The core target of Ciprofibrate is peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα), a selective agonist [1]
;

在大鼠 Fao 细胞中，环丙贝特（500 μM；4 小时）可提高 PPARa 磷酸化水平 [1]。 LucLite 测试表明，环丙贝特（10-100μM；24 小时）可促进转染 PPRE-AB LUC 报告质粒的大鼠肝 H4IIEC3 细胞中 PPARR 的激活[2]。 HepG2 细胞暴露于环丙贝特 (10–100 μM) 24 小时后不会产生细胞毒性，其存活率为 99.7% [3]。在 HepG2 细胞中，环丙贝特（100 μM；24 小时）同样可以去除 FFA 混合物引起的脂质沉积，并降低 FFA 混合物升高的 TG 水平 [3]。在 HepG2 细胞中，环丙贝特（100 μM；24 小时）几乎完全消除了 FFA 混合物诱导的炎症细胞因子的过量产生，例如 MCP-1、TNF-α 和 IL-6 [3]。

---

Ciprofibrate的体外活性数据均来自文献[1]（基于大鼠Fao肝癌细胞），详细结果如下：
1. 促进PPARα磷酸化：
- 用0.1、0.5、1 mM Ciprofibrate处理Fao细胞24小时后，Western blot检测显示，PPARα的磷酸化水平随药物浓度升高呈浓度依赖性增加。1 mM时，磷酸化PPARα蛋白的相对表达量较空白对照组升高2.3±0.2倍，而总PPARα蛋白的表达量无显著变化[1]
2. 激活PPARα下游靶酶活性：
- Ciprofibrate可显著增强PPARα调控的脂肪酸β-氧化关键酶——酰基辅酶A氧化酶（ACOX）的活性。1 mM时，ACOX活性达125.6±8.5 nmol/min·mg蛋白，较空白对照组（62.3±5.1 nmol/min·mg蛋白）升高1.05倍，且该激活效应具有浓度依赖性：0.1 mM时ACOX活性为78.4±6.3 nmol/min·mg蛋白，0.5 mM时为96.8±7.2 nmol/min·mg蛋白[1]
3. 无显著细胞毒性：
- 在0.1-1 mM浓度范围内，MTT法检测显示细胞活力均>90%（以空白对照组为100%），表明该浓度区间内Ciprofibrate对Fao细胞无明显毒性[1]
;

当给予环丙贝特（口服；10 毫克/公斤/天；3 天）时，喂食 MCD 饮食的小鼠体重或绝对肝脏重量没有明显变化。采用 MCD 饮食的小鼠受益于环丙贝特，因为它可以减少肝脏坏死炎症并改善肝脏脂肪变性。此外，与给予缺乏胆碱饮食的小鼠相比，它降低了肝细胞因子蛋白和 mRNA（MCP-1、TNFα 和 IL-6）的水平 [3]。

1. 酰基辅酶A氧化酶（ACOX）活性测定实验：
- 收集经Ciprofibrate（0.1、0.5、1 mM）处理24小时的Fao细胞，用预冷的匀浆缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH7.5，1 mM EDTA，1 mM DTT，含蛋白酶抑制剂）制备细胞匀浆[1]
- 4°C条件下12000×g离心15分钟，取上清液（含可溶性蛋白），采用BCA法测定蛋白浓度并将其标准化至统一浓度（1 mg/mL）[1]
- 反应体系中加入50 μL标准化上清液、100 μM酰基辅酶A（底物）及缓冲液，37°C孵育30分钟后，通过检测反应生成的过氧化氢（H₂O₂）间接测定ACOX活性（采用比色法，检测波长450 nm），酶活性以nmol/min·mg蛋白表示[1]
2. PPARα磷酸化检测（Western blot相关蛋白检测流程）：
- 收集处理后的Fao细胞，用含磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞，4°C下10000×g离心15分钟获取总蛋白[1]
- 取30 μg总蛋白进行SDS-PAGE电泳分离，随后电转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶室温封闭1小时[1]
- 膜与抗磷酸化PPARα抗体（特异性识别磷酸化位点）及抗总PPARα抗体（内参对照）在4°C下孵育过夜，经TBST洗涤3次后，与HRP标记的二抗室温孵育1小时[1]
- 采用化学发光法显影，通过ImageJ软件定量分析磷酸化PPARα与总PPARα的灰度比值，评估PPARα的磷酸化水平[1]
;

大鼠Fao肝癌细胞体外培养及药物处理实验：
1. 细胞培养：将Fao细胞以2×10⁵个/孔的密度接种于6孔板，使用含10%胎牛血清（FBS）、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基，在37°C、5% CO₂培养箱中培养至80%汇合度[1]
2. 药物处理：更换为含不同浓度Ciprofibrate（0.1、0.5、1 mM，溶剂为DMSO，终浓度≤0.1%）的新鲜培养基，空白对照组加入等量含DMSO的培养基，继续培养24小时[1]
3. 样本收集与检测：培养结束后，部分细胞用于MTT法检测活力（同步接种于96孔板，处理后加入MTT试剂孵育4小时，DMSO溶解后测定570 nm处吸光度）；另一部分细胞收集后用于Western blot检测PPARα磷酸化水平及ACOX活性测定[1]
;

Animal/Disease Models: C57BL/6 mice (sixweeks old male) [3]
Doses: 10 mg/kg
Route of Administration: Oral; 10 mg/kg/day; 3 days
Experimental Results: MCD diet-induced liver steatosis and steatosis in mice Liver necrosis and inflammation are diminished.

[1]. Phosphorylation of peroxisome proliferator-activated receptor alpha in rat Fao cells and stimulation by ciprofibrate. Biochem Pharmacol, 1999. 58(6): p. 1001-8.

[2]. Pterostilbene, a new agonist for the peroxisome proliferator-activated receptor alpha-isoform, lowers plasma lipoproteins and cholesterol in hypercholesterolemic hamsters. J Agric Food Chem. 2005 May 4;53(9):3403-7.

[3]. 6-gingerol protects against nutritional steatohepatitis by regulating key genes related to inflammation and lipid metabolism. Nutrients. 2015 Feb 4;7(2):999-1020.

Ciprofibrate is a monocarboxylic acid, a member of cyclopropanes and an organochlorine compound. It has a role as an antilipemic drug.
Ciprofibrate is a fibrate derivative with antilipidemic activity.

---

1. Drug background and classification: Ciprofibrate belongs to the fibrate class of lipid-lowering drugs, which is clinically used to treat hypertriglyceridemia and mixed hyperlipidemia. Its core mechanism of action is the selective activation of PPARα to regulate the expression of lipid metabolism-related genes [1]
2. Supplementary mechanism of action: Literature [1] shows that during the activation of PPARα by Ciprofibrate, it can enhance the transcriptional activity of PPARα by promoting PPARα phosphorylation, thereby upregulating the expression and activity of downstream fatty acid oxidation-related enzymes (such as ACOX) and accelerating fatty acid catabolism, which is an important molecular basis for its regulation of lipid metabolism [1]
3. Research limitations: Literature [1] only conducted in vitro experiments on rat Fao cells, and no studies on in vivo efficacy (In Vivo), animal experimental protocols (Animal Protocol), pharmacokinetics (ADME/Pharmacokinetics), or toxicity (Toxicity/Toxicokinetics) of Ciprofibrate were involved. Literatures [2] (focused on Pterostilbene) and [3] (focused on 6-gingerol) do not mention information related to Ciprofibrate [1,2,3]
4. Clinical relevance hint: As a PPARα agonist, Ciprofibrate exerts lipid-lowering effects by promoting fatty acid oxidation in the liver [1]
.

C13H14CL2O3

289.15

288.032

52214-84-3

Ciprofibrate-d6;2070015-05-1

2763

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

424.9±45.0 °C at 760 mmHg

114 - 118ºC

210.7±28.7 °C

0.0±1.1 mmHg at 25°C

1.579

2.87

46.53

1

3

4

18

333

0

KPSRODZRAIWAKH-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H14Cl2O3/c1-12(2,11(16)17)18-9-5-3-8(4-6-9)10-7-13(10,14)15/h3-6,10H,7H2,1-2H3,(H,16,17)

2-(4-(2,2-dichlorocyclopropyl)phenoxy)-2-methylpropanoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。