| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Endothelial Nitric Oxide Synthase (eNOS): CORM-401-induced NO production is completely abolished by L-NAME, confirming NO is produced by eNOS. [1]
Ryanodine Receptors (RyR): CORM-401-induced calcium signals are completely blocked by dantrolene, an inhibitor of RyR. [1] Mitochondrial large-conductance calcium-regulated potassium channels (mitoBKCa): CORM-401 directly activates mitoBKCa channels in mitoplasts, even in low-calcium conditions. [3] Pentose Phosphate Pathway (PPP): CORM-401 accelerates the PPP, leading to increased NADPH concentration. [1] NADPH Oxidase (NOX): CORM-401 reduces TNF-α/CHX-induced total cellular ROS, which is partially derived from NOX. [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
内皮细胞EA.hy926在CORM-401（100 μM；1 h）刺激下产生NO[1]。当加入CORM-401（30 μM）时，内质网和质膜的池操纵型钙通道耦合性增强，诱导钙信号峰值[1]。CORM-401（50 μM；1 h）显著降低TNF-α/CHX和H2O2引起的ROS生成和细胞死亡[2]。CORM-401（0.5 mM、1 mM）持续增加内皮细胞EA.hy926的耗氧率[3]。在降低细胞外酸化率（ECAR）的同时，CORM-401（10、30 和 100 μM）会导致耗氧率（OCR）浓度依赖性增加[3]。在人内皮细胞 EA.hy926 中，CORM-401（100 μM，1 小时）诱导 NO 生成量较未处理细胞增加 5.2 倍，较用非活性 CORM-401 处理的细胞增加 5.7 倍。用 L-NAME（100 μM）预孵育可完全消除这种效应。[1] CORM-401（30 μM）在 EA.hy926 细胞中诱导两种胞质钙信号：缓慢/逐渐增加和峰值样增加/振荡。iCORM-401 不诱导这些信号。 [1]
CORM-401诱导的峰状钙信号来源于内质网，因为其可被thapsigargin（SERCA抑制剂）降低，并被dantrolene（RyR抑制剂）完全阻断，但不能被U73122（PLC抑制剂）阻断。[1] CORM-401诱导的胞质钙缓慢升高依赖于储存操纵性钙（SOC）通道的内流。在无钙培养基中，CORM-401增强了内质网与质膜SOC通道的偶联，导致重新添加钙后胞质钙浓度[Ca2+]c较对照组增加两倍。[1] 在EA.hy926细胞中，CORM-401加速了磷酸戊糖途径（PPP），表现为R5P/6PG比值显著升高、NADPH浓度升高以及GSH/GSSG比值降低。磷酸戊糖途径（PPP）抑制剂6-氨基烟酰胺（6-AN）抑制了NO的增加。[1]在小鼠肠上皮MODE-K细胞中，CORM-401（50 μM，预孵育1小时+共孵育6小时）显著降低了TNF-α/CHX诱导的细胞内总ROS生成和细胞死亡。然而，它对TNF-α/CHX诱导的线粒体超氧化物生成没有影响。[2]在MODE-K细胞中，CORM-401（50 μM）不降低鱼藤酮诱导的线粒体超氧化物生成，但降低了抗霉素A诱导的线粒体超氧化物生成。 [2]在MODE-K细胞中，CORM-401（50 μM，预孵育1小时+共孵育40分钟）显著减弱了H2O2（1 mM）诱导的细胞内总ROS生成。[2]在EA.hy926细胞中，CORM-401（10-100 μM）诱导氧消耗率（OCR）浓度依赖性增加，同时细胞外酸化率（ECAR）降低，表明线粒体呼吸解偶联和糖酵解受到抑制。[3]在EA.hy926细胞中，CORM-401（30 μM）增加质子泄漏和非线粒体呼吸，同时降低ATP偶联呼吸、最大呼吸和储备能力。 [3] 在对 EA.hy926 细胞线粒体进行膜片钳实验时，CORM-401 (30 μM) 在低钙 (1 μM) 溶液中重新激活了原本处于失活状态的线粒体 BKCa 通道。这种作用可被帕西林 (1 μM) 逆转。[3] |
| 酶活实验 |
采用膜片钳技术在细胞质体中评估线粒体大电导钙调节钾通道（mitoBKCa）的活性。从EA.hy926细胞中分离线粒体，通过将等渗溶液更换为低渗溶液（5 mM HEPES，100 μM CaCl₂，pH 7.2）破坏线粒体外膜，随后用高渗溶液（750 mM KCl，30 mM HEPES，100 μM CaCl₂，pH 7.2）恢复等渗状态，从而获得细胞质体。实验采用膜片钳技术，浴液和移液管溶液的KCl浓度相同（均为150 mM/150 mM）。在低钙溶液（1 μM Ca2+）中测试了CORM-401（30 μM）的作用，并在不同电压（-60 mV 至 +60 mV）下记录了通道活性。计算了通道开放概率（Po）以及通道关闭和开放的平均寿命。使用膜片钳放大器记录电流，经 1 kHz 低通滤波，并以 100 kHz 采样。[3]
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| 细胞实验 |
对于钙成像，将EA.hy926细胞在室温下用5 μM fura-2 AM或fluo-4 AM以及0.005% Pluronic孵育30分钟。使用倒置荧光显微镜进行荧光测量。在单个细胞中监测胞质钙浓度([Ca2+]c)，fura-2的激发波长为340 nm和380 nm。对于共聚焦成像，使用488 nm氩离子激光器激发fluo-4，并在505-550 nm范围内进行测量。向细胞中加入CORM-401 (30 μM)以诱导钙信号。[1] 使用自旋捕获胶体Fe2+(DETC)2，通过电子顺磁共振(EPR)光谱法测量EA.hy926细胞产生的NO。将细胞与CORM-401 (100 μM) 或 iCORM-401 在 37°C 下孵育 1 小时。然后收集细胞，用液氮速冻，并在指形杜瓦瓶中使用 EPR 光谱仪测量 NO-Fe2+(DETC)2 信号，设置参数为：微波功率 10 mW；调制幅度 0.8 mT；扫描宽度 11.5 mT；扫描时间 61.44 s；扫描次数 4 次。[1]
为了测量 MODE-K 细胞中的细胞内 ROS 和细胞死亡，用CORM-401 (40 或 50 μM) 和氧化应激刺激物（TNF-α/CHX、H2O2、鱼藤酮、抗霉素 A）处理细胞。在处理结束前，细胞分别用 10 μM 羧基-H2DCFDA 孵育 40 分钟或用 5 μM MitoSOX Red 孵育 30 分钟。随后，细胞用 Sytox Red (2.5 nM) 或 Sytox Green (2 nM) 染色，并使用 488 nm 激发光进行流式细胞术分析。在设门的活细胞（Sytox 阴性）中测量 ROS 生成。[2] MODE-K 细胞的线粒体功能障碍通过 200 nM MitoTracker Green FM 和 25 nM MitoTracker Deep Red FM 双重染色 30 分钟进行评估。通过流式细胞术测定线粒体无呼吸（功能障碍）（MitoTracker Green 阳性/MitoTracker Deep Red 阴性）的细胞百分比。 [2] 使用 200 nM 四甲基罗丹明甲酯 (TMRM) 处理 30 分钟，随后用 2 nM Sytox Green 染色，测量 MODE-K 细胞的线粒体膜电位 (Ψm)。通过流式细胞术分析设门活细胞（Sytox Green 阴性）中线粒体去极化的细胞百分比。[2] 使用 Seahorse XF24 分析仪测量 EA.hy926 细胞的耗氧率 (OCR) 和细胞外酸化率 (ECAR)。细胞接种密度为每孔 30,000 个细胞。在进行线粒体功能测定时，先注射CORM-401，随后依次注射寡霉素（1 μg/ml）、FCCP（0.7 μM）和鱼藤酮/抗霉素A（1 μM/1 μM）。在进行糖酵解应激试验时，依次注射葡萄糖（10 mM）、CORM-401、寡霉素（1 μg/ml）和2-脱氧葡萄糖（100 mM）。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
CORM-401是一种水溶性CO释放分子。[1][2]
每摩尔化合物最多可释放三当量CO。[2][3] 在无细胞体外系统中，CORM-401的半衰期(t1/2)据报道小于4分钟（Crook等人，2011）和约15分钟（Fayad-Kobeissi等人，2016）。[2] 在生物相关氧化剂（例如过氧化氢(H2O2)）存在下，CORM-401释放CO的速率会加快。[2] 该化合物溶于磷酸盐缓冲液(PBS)中用于实验。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在EA.hy926内皮细胞中，浓度为10、30和100 μM的CORM-401未显示明显的细胞毒性。然而，浓度为300 μM时，导致耗氧率(OCR)迅速升高，随后在孵育约45分钟后显著下降，表明其具有毒性。[3]在MODE-K肠上皮细胞中，浓度为50 μM的CORM-401孵育12小时后，本身对细胞活力没有影响。选择该浓度是因为其对细胞活力无影响。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
CORM-401 是一种锰基金属羰基化合物。[2][3]
该化合物对光敏感，因此在所有实验中均避光保存。[3] 一种不释放 CO 的非活性形式 iCORM-401 被用作阴性对照。iCORM-401 由 MnSO4 和 CORM-401 的配体组成。与其他 CO 释放分子不同，由于 iCORM-401 的溶液稳定，因此无法制备真正的 iCORM-401。[1][2] 从 CORM-401 释放的 CO 可诱导内皮细胞产生双组分代谢反应：线粒体呼吸解偶联（依赖于 mitoBKCa 通道的激活）和糖酵解抑制（不依赖于 mitoBKCa 通道）。 [3] CORM-401诱导的NO生成与钙信号传导相互关联，NO生成位于钙信号传导的上游。该过程依赖于磷酸戊糖途径（PPP）和NADPH。[1] |
| 精确质量 |
330.902
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|---|---|
| CAS号 |
1001015-18-4
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| 相关CAS号 |
1001040-67-0 (cation);1001015-18-4;
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| PubChem CID |
168430661
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
0.016
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| tPSA |
97.93
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
151
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[H+].[O+]#C[Mn+]1([SH-]C(N(CC([O-])=O)C)=S1)(C#[O+])(C#[O+])C#[O+]
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| InChi Key |
BYBYPEYFKXEVIY-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C4H7NO2S2.4CO.Mn/c1-5(4(8)9)2-3(6)7;4*1-2;/h2H2,1H3,(H,6,7)(H,8,9);;;;;/p-1
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| 化学名 |
carbon monoxide;N-(carboxymethyl)-N-methylcarbamodithioate;manganese
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~75.48 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.55 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.55 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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