| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary molecular target of CID-4694321 is glucocerebrosidase (GCase), also known as acid β-glucosidase or GBA. GCase is a lysosomal enzyme that catalyzes the hydrolysis of glucocerebroside (glucosylceramide) to glucose and ceramide. This reaction is essential for the degradation of glycosphingolipids and the maintenance of cellular lipid homeostasis. Mutations in the GBA1 gene lead to reduced GCase activity, resulting in the accumulation of glucocerebroside in lysosomes, particularly in macrophages, which causes the clinical manifestations of Gaucher disease (hepatosplenomegaly, bone abnormalities, and, in some forms, neurological involvement). By activating GCase, CID-4694321 enhances the enzyme's catalytic activity, potentially increasing the degradation of accumulated glucocerebroside and alleviating the symptoms of Gaucher disease. The compound's mechanism of action may involve binding to an allosteric site on the enzyme, stabilizing the active conformation, or facilitating the enzyme's trafficking to the lysosome.
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| 体外研究 (In Vitro) |
CID-4694321 的体外活性特征在于其对葡糖脑苷脂酶 (GCase) 的激活作用。在使用重组 GCase 或细胞裂解液 GCase 的酶活性测定中，该化合物以剂量依赖的方式增强酶活性。通过测量在不同浓度激活剂存在下荧光 GCase 底物（例如 4-甲基伞形酮-β-D-吡喃葡萄糖苷或试卤灵-β-D-吡喃葡萄糖苷）的水解情况来评估该化合物的活性。化合物的效价 (EC50) 和功效 (最大激活值) 由剂量反应曲线确定。在使用戈谢病患者成纤维细胞或其他 GCase 缺陷细胞的细胞实验中，CID-4694321 可增强 GCase 活性，减少葡糖脑苷脂的积累，并改善溶酶体功能。本研究还评估了该化合物对细胞脂质水平、溶酶体pH值和自噬的影响。该化合物对GCase相对于其他溶酶体酶的选择性是其特异性和潜在治疗用途的重要参数。
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| 体内研究 (In Vivo) |
CID-4694321 的体内活性已在戈谢病动物模型中得到证实。在 GCase 缺陷小鼠模型（例如，Gba 基因敲除或 Gba 突变小鼠）中，给予 CID-4694321 可提高组织中 GCase 的活性，降低葡糖脑苷脂水平，并改善与戈谢病相关的组织学和生化异常。该化合物的体内疗效取决于其药代动力学特性，包括口服生物利用度、组织分布（特别是对于神经病变型戈谢病而言的脑渗透性）和代谢稳定性。该化合物穿过血脑屏障的能力对于治疗戈谢病的神经系统症状至关重要。现有文献中未提供具体的体内数据，但该化合物具有用于治疗戈谢病的潜力。
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| 酶活实验 |
使用 CID-4694321 进行体外 GCase 激活实验时，采用以下方案：重组人 GCase 在哺乳动物细胞中表达或从市售产品中获得。使用荧光底物（例如 4-甲基伞形酮-β-D-吡喃葡萄糖苷 (4-MUG)）测定酶活性。实验在含有 0.25% 牛磺胆酸钠和 0.1% Triton X-100 的 0.1 M 柠檬酸-磷酸盐缓冲液（pH 5.5）中进行，温度为 37°C。将待测化合物溶解于 DMSO 中，并用实验缓冲液进行系列稀释，最终浓度范围为 0.001 至 1000 μM。将酶（0.1-1 U/mL）与化合物预孵育 10-30 分钟。加入底物（0.1-1 mM）以启动反应，并使用微孔板读数仪连续监测荧光（激发波长 365 nm，发射波长 445 nm）10-60 分钟。初始反应速率由反应进程曲线的线性部分计算得出。EC50 值（半数最大激活浓度）通过非线性回归分析剂量-反应曲线确定。为了确定激活机制，在不同的底物浓度下测试化合物，并使用米氏动力学分析数据以确定其对 Km 和 Vmax 的影响。
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| 细胞实验 |
对于使用 CID-4694321 进行的体外细胞实验，通常采用以下方案：将戈谢病患者的成纤维细胞或 GCase 敲低细胞在含 10% FBS 和抗生素的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO₂ 条件下培养。将细胞以每孔 5,000-10,000 个细胞的密度接种于 96 孔板中，并使其过夜贴壁。将 CID-4694321 溶解于 DMSO 中，并用培养基进行系列稀释，最终浓度范围为 0.01 至 100 μM（最终 DMSO 浓度 ≤ 0.1%）。处理细胞 24-72 小时。如上所述，使用 4-MUG 法测定细胞裂解液中的 GCase 活性，并以蛋白质浓度进行标准化。使用 LC-MS/MS 或葡糖脑苷脂检测试剂盒测定葡糖脑苷脂水平。溶酶体功能采用 LysoTracker 染色和共聚焦显微镜进行评估。自噬标志物（LC3-II、p62）通过蛋白质印迹法进行检测。细胞活力采用 MTT 或 CellTiter-Glo 法进行评估，以确定细胞毒性的 IC50 值。为评估化合物对 GCase 转运的影响，用化合物处理细胞，并使用抗 GCase 抗体进行免疫荧光染色，以评估 GCase 的定位。
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| 动物实验 |
对于使用GCase激活剂进行的体内动物研究，通常采用以下方案：使用GCase缺陷小鼠模型（例如，Gba D409V/D409V或Gba L444P/L444P小鼠，或用环氧化物康杜醇B处理以抑制GCase的小鼠）。将CID-4694321配制成合适的溶剂（例如，0.5%甲基纤维素或生理盐水），并以1、3、10和30 mg/kg的剂量每日口服或腹腔注射给药，持续2-4周。对照组动物仅接受溶剂。研究结束时，处死动物，并收集组织（肝脏、脾脏、肺脏、脑组织）。使用4-MUG法测定组织匀浆中的GCase活性。采用LC-MS/MS法测定葡糖脑苷脂水平。组织样本经处理后进行组织病理学检查（包括苏木精-伊红染色、过碘酸-雪夫氏染色和电子显微镜检查，以评估溶酶体贮积情况）。在药代动力学研究中，于给药后不同时间点采集血液和组织样本，并采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析化合物浓度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CID-4694321 的药代动力学性质尚未完全阐明。根据其理化性质（分子量 496.35 g/mol，LogP 预测值约为 3-4），该化合物预计具有中等至高的亲脂性，有利于口服吸收和组织分布。该化合物含有溴苯基和酰胺基团，可能易受细胞色素 P450 酶的代谢。酰胺键可能发生水解。预计其血浆蛋白结合率较高（>90%）。根据类似化合物的研究，该化合物在啮齿动物体内的消除半衰期估计为 2-6 小时。对于神经病变型戈谢病，该化合物能否穿过血脑屏障至关重要。该化合物的脑渗透性取决于其亲脂性以及是否是 P-糖蛋白等外排转运蛋白的底物。需要进行包括静脉注射和口服给药在内的啮齿动物综合药代动力学研究，以确定实际的吸收、分布、代谢和消除参数，包括脑渗透性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CID-4694321 的毒性特征尚未经过系统评估。作为一种靶向 GCase 的研究化合物，其毒理学特性尚未得到充分证实。该化合物应作为研究用化学品，并采取适当的安全预防措施进行处理。溴苯基团是潜在肝毒性和遗传毒性的结构警示。该化合物对正常组织中 GCase 的作用可能导致脱靶毒性，尽管 GCase 激活通常被认为具有良好的安全性。任何治疗性药物的开发都需要进行全面的毒理学研究，包括啮齿动物急性经口毒性试验、28 天重复给药毒性试验（需对主要器官进行组织病理学检查）、Ames 诱变性试验、染色体畸变试验以及对正常组织中鞘脂代谢影响的评估。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CID-4694321（CAS号：1462267-08-8）是一种强效的GCase激活剂（ML-266），可用于治疗戈谢病。其分子式为C24H22BrN3O4，分子量为496.35 g/mol。未来的研究方向可集中于优化该化合物的GCase激活效力和选择性，评估其在戈谢病模型中的体内疗效，研究其对神经病变型戈谢病的脑渗透性，并将其开发为治疗戈谢病及其他GCase相关疾病的潜在疗法。
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| 分子式 |
C24H22BRN3O4
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|---|---|
| 分子量 |
496.361
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| 精确质量 |
495.079
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| 元素分析 |
C, 58.08; H, 4.47; Br, 16.10; N, 8.47; O, 12.89
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| CAS号 |
1462267-08-8
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| PubChem CID |
46943215
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
724.2±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
391.8±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
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| LogP |
3.47
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| tPSA |
87.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
633
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1C=CC(=CC=1)NC(COC1=CC=CC=C1C(NCC(N(C)C1C=CC=CC=1)=O)=O)=O
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| InChi Key |
VAPWBKACLHRZBZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H22BrN3O4/c1-28(19-7-3-2-4-8-19)23(30)15-26-24(31)20-9-5-6-10-21(20)32-16-22(29)27-18-13-11-17(25)12-14-18/h2-14H,15-16H2,1H3,(H,26,31)(H,27,29)
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| 化学名 |
2-(2-((4-Bromophenyl)amino)-2-oxoethoxy)-N-(2-(methyl(phenyl)amino)-2-oxoethyl)benzamide
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| 别名 |
ML 266 CID-46943215ML266 CID 46943215 ML-266 CID46943215
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~251.84 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0147 mL | 10.0733 mL | 20.1467 mL | |
| 5 mM | 0.4029 mL | 2.0147 mL | 4.0293 mL | |
| 10 mM | 0.2015 mL | 1.0073 mL | 2.0147 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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