CMFDA

别名: CM-FDA; Cell Tracker Green; CMFDA 5-氯甲基荧光黄双醋酸盐; 5-氯甲基荧光素二醋酸酯; 5-氯甲基荧光素二乙酸酯
目录号: V18433 纯度: ≥98%
Green CMFDA (CMFDA) 是一种细胞穿透/可穿透荧光探针,可用作细胞示踪剂。
CMFDA CAS号: 136832-63-8
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
100mg
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产品描述
绿色 CMFDA (CMFDA) 是一种可穿透细胞的荧光探针,可用作细胞示踪剂。绿色 CMFDA 可被活细胞中常见的非特异性酯酶切割,生成荧光化合物——荧光素,该化合物可在荧光显微镜下观察到。
CMFDA(5-氯甲基荧光素二乙酸酯;绿色 CMFDA)是一种细胞渗透性荧光探针和细胞示踪染料。它能自由进入活细胞,并在细胞内被酯酶转化为一种细胞不渗透的可溶性荧光化合物。CMFDA 的激发/发射波长最大值分别为 492/517 nm。它也是一种强效的 GSTO1 抑制剂,IC50 值为 51 nM。
生物活性&实验参考方法
靶点
CMFDA targets thiols (cysteine residues) in cells, forming a fluorescent adduct. It is cleaved by non-specific esterases common in living cells, producing a fluorescent compound, fluorescein. The compound also inhibits glutathione S-transferase omega 1 (GSTO1) with an IC50 of 51 nM. Its primary use is as a cell tracker dye for long-term monitoring of cell proliferation, migration, and survival.
体外研究 (In Vitro)
CMFDA是一种细胞渗透性荧光探针,不影响细胞活力或增殖。它在细胞内转化为一种细胞不渗透的荧光产物。该化合物在标准滤光片下呈现明亮的荧光。作为GSTO1抑制剂,其IC50值为51 nM。这些特性使其在细胞追踪研究、细胞凋亡检测和细胞实验中具有应用价值。
体内研究 (In Vivo)
在体内,CMFDA可用于动物模型中的细胞追踪和标记。将CMFDA标记的细胞注射到动物体内后,即可追踪这些细胞,以研究细胞迁移、归巢和植入情况。该化合物的荧光特性使其能够在组织中可视化标记细胞。
酶活实验
CMFDA的体外活性测定包括测量其荧光特性及其对GSTO1的抑制作用。对于GSTO1抑制作用的测定,将酶与底物(例如谷胱甘肽和硫醇反应化合物)在不同浓度的CMFDA存在下孵育。采用分光光度法测定酶活性,并计算IC50值。
细胞实验
CMFDA 的细胞检测方法是将细胞与浓度为 1-10 μM 的染料孵育 15-60 分钟。洗涤后,通过流式细胞术或荧光显微镜分析细胞。染料可在细胞内保留数天,从而可以进行长期追踪。评估细胞活力以确认染料不影响细胞健康。
动物实验
CMFDA的体内动物研究包括体外标记细胞,然后将其注射到动物体内。标记的细胞可通过荧光成像进行追踪,或通过采集组织并利用流式细胞术或荧光显微镜进行分析。染料在细胞内的保留使得可以长期追踪细胞迁移和植入情况。
药代性质 (ADME/PK)
CMFDA 可透过细胞膜,并在细胞内转化后保留在细胞内。其分子量为 464.86 g/mol。该化合物通常溶于 DMSO 配制成储备液,使用时用细胞培养基稀释。它在细胞内可稳定存在数天。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
CMFDA通常无毒,不影响细胞活力或增殖。在用于细胞标记的浓度(1-10 μM)下,未见明显毒性报道。该化合物仅供研究使用,应按照标准安全预防措施进行操作。
参考文献

[1]. Challenges in using CellTracker Green on foraminifers that host algal endosymbionts. PeerJ. 2018 Aug 30;6:e5304.

其他信息
5-氯甲基荧光素二乙酸酯是一种乙酸酯类化合物,属于荧光染料。其功能与荧光素(内酯形式)类似。
CMFDA 是一种广泛使用的荧光细胞示踪染料,用于研究细胞增殖、迁移和存活。它也是一种强效的 GSTO1 抑制剂。该化合物可从多家供应商处获得,仅供研究使用。它尚未获准用于临床,仅供实验室研究之用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H17O7CL
分子量
464.85128
精确质量
464.066
CAS号
136832-63-8
PubChem CID
122297
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.49 g/cm3
沸点
657.5ºC at 760 mmHg
闪点
238.3ºC
蒸汽压
3.65E-17mmHg at 25°C
折射率
1.675
LogP
4
tPSA
88.1
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
33
分子复杂度/Complexity
760
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC(=O)OC1=CC2=C(C=C1)C3(C4=C(C=C(C=C4)CCl)C(=O)O3)C5=C(C=C(C=C5)OC(=O)C)O2
InChi Key
IPJDHSYCSQAODE-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C25H17ClO7/c1-13(27)30-16-4-7-20-22(10-16)32-23-11-17(31-14(2)28)5-8-21(23)25(20)19-6-3-15(12-26)9-18(19)24(29)33-25/h3-11H,12H2,1-2H3
化学名
[6'-acetyloxy-5-(chloromethyl)-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3'-yl] acetate
别名
CM-FDA; Cell Tracker Green; CMFDA
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~33.33 mg/mL (~71.70 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.43 mg/mL (3.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 14.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 1.43 mg/mL (3.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 14.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1512 mL 10.7562 mL 21.5123 mL
5 mM 0.4302 mL 2.1512 mL 4.3025 mL
10 mM 0.2151 mL 1.0756 mL 2.1512 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们