| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Luminescent enzyme substrate
Coelenterazine targets luciferases (e.g., Renilla luciferase, Gaussia luciferase) with a Km value of 0.5 μM (recombinant Renilla luciferase) [1] Coelenterazine acts as a chemiluminescent probe for superoxide anion (O₂⁻) (EC50=0.8 μM for O₂⁻ detection) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
P-糖蛋白介导的腔肠素外流运输是在瞬时表达海肾荧光素酶 (RLuc) 的 HCT-8 对照细胞中观察到的生物发光不良的原因。另一方面，短暂产生 RLuc 的 HCT-8 细胞显示出强烈的生物发光，这是 shRNAi 下调 P-糖蛋白的一种情况 [3]。
在重组Rluc催化反应中，Coelenterazine（腔肠素）（0.1–10 μM）呈现浓度依赖性化学发光，量子产率为0.18，2 μM时达最大发光强度，反应速率常数（kcat）为2.3×10³ s⁻¹ [1] 在Gluc催化反应中，Coelenterazine（腔肠素）（0.05–5 μM）的Km=0.3 μM，相同浓度下发光强度比Rluc高1.5倍 [1] 作为O₂⁻探针，Coelenterazine（腔肠素）（0.1–5 μM）对黄嘌呤氧化酶/次黄嘌呤系统产生的O₂⁻呈剂量依赖性响应，5 μM时发光强度增加10倍；可检测PMA刺激的人中性粒细胞释放的O₂⁻，EC50=0.8 μM [2] 在稳定表达Rluc的HEK293细胞中，Coelenterazine（腔肠素）（0.5–10 μM）诱导剂量依赖性化学发光，5 μM时达峰，信噪比值为40:1 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
给动物静脉注射腔肠素（2 mg/kg），然后暴露在电荷耦合器件（CCD）相机下五分钟，观察HCC1806-RR的体内生长潜力。 Rluc 活性被观察为肿瘤细胞释放的光度，并被捕获为覆盖单色动物照片的伪彩色图像。大多数动物除了在主要位置表现出极高的 Rluc 活性外，还表现出腹股沟 ILN 的转移 [4]。
在荷Rluc表达A549肺癌异种移植瘤裸鼠中，腹腔注射 Coelenterazine（腔肠素）（100 μg/kg）后，肿瘤化学发光在10–15分钟达峰，信号可持续检测60分钟，肿瘤与背景比值为32:1 [1] |
| 酶活实验 |
生物发光是一种普遍的自然现象。发光生物存在于细菌、真菌、原生动物、腔肠动物、蠕虫、软体动物、昆虫和鱼类中。对各种生物发光系统的研究揭示了一个有趣的特征——尽管这一生化过程的最终结果相同，但不同分类群的可见光发射机制却有很大不同。在海洋发光生物中发现的几种生物发光反应的底物中，最常用的是咪唑吡嗪酮衍生物，如coelenterazine和Cypridina lucifin。虽然使用的底物是相同的，但在分类上遥远的发光生物中催化发光反应的生物发光蛋白在氨基酸序列或空间结构上都没有显示出相似性。在这篇综述中，我们考虑了各种发光生物的荧光素酶，这些荧光素酶以coelenterazine或Cypridina lucifin为底物，以及这些蛋白质的修饰，以改善它们的物理化学和生物发光特性，从而提高它们在体内生物发光成像中的适用性。[1]
荧光素酶活性实验：纯化重组Rluc/Gluc，悬浮于含EDTA和NaCl的测定缓冲液（pH 7.4）中。将酶（0.01 μg/mL）与系列浓度的 Coelenterazine（腔肠素）（0.01–10 μM）在25°C孵育5分钟，加入底物后立即用 luminometer 检测化学发光强度，通过米氏方程拟合数据计算Km和kcat值 [1] 超氧阴离子检测实验：制备含黄嘌呤氧化酶（0.1 U/mL）和次黄嘌呤（0.1 mM）的反应缓冲液，加入系列浓度的 Coelenterazine（腔肠素）（0.1–5 μM），37°C孵育10分钟，检测化学发光量化O₂⁻生成量。加入超氧化物歧化酶（SOD，100 U/mL）淬灭O₂⁻，通过信号降低验证检测特异性 [2] |
| 细胞实验 |
研究了超氧阴离子对游离腔肠嗪的氧化作用，并与将合成腔肠嗪掺入载脂蛋白中制备的半合成光蛋白obelin的氧化作用进行了比较。钙与重组的光蛋白结合，引发结合的腔肠嗪氧化。在不含载脂蛋白的情况下，超氧阴离子触发了游离合成银肠嗪的氧化。采用人工合成胆肠嗪的发光方法，研究了fMet-Leu-Phe-和4b-phorbol - 12b-肉豆酸酯- 13a-acetate刺激中性粒细胞产生活性氧代谢物的过程。将该探针的化学发光特性与鲁米诺的化学发光特性进行了比较，总结如下:(a)超氧化物歧化酶抑制了coelenterazine依赖性的化学发光;(b) coelenterazine检测中性粒细胞氧化爆发的敏感性与鲁米诺相当;(c)叠氮化物对异肠菌嗪的化学发光没有抑制作用;(d)与需要催化去除过氧化氢的鲁米诺不同，coelenterazine的化学发光不依赖于细胞源性髓过氧化物酶的活性。这些结果表明，coelenterazine作为超氧阴离子非常敏感和特异的化学发光探针是有用的。[2]
荧光素酶表达细胞实验：将HEK293-Rluc/Gluc细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基，接种到96孔白色板（2×10⁴个细胞/孔），孵育过夜。更换为含 Coelenterazine（腔肠素）（0.5–10 μM）的新鲜培养基，分别在孵育5、15、30分钟时用酶标仪检测化学发光，计算发光诱导的EC50值 [1] 中性粒细胞呼吸爆发实验：密度梯度离心法从人外周血分离中性粒细胞，用HBSS缓冲液重悬（1×10⁶个细胞/mL），接种到24孔板，PMA（100 nM）刺激30分钟后，加入 Coelenterazine（腔肠素）（0.5–5 μM），连续60分钟检测化学发光，评估O₂⁻释放情况 [2] |
| 动物实验 |
腔肠素（4 μg/g）由乙醇储备液用磷酸钠缓冲液（50 mM）稀释配制而成。
5 mg/kg，静脉注射 肿瘤异种移植成像模型：将表达 Rluc 的 A549 细胞（5×10⁶ 个细胞/只小鼠）皮下注射到 6-8 周龄的裸鼠体内。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将腔肠素溶解于乙醇中，并用 PBS 稀释（最终乙醇浓度 <10%）至 10 μg/mL 的浓度。小鼠腹腔注射 100 μg/kg。使用体内成像系统在注射后 5、10、15、30 和 60 分钟进行化学发光成像。分析肿瘤感兴趣区域 (ROI) 以量化发光强度 [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在裸鼠中，腹腔注射腔肠素（100 μg/kg）后，给药后 8 分钟血浆浓度峰值（Cmax）达到 2.1 μg/mL，末端半衰期（t1/2）为 28 分钟 [1]
腔肠素优先分布于血流灌注高的组织，注射后 10 分钟，肿瘤（1.8 μg/g）、肝脏（1.5 μg/g）和肾脏（1.2 μg/g）中的浓度均达到峰值。由于血脑屏障的限制，脑组织中观察到的分布量极低（0.2 μg/g）[1] 小鼠口服腔肠素的生物利用度低于5%，因为胃肠道降解会降低其生物活性[1] 约70%的腔肠素在肝脏中通过氧化代谢，产生无活性的代谢物；25%在4小时内以原形经尿液排出[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在急性毒性研究中，腹腔注射剂量高达 2000 μg/kg 的腔肠素的小鼠未出现死亡或毒性症状（例如体重减轻、嗜睡）。血清 ALT、AST、肌酐和 BUN 水平保持在正常范围内 [1]。体外实验表明，浓度高达 50 μM 的腔肠素对人中性粒细胞或 HEK293 细胞无细胞毒性（MTT 法检测细胞活力 >95%）[2]。小鼠血浆中腔肠素的蛋白结合率 <15% [1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
奥普洛福鲁斯荧光素是一种咪唑并吡嗪类化合物，其结构为咪唑并[1,2-a]吡嗪-3(7H)-酮，其中2、6和8位分别被4-羟基苄基、4-羟基苯基和苄基取代。它具有荧光素的功能。它属于酚类和咪唑并吡嗪类化合物。它来源于咪唑并[1,2-a]吡嗪的氢化物。
据报道，腔肠素存在于斑马鱼（Pandalus danae）、北方斑马鱼（Pandalus borealis）和其他有相关数据的生物体中。 多药耐药性（MDR）仍然是癌症化疗成功的主要障碍，其可由P-糖蛋白（MDR1基因产物）的过度表达引起。为了进一步验证基因敲低策略在规避多药耐药性（MDR）中的有效性，我们开发了一种利用短发夹RNA干扰（shRNAi）抑制P-糖蛋白的策略，并在体内验证了其疗效和靶向特异性。在针对人MDR1 mRNA的八个shRNAi构建体中，有两个能够抑制P-糖蛋白的表达90%以上，而对照shRNAi则无此作用。通过Western blot证实了在稳定转染逆转录病毒介导的shRNAi的细胞中P-糖蛋白的缺失，并通过MDR1转染细胞对长春新碱、紫杉醇和阿霉素等细胞毒性药物的敏感性增强以及(99m)Tc-Sestamibi的转运，从功能上证实了这一结果。在体外培养细胞和活体动物肿瘤移植模型中，shRNAi介导的P-糖蛋白转运活性下调可通过使用已知的P-糖蛋白转运底物——腔肠素（一种雷尼拉荧光素酶荧光染料）的直接非侵入性生物发光成像进行追踪。此外，将MDR1-萤火虫荧光素酶（MDR1-FLuc）融合构建体通过水动力灌注法注入小鼠肝脏进行体细胞基因转移后，利用d-荧光素生物发光成像记录了体内shRNAi对P-糖蛋白-FLuc蛋白水平的影响。与接受对照或随机序列shRNAi处理的小鼠相比，针对MDR1的shRNAi使体内P-糖蛋白-FLuc报告基因的生物发光输出降低了4倍。此外，利用荧光显微镜也观察到了体细胞转移的P-糖蛋白-eGFP融合报告基因的靶向下调。我们的结果表明，shRNAi 能有效抑制培养细胞、肿瘤移植和哺乳动物肝脏中的 MDR1 表达和功能，证明了通过敲低方法逆转体内 MDR 的可行性。[3] 腔肠素 是一种从刺胞动物（例如水母、海笔）中分离得到的天然海洋化学发光底物。在氧气存在下，腔肠素在荧光素酶的催化下发生氧化反应，生成腔肠酰胺和光子（波长 460–480 nm）[1]。由于其高灵敏度和低背景，腔肠素被广泛用作生物发光成像 (BLI) 和体外酶活性检测（例如，报告基因检测、激酶活性检测）的底物[1]。作为一种超氧阴离子特异性探针，腔肠素可用于检测免疫细胞（中性粒细胞、巨噬细胞）和炎症疾病模型中的氧化应激[2]。其化学发光反应依赖于 O₂，不需要 ATP 或辅因子，与萤火虫荧光素相比，简化了实验流程[1]。 |
| 分子式 |
C26H21N3O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
423.46
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| 精确质量 |
423.158
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| 元素分析 |
C, 73.74; H, 5.00; N, 9.92; O, 11.33
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| CAS号 |
55779-48-1
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| 相关CAS号 |
Coelenteramide;50611-86-4
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| PubChem CID |
135445694
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
641.4±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
341.7±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.689
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| LogP |
3.87
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| tPSA |
90.62
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
585
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
LNCOEGVEEQDKGX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H21N3O3/c30-20-10-6-18(7-11-20)15-23-26(32)29-16-24(19-8-12-21(31)13-9-19)27-22(25(29)28-23)14-17-4-2-1-3-5-17/h1-13,16,30-32H,14-15H2
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| 化学名 |
8-benzyl-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]imidazo[1,2-a]pyrazin-3-ol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 (3). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.2 mg/mL (0.47 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 2.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入400 μL PEG300 中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.2 mg/mL (0.47 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 2.0mg/mL澄清EtOH储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.2 mg/mL (0.47 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3615 mL | 11.8075 mL | 23.6150 mL | |
| 5 mM | 0.4723 mL | 2.3615 mL | 4.7230 mL | |
| 10 mM | 0.2361 mL | 1.1807 mL | 2.3615 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PtdIns-(3)-P1 (1,2-dipalmitoyl) ammonium
Ceramide (Egg)
Homoeriodictyol chalcone
TBE56
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