| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Congo red is not a drug with a therapeutic target in this study. It is a histochemical dye that specifically binds to crossed β-pleated sheet structures found in misfolded protein aggregates (amyloid-like structures) [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
为了研究突变细胞中的聚集体是否具有错误折叠的β-折叠二级结构，一种简便的筛选方法是使用刚果红组织化学染色。组织化学染料刚果红对重叠的β-折叠结构具有独特的结合亲和力。野生型HSPB1通过与非天然构象的蛋白质结合，应能维持蛋白质稳态并阻止底物聚集。然而，T139M突变体无法发挥此功能，反而导致错误折叠的蛋白质积累，而这些错误折叠的蛋白质会被刚果红靶向插入β-折叠结构之间。研究突变细胞中的聚集体是否具有错误折叠的β-折叠二级结构的简便方法是利用刚果红组织化学染色[1]。
检测表达突变型HSPB1的细胞中的刚果红亲和性聚集体：将表达突变型HSPB1-T139M或野生型HSPB1的质粒转染至HeLa细胞。转染24小时后，用10%甲醛固定细胞，并用1%刚果红染色5分钟，随后用0.01%氢氧化钾的50%乙醇溶液脱色。盖玻片经梯度乙醇脱水后封片，并在罗丹明滤光片下用荧光显微镜观察。表达突变型HSPB1-T139M的细胞显示出大小不一的胞质内聚集体，这些聚集体具有刚果红亲和性（在罗丹明滤光片下显示红色荧光），而过表达野生型HSPB1的细胞则未显示刚果红亲和性。这表明刚果红可以特异性地识别由突变型HSPB1蛋白形成的具有β-折叠二级结构的错误折叠蛋白聚集体[1]。 |
| 细胞实验 |
刚果红染色法检测蛋白聚集体：将HeLa细胞培养于盖玻片上，并转染突变型或野生型HSPB1构建体。24小时后，用10%甲醛固定细胞10分钟。然后用1%刚果红溶液染色5分钟。脱色采用0.01%氢氧化钾的50%乙醇溶液。盖玻片经梯度乙醇溶液（浓度递增）脱水，用封片剂封片，并在罗丹明滤光片下进行荧光显微镜观察。含有错误折叠的β-折叠片层结构的蛋白聚集体的细胞显示出刚果红阳性染色（刚果红亲和性聚集体），表现为红色荧光[1]。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
代谢/代谢物
刚果红（一种源自联苯胺的偶氮染料）和2-偶氮芴（一种2-氨基芴的衍生物）在与大鼠肠道细菌悬液过夜孵育后被还原。高效液相色谱和紫外光谱证实了刚果红孵育提取物中存在联苯胺。……在存在线粒体后激活系统的情况下，刚果红孵育提取物对鼠伤寒沙门氏菌TA1538具有致突变性，但未经处理的刚果红不具有致突变性。……使用盲肠细菌进行还原预处理可以扩展Ames试验在潜在诱变剂筛选中的应用。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
刚果红是一种指示剂染料，在 pH 3.0 时呈蓝紫色，在 pH 5.0 时呈红色。它由 3,3'-(联苯-4,4'-二基二氮杂卓-2,1-二基)双(4-氨基萘-1-磺酸盐)组成。其功能与 3,3'-(联苯-4,4'-二基二氮杂卓-2,1-二基)双(4-氨基萘-1-磺酸)类似。刚果红是联苯胺重氮双(1-萘胺-4-磺酸)的钠盐；一种重氮染料，在碱性溶液中呈红色，在酸性溶液中呈蓝色，主要用作指示剂和生物染色剂。它也是一种酸性染料，用于检测胃内容物中的盐酸。此外，它还用于淀粉样变性的组织学检查。
在本研究中的作用：刚果红被用作组织学工具，以研究HSPB1基因中一种新突变（p.T139M）的致病性。该研究假设这种突变可能损害蛋白质降解功能，导致错误折叠蛋白聚集体的形成。刚果红染色用于确定表达突变HSPB1蛋白的细胞中形成的聚集体是否具有淀粉样变性特征（即，是否含有β-折叠片层结构）[1] 。 - 染色机制：刚果红是一种重氮染料，能够特异性地与淀粉样原纤维中发现的交叉β-折叠片层结构结合。当与此类结构结合时，它在偏振光下表现出特征性的绿色双折射，或在罗丹明光学下表现出红色荧光，从而可以观察蛋白质聚集体[1]。 - 研究结果的意义：仅在表达突变体 HSPB1-T139M 的细胞中存在刚果红阳性聚集体，而在表达野生型 HSPB1 的细胞中则不存在，这证明这种新的突变会导致蛋白质错误折叠和聚集。这支持了该突变的致病性，并提示该疾病的机制涉及错误折叠蛋白的积累[1]。 - 作为筛选工具的建议：作者提出，刚果红组织化学染色可作为一种简便的筛选工具，用于研究表达突变蛋白的细胞中聚集体是否具有错误折叠的β-折叠二级结构[1]。 - 染色特征：在实验条件下，刚果红阳性聚集体在罗丹明显微镜下观察时，呈现为大小不一的胞质内红色荧光结构。这些聚集体在表达突变型HSPB1蛋白的HeLa细胞胞质中以单个或多个包涵体的形式存在[1]。 - 来源：本研究中使用的刚果红购自Sigma-Aldrich公司[1]。 |
| 分子式 |
C32H22N6NA2O6S2
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|---|---|
| 分子量 |
696.6632
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| 精确质量 |
696.083
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| CAS号 |
573-58-0
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| PubChem CID |
11313
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| 外观&性状 |
Pink to red solid powder
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| 密度 |
0.995 g/mL at 25 °C
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| 熔点 |
>360 °C(lit.)
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| LogP |
10.787
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| tPSA |
232.64
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
48
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| 分子复杂度/Complexity |
1180
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
IQFVPQOLBLOTPF-UHFFFAOYSA-L
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H24N6O6S2.2Na/c33-31-25-7-3-1-5-23(25)29(45(39,40)41)17-27(31)37-35-21-13-9-19(10-14-21)20-11-15-22(16-12-20)36-38-28-18-30(46(42,43)44)24-6-2-4-8-26(24)32(28)34;;/h1-18H,33-34H2,(H,39,40,41)(H,42,43,44);;/q;2*+1/p-2
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| 化学名 |
disodium;4-amino-3-[[4-[4-[(1-amino-4-sulfonatonaphthalen-2-yl)diazenyl]phenyl]phenyl]diazenyl]naphthalene-1-sulfonate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~20 mg/mL (~28.71 mM)
H2O : ~1 mg/mL (~1.44 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (2.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (2.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4354 mL | 7.1771 mL | 14.3542 mL | |
| 5 mM | 0.2871 mL | 1.4354 mL | 2.8708 mL | |
| 10 mM | 0.1435 mL | 0.7177 mL | 1.4354 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02610972 | COMPLETEDWITH RESULTS | Device: Congo Red test GV-005 | Preeclampsia | Gynuity Health Projects | 2018-12-01 | |
| NCT02381197 | UNKNOWN STATUS | Device: Congo Red Dot test | Preeclampsia | Gynuity Health Projects | 2017-01 | |
| NCT02611011 | COMPLETED | Device: Congo Red Test (GV-005) | Preeclampsia | Gynuity Health Projects | 2018-03-01 | |
| NCT02381210 | COMPLETED | Device: Congo Red Dot Test | Preeclampsia | Gynuity Health Projects | 2016-07 | |
| NCT02455544 | COMPLETED | Preeclampsia | Catalin S Buhimschi, MD | 2014-08 |
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