Crustacean Cardioactive Peptide CCAP

别名: 甲壳类心脏活性肽
目录号: V30972 纯度: ≥98%
甲壳动物心脏活性肽游离酸是一种高度保守的九肽,最早从普通滨蟹的心包器官中提取。
Crustacean Cardioactive Peptide CCAP CAS号: 309247-84-5
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
甲壳类心脏活性肽(游离酸)是一种高度保守的九肽,最初是从普通滨蟹的心包器官中提取出来的。它具有调节心跳的功能;甲壳类心脏活性肽(游离酸)也能调节其他节肢动物的心跳和神经活动。
甲壳类心脏活性肽(CCAP),游离酸(CAS 309247-84-5)是一种高度保守的酰胺化环状九肽,最初从欧洲绿蟹(Carcinus maenas)的心包器官中分离得到。其一级结构为PFCNAFTGC-NH2,Cys3和Cys9之间存在二硫键。CCAP是一种神经肽,作用于心肌细胞和肌肉细胞中的受体,调节心脏收缩、血液循环和肌肉活动。除了在甲壳类动物中调节心跳外,CCAP还能调节其他节肢动物的神经元活动,并作为摄食刺激剂和蜕皮调节剂。它被广泛应用于神经调控、内分泌信号传导以及行为相关神经回路协调的研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary targets of Crustacean Cardioactive Peptide are G protein-coupled receptors (GPCRs) and G protein-coupled receptor kinases (GRKs) found in cardiac and muscle cells. As a neuropeptide, CCAP binds to specific GPCRs on the surface of target cells, triggering intracellular signaling cascades that regulate heart contraction, circulation, and muscle activity. The peptide's cyclic structure, stabilized by a disulfide bridge between cysteine residues at positions 3 and 9, is essential for its receptor binding and biological activity. CCAP's highly conserved sequence across arthropod species suggests that its receptor-mediated mechanisms are evolutionarily conserved.
体外研究 (In Vitro)
虽然腹部 A 和超胸对于 CCAP 中间神经元的指定并非必要,但它们对于阻止 CCAP 传出神经元因细胞凋亡而死亡是必要的 [2]。
在体外,甲壳类心脏活性肽 (CCAP) 被用作研究节肢动物模型中神经调控、心脏功能和肌肉收缩的工具。已知该肽能够以浓度依赖的方式调节离体组织中的心跳和肌肉活动。其游离酸形式具有天然结构,适用于生化分析、受体研究和比较生理学研究。CCAP 也可用作模型肽,用于探索神经肽家族的进化保守性,并解析无脊椎动物节律性运动控制的机制。该肽的活性可通过体外电生理记录或肌肉收缩实验进行评估。
体内研究 (In Vivo)
CCAP、FMRFamide 和 SALDKNFMRFamide 均可增加蚊子辅助搏动器官 (APO)、心脏收缩率和触角区域的血淋巴流动率 [1]。
在体内,甲壳类心脏活性肽(CCAP)如同心脏的“油门”,调节甲壳类动物和其他节肢动物的心跳和血液循环。它能调节神经元活动,并参与节肢动物(例如十线细足虾)的摄食行为和蜕皮的协调。该肽的体内效应是通过其对心肌细胞和肌肉细胞中G蛋白偶联受体(GPCR)的作用介导的。CCAP常用于无脊椎动物模型的神经生理学和心脏功能研究,以探究神经肽在调节节律性运动模式和行为中的作用。
酶活实验
利用表达CCAP受体的组织(例如甲壳类动物的心脏或肌肉组织)的膜制备物,可以进行无细胞CCAP受体结合分析。典型的实验方案是将放射性标记的CCAP与膜制备物在结合缓冲液中孵育,孵育过程中可加入不同浓度的未标记CCAP。通过过滤或离心分离结合的和游离的配体,并用闪烁计数法测量放射性。结合亲和力(Kd)和受体密度(Bmax)通过Scatchard分析法测定。此外,还可以使用表面等离子共振(SPR)技术研究CCAP与其重组GPCR的相互作用。
细胞实验
在体外细胞实验中,表达CCAP受体的细胞(例如,甲壳类动物心肌或肌肉细胞的原代培养物)在合适的培养基中培养,并用不同浓度的CCAP(通常为1 nM至10 μM)处理。通过测量下游信号通路来评估肽激活其受体的能力,例如使用荧光钙指示剂(例如Fluo-4)检测细胞内钙动员,或使用ELISA或放射免疫分析法检测cAMP积累。处理时间因具体检测方法而异。在电生理研究中,将该肽应用于离体组织标本,并记录肌肉收缩或神经元放电的变化。
动物实验
甲壳类心脏活性肽 (CCAP) 的体内动物实验通常在甲壳类或昆虫模型中进行。常用的实验方案是将肽注射到动物的血淋巴中或直接涂抹于心包器官。利用阻抗心动描记法或视频显微镜等非侵入性技术监测肽对心率、循环和肌肉活动的影响。在行为学研究中,将肽注射到动物体内,观察其摄食行为、运动或蜕皮的变化。剂量和给药途径因物种和具体实验目标而异。
药代性质 (ADME/PK)
甲壳类心脏活性肽 (CCAP) 的分子量为 959.10 g/mol,分子式为 C42H58N10O12S2。作为一种肽类药物,其药代动力学特征是由于蛋白水解降解而迅速从循环系统中清除。该肽通常在临床前研究中采用注射给药,在生物体液中的半衰期较短。冻干形式稳定,应储存于 -20℃。该肽可溶于水性缓冲液,通常在使用前新鲜配制。其药代动力学特性使其适用于急性药理学研究,但不太适合长期给药。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
由于甲壳类心脏活性肽 (CCAP) 是一种天然存在的神经肽,主要用作研究工具,因此其毒性特征尚未得到充分研究。作为一种肽,预计其在药理剂量下毒性较低。然而,由于其在调节心率、循环和肌肉活动方面发挥着重要作用,高剂量可能会引起这些方面的改变。该化合物应按照标准实验室防护措施进行操作,且仅供研究使用。
参考文献

[1]. CCAP and FMRFamide-like peptides accelerate the contraction rate of the antennal accessory pulsatile organs (auxiliary hearts) of mosquitoes. J Exp Biol. 2016 Aug 1;219(Pt 15):2388-95.

[2]. The study of the Bithorax-complex genes in patterning CCAP neurons reveals a temporal control of neuronal differentiation by Abd-B. Biol Open. 2015 Aug 14;4(9):1132-42.

其他信息
甲壳类心脏活性肽 (CCAP) 是一种高度保守的酰胺化环状九肽,其一级结构为 PFCNAFTGC-NH2,Cys3 和 Cys9 之间存在二硫键。它最初是从欧洲绿蟹 (Carcinus maenas) 的心包器官中分离出来的,在甲壳类动物中发挥着调节心跳的作用。CCAP 还能调节其他节肢动物的神经元活动,并作为摄食刺激剂和蜕皮调节剂发挥作用。该肽靶向心肌细胞和肌肉细胞中的 G 蛋白偶联受体 (GPCR),并被广泛用作神经生理学、心脏功能研究和比较生理学的研究工具。CCAP 目前仅作为研究化合物提供,尚未获准用于临床。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C42H58N10O12S2
分子量
959.10
精确质量
958.367
CAS号
309247-84-5
PubChem CID
166638345
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
-3.9
tPSA
347
氢键供体(HBD)数目
14
氢键受体(HBA)数目
15
可旋转键数目(RBC)
26
重原子数目
66
分子复杂度/Complexity
1720
定义原子立体中心数目
9
SMILES
C1C(C[C@H](NC([C@@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC([C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@@H]2CCCN2)=O)C)=O)C(N[C@H](C(NCC(N[C@@H](CS)C(O)=O)=O)=O)[C@@H](C)O)=O)=CC=CC=1
InChi Key
ONSAAPXCOZQERN-HNGYRCOKSA-N
InChi Code
InChI=1S/C42H58N10O12S2/c1-22(35(56)48-28(17-25-12-7-4-8-13-25)39(60)52-34(23(2)53)41(62)45-19-33(55)47-31(21-66)42(63)64)46-37(58)29(18-32(43)54)50-40(61)30(20-65)51-38(59)27(16-24-10-5-3-6-11-24)49-36(57)26-14-9-15-44-26/h3-8,10-13,22-23,26-31,34,44,53,65-66H,9,14-21H2,1-2H3,(H2,43,54)(H,45,62)(H,46,58)(H,47,55)(H,48,56)(H,49,57)(H,50,61)(H,51,59)(H,52,60)(H,63,64)/t22-,23+,26-,27-,28-,29-,30-,31-,34-/m0/s1
化学名
(2R)-2-[[2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-4-oxo-2-[[(2R)-2-[[(2S)-3-phenyl-2-[[(2S)-pyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]butanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]acetyl]amino]-3-sulfanylpropanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~0.67 mg/mL (~0.70 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.0426 mL 5.2132 mL 10.4264 mL
5 mM 0.2085 mL 1.0426 mL 2.0853 mL
10 mM 0.1043 mL 0.5213 mL 1.0426 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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