| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
CINPA1 targets the constitutive androstane receptor (CAR; NR1I3) as an inverse agonist/inhibitor. In HepG2 cells transiently transfected with hCAR1 and CYP2B6-luc reporter, CINPA1 inhibits CAR-mediated transactivation with an IC50 of approximately 70 nM. [1]
CINPA1 does not activate pregnane X receptor (PXR) at concentrations up to 40 μM. It is a weak antagonist of PXR with an estimated IC50 of 6.6 μM in HepG2-PXR stable cells. [1]
CINPA1 does not modulate the activity of other nuclear receptors tested, including FXR, GR, LXRα, LXRβ, PPARγ, RXRα, RXRβ, or VDR, at 18 μM. [1]
Constitutive Androstane Receptor (CAR): CINPA1 is an inhibitor of CAR, reducing CAR-mediated transcription with an IC₅₀ of approximately 70 nM in HepG2-hCAR CYP2B6-luc reporter cells . It exhibits >90-fold selectivity for CAR over PXR . Pregnane X Receptor (PXR): CINPA1 does not activate PXR and shows only weak PXR antagonist potency (68% inhibition by 18 μM CINPA1 against 5 μM rifampicin) . Other Nuclear Receptors: CINPA1 has no agonist or antagonist activity toward FXR, GR, LXRα/β, PPARγ, RXRα/β, or VDR . |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CINPA1 在转染 hCAR1 和 CYP2B6-luc 报告基因的 HepG2 细胞中以剂量依赖性方式抑制 CAR 介导的反式激活，IC50 约为 70 nM。在 5 μM 时，CINPA1 完全抑制 CAR 活性。 [1]
CINPA1 在高达 40 μM 时不激活 PXR 介导的基因表达。在 HepG2-PXR 稳定细胞中，CINPA1 显示弱的 PXR 拮抗作用，IC50 为 6.6 μM。 [1] 在过表达 hCAR1 的 HepG2-hCAR1 稳定细胞中，CINPA1 (10 μM) 显著减弱内源性 CYP2B6 和 CYP3A4 mRNA 水平（约减少 50-75%）。 [1] 在内源性表达 CAR 和 PXR 的 LS174T 细胞中，CINPA1 (10 μM) 将 CYP2B6 水平降低约 50-60%，且不显著影响 CYP3A4，而 PK11195 增加 CYP3A4 水平。 [1] 在来自多个供体的原代人肝细胞中，CINPA1 (0.3-5 μM) 有效抑制 CITCO 诱导的 CYP2B6 表达（减少 50-80%）。CINPA1 不改变 CAR 蛋白水平或其核定位。 [1] 在 TR-FRET 共激活因子招募实验中，CINPA1 抑制 PGC-1α 与 GST-hCAR-LBD 的结合，IC50 约为 2-5 μM。 [1] 在哺乳动物双杂交实验中，CINPA1 (5 μM) 减少 SRC-1 和 TIF-2 共激活因子与 CAR-LBD 的结合，并增加 SMRTα 和 mNCoR 共抑制因子的结合。 [1] 在使用原代人肝细胞的染色质免疫沉淀实验中，CINPA1 (5 μM) 减少 CITCO 诱导的 CAR 向 CYP2B6 XREM 区域的招募，并减少 RNA 聚合酶 II 的招募。 [1] 在 HepG2 细胞中，CINPA1（1 μM；24 小时）转录 PXR 的 CAR 介导的反式激活 [1]。电位测定异生素试剂盒试剂是 CINPA1 [1]。在原代人肝细胞中，CAR 是内源性产生的，CINPA1 转录 CAR 介导的基因表达 [1]。 CAR 的亚细胞定位和蛋白水平不受 CINPA1 影响 [1]。在辅助双杂交试验中，CINPA1 增强共阻断，而在染色质免疫沉淀研究中，CINPA1 干扰 CAR 与靶基因启动子区域的结合 [1]。 CINPA1 有效抑制共激活肽和 CAR-LBD 之间的相互作用。该功能表明 CINPA1 是 CAR 配体 [1]。 抑制CAR介导的转录：CINPA1在HepG2-hCAR CYP2B6-luc报告细胞中抑制CAR介导的转录，IC₅₀约为70 nM 。在HepG2细胞中，1 μM CINPA1处理24小时可抑制CAR介导的反式激活，且不激活PXR 。 无细胞毒性：CINPA1在浓度高达30 μM时对细胞无细胞毒性效应 。 抑制内源性CAR基因表达：在原代人肝细胞中，CINPA1可抑制内源性表达的CAR所介导的基因表达 。 对CAR蛋白水平和定位无影响：CINPA1不改变CAR的蛋白水平或亚细胞定位 。 改变辅调节因子相互作用：在哺乳动物双杂交实验中，CINPA1增加辅抑制因子与CAR配体结合域的相互作用，同时减少共激活因子的结合 。 破坏CAR与DNA的结合：在染色质免疫沉淀实验中，1 μM CINPA1可将CITCO诱导的CAR向CYP2B6或CYP3A4启动子区域的招募抑制超过85% 。CINPA1可干扰CAR与靶基因启动子区域的结合 。 CFTR氯离子转运调节：在T84人结肠上皮细胞中，CINPA1作为CAR拮抗剂可逆转CAR激动剂（CITCO和苯妥英）对cAMP依赖性Cl⁻分泌的抑制作用 。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
抑制CAR激动剂诱导的氯离子分泌：在体内小鼠模型中，CAR激动剂TCPOBOP（3 mg/kg，7天）可降低肠道组织中CFTR mRNA和蛋白表达，并抑制霍乱毒素诱导的肠道液体蓄积；这表明CINPA1作为CAR拮抗剂可能具有治疗分泌性腹泻的潜力 。
|
| 酶活实验 |
LanthaScreen TR-FRET 共激活因子招募实验：将 GST 标记的人 CAR 配体结合域与 Tb-抗 GST 抗体和荧光素标记的 PGC-1α 共激活因子肽在辅调节因子缓冲液 G 中混合。加入测试化合物，DMSO 作为阴性对照，克霉唑作为阳性对照。室温孵育 1 小时后，在 340 nm 激发下测量 490 nm 和 520 nm 的 TR-FRET 发射光。计算 520:490 比值，并从剂量-反应曲线推导 IC50 值。CINPA1 抑制 PGC-1α 与 CAR-LBD 的结合，IC50 约为 2-5 μM。 [1]
辅调节因子招募实验：采用哺乳动物双杂交实验评估CINPA1对CAR与辅调节因子相互作用的影响。将CAR配体结合域与GAL4 DNA结合域融合构建诱饵质粒，与VP16融合的辅抑制因子或共激活因子报告质粒共转染至细胞中。CINPA1处理后，通过检测荧光素酶活性变化评估化合物对CAR-辅调节因子相互作用的调节作用。结果显示CINPA1可增加辅抑制因子与CAR-LBD的结合，减少共激活因子的结合 。 分子对接研究：使用CAR配体结合域结构进行分子对接研究，分析CINPA1及其代谢物与CAR配体结合口袋的结合模式 。 |
| 细胞实验 |
CAR 活性荧光素酶报告基因实验：HepG2 细胞转染 FLAG-hCAR1 表达质粒和 CYP2B6-luc 报告质粒。24 小时后，细胞被胰蛋白酶化并接种到 384 孔板中。细胞用测试化合物处理 24 小时，然后使用 SteadyLite 试剂测量萤火虫荧光素酶活性。CAR 抑制百分比通过将 50 μM PK11195 设为 100% 抑制和 DMSO 设为 0% 抑制来计算。 [1]
PXR 激活实验：HepG2-PXR clone 1 细胞用测试化合物处理 24 小时，然后进行 SteadyLite 荧光素酶实验。 [1] 基因表达分析 (qRT-PCR)：细胞系或原代人肝细胞用化合物处理 24-48 小时。提取 RNA 并纯化，制备 cDNA。使用 TaqMan 探针进行定量 RT-PCR，以 18S 为内参。 [1] 哺乳动物双杂交实验：HEK293T 细胞共转染 pACT-hCAR1、pBIND-辅调节因子和 pG5-Luc 报告质粒。处理 24 小时后，进行 Dual-Glo 荧光素酶实验以测量萤火虫和海肾荧光素酶活性。 [1] 染色质免疫沉淀实验：原代人肝细胞用化合物处理 45 分钟或过夜。用 1% 甲醛交联蛋白质，用微球菌核酸酶消化并超声处理。用抗 CAR 抗体、抗 RNA 聚合酶 II 抗体或对照 IgG 免疫沉淀染色质。进行定量实时 PCR 以确定 CAR 在 CYP2B6 PBREM 和 XREM 区域的占据情况。 [1] CAR报告基因实验：使用稳定转染CYP2B6-luc报告基因和hCAR1的HepG2细胞（HepG2-hCAR1 CYP2B6-luc）评估CINPA1的抑制活性。将细胞接种于96孔板，用不同浓度的CINPA1处理，同时加入CAR激动剂CITCO诱导报告基因表达。通过检测荧光素酶活性计算抑制率，确定IC₅₀约为70 nM 。 原代人肝细胞实验：将原代人肝细胞用CINPA1处理，通过qPCR检测CAR靶基因（如CYP2B6、CYP3A4）的mRNA表达水平，验证化合物对内源性CAR活性的抑制作用 。 T84细胞氯离子分泌实验：T84人结肠上皮细胞在Transwell小室中培养形成单层，用CINPA1与CAR激动剂CITCO（1 μM）或苯妥英（5 μM）共处理24小时。通过短路电流测量cAMP依赖性激动剂诱导的跨上皮Cl⁻分泌变化，评估CINPA1作为CAR拮抗剂对CFTR功能的影响 。 |
| 动物实验 |
小鼠肠道CFTR表达研究：ICR小鼠腹腔注射鼠特异性CAR激动剂TCPOBOP（3 mg/kg体重），连续7天。处死后收集肠道组织，通过qPCR和Western blot检测CFTR mRNA和蛋白表达水平。CINPA1可作为工具化合物在此类研究中验证CAR介导的效应 。
霍乱毒素诱导的肠道液体蓄积模型：小鼠给予TCPOBOP（3 mg/kg，7天）预处理后，通过肠环结扎法注射霍乱毒素，测量肠道液体蓄积量。CAR激动剂可抑制液体蓄积，提示CINPA1作为CAR拮抗剂的潜在应用价值 。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
代谢特征：CINPA1在人肝微粒体中主要转化为两种代谢产物。CYP3A4将CINPA1首先转化为代谢物1，随后CYP2D6将其进一步代谢为代谢物2。代谢物1对CAR功能的抑制活性非常弱，代谢物2无活性。分子对接研究表明，CINPA1和代谢物1可结合于CAR配体结合口袋，而代谢物2可能缺乏结合所需的分子间相互作用 。
溶解性：在DMSO中的溶解度为150 mg/mL 。
储存稳定性：粉末在-20°C下可稳定保存3年，在4°C下可保存2年；溶于溶剂后在-80°C下可保存6个月，在-20°C下可保存1个月 。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
strong>CINPA1 在模拟荧光素酶筛选实验的条件下（24 小时处理），在高达 30 μM 时对 HepG2 细胞无细胞毒性作用。在延长的 4 天细胞活力实验中，CINPA1 在 HepG2、LS174T 或 HEK293T 细胞中高达 10 μM 时无细胞毒性。在更高浓度（30 μM 和 60 μM）下，CINPA1、克霉唑和 PK11195 在不同细胞系中具有不同程度的细胞毒性。 [1]
细胞毒性：CINPA1在浓度高达30 μM时对细胞无细胞毒性效应 。 核受体选择性：CINPA1对FXR、GR、LXRα/β、PPARγ、RXRα/β、VDR无激动剂或拮抗剂活性，表明其具有良好的核受体选择性 。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化学结构：CINPA1 的化学结构如图所示，购自 ChemDiv。 [1]
作用机制：CINPA1 结合 CAR 配体结合域，减少共激活因子招募并增加共抑制因子相互作用，导致 CAR 与靶基因启动子的结合减少，并降低 CAR 调节基因的转录。 [1] 物种选择性：CINPA1 不抑制小鼠 CAR 活性。在小鼠原代肝细胞中，CINPA1 不抑制 Cyp2b10 表达；在转染小鼠 CAR 的 HepG2 细胞中，CINPA1 不抑制荧光素酶报告基因活性。 [1] 特异性：CINPA1 不激活任何测试的核受体（FXR、GR、LXRα、LXRβ、PPARγ、RXRα、RXRβ、VDR），并且在 18 μM 时不抑制它们的激动剂诱导的激活。 [1] |
| 分子式 |
C23H29N3O3
|
|---|---|
| 分子量 |
395.49466586113
|
| 精确质量 |
395.22
|
| 元素分析 |
C, 69.85; H, 7.39; N, 10.62; O, 12.14
|
| CAS号 |
102636-74-8
|
| 相关CAS号 |
102636-74-8;
|
| PubChem CID |
969470
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.9
|
| tPSA |
61.9
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
552
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C(OCC)(=O)NC1C=C2C(=CC=1)CCC1=CC=CC=C1N2C(CN(CC)CC)=O
|
| InChi Key |
AYQBYSPEGRYKFA-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C23H29N3O3/c1-4-25(5-2)16-22(27)26-20-10-8-7-9-17(20)11-12-18-13-14-19(15-21(18)26)24-23(28)29-6-3/h7-10,13-15H,4-6,11-12,16H2,1-3H3,(H,24,28)
|
| 化学名 |
Ethyl [5-[(diethylamino)acetyl]-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepin-3-yl]carbamate
|
| 别名 |
CINPA1 CINPA-1 CINPA 1
|
| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~632.13 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5285 mL | 12.6425 mL | 25.2851 mL | |
| 5 mM | 0.5057 mL | 2.5285 mL | 5.0570 mL | |
| 10 mM | 0.2529 mL | 1.2643 mL | 2.5285 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
