,86)(H,73,74)(H,75,76)(H,87,88)(H4,54,55,56)/t24-,25-,26-,27-,28-,29-,30-,31-,32-,33-,34-/m0/s1

(4S)-5-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(1S)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-oxo-4-[[(2S)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoic acid

ARA-290; ARA 290; Cibinetide; 1208243-50-8; ARA290; PHBSP; ARA-290; PH-BSP; ARA 290; Cibinetide [USAN]

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~66.67 mg/mL (~53.03 mM)
0.1 M NaOH :≥ 50 mg/mL (~39.77 mM)

配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (1.99 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。