| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CY2-SE is a fluorescent labeling reagent that targets primary amine groups (-NH2) present in proteins, peptides, and oligonucleotides. The N-hydroxysuccinimidyl (NHS) ester moiety reacts with nucleophilic primary amines under mild alkaline conditions (pH 7-9) to form stable, covalent amide bonds. This reaction mechanism enables the covalent attachment of the Cy2 fluorophore to target biomolecules, facilitating their detection, tracking, and quantification in various experimental systems.
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| 体外研究 (In Vitro) |
方案一：最佳蛋白制备：1）请将蛋白（抗体）浓度配制至 2 mg/mL 以获得标记效果。2）蛋白溶液的 pH 值为 8.5±0.5。3）如果 pH 值低于 8.0，则应使用 1M 蛋白溶液。如果蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率将显著降低。建议最终蛋白浓度范围为 2–10 mg/mL，以获得最佳标记效率。4）伯明翰 2 号溶液必须对蛋白透明。染料的制备（以 CY3-NHS 酯为例）：将 10 倍体积的无水 DMSO 倒入 CY3-NHS 酯小瓶中。反应所需的染料（CY3-NHS 酯）用量取决于 CY3-NHS 与蛋白的理想摩尔比以及标记蛋白的量。例如：假设所需的标记蛋白为 500 μL 浓度为 2 mg/mL 的 IgG（MW=150,000），则将 1 mg CY3-NHS 酯溶解于 100 μL DMSO 中。这样即可得到所需体积的 CY3-NHS 酯，即 5.05 μL。计算步骤如下：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) × mL (IgG)/MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10⁻⁶ mmol 2) mmol (CY3-NHS酯) = mmol (IgG) × 10 = 6.7×10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7 × 10⁻⁵ mmol 3) μL (CY3-NHS酯) = mmol (CY3-NHS酯) × MW (CY3-NHS酯)/mg/μL (CY3-NHS酯) = 6.7 × 10⁻⁵ mmol × 753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL = 5.05 μL (CY3-NHS酯) 4. 执行偶联反应 1：逐步加入新合成的 10将 mg/mL CY3-NHS 酯加入 0.5 mL 蛋白质样品溶液中，轻轻摇晃使其混合均匀，快速离心，并从反应管底部取出样品。2) 在接下来的 60 分钟内，将反应管置于黑暗处并轻轻翻转。10 至 15 分钟后，逐渐逆转反应步骤 5。偶联物：使用 SepHadex G-25 色谱柱，以下方法演示了如何封闭染料-偶联物。1) 根据制造商的指南组装 SepHadex G-25 色谱柱。2) 将反应混合物（来自“运行偶联反应”）填充到 SepHadex G-25 色谱柱中。3) 当样品流出至树脂表面以下时，立即加入 PBS（pH 7.2–7.4）。4) 为完成柱挤出，向相应的样品中加入额外的 PBS（pH 7.2–7.4）。混合含有所需染料-蛋白质偶联物的馏分。
CY2-SE 的激发波长和发射波长最大值分别为 473 nm 和 510 nm。该化合物为结晶固体，纯度≥98%，可溶于 DMF、DMSO 和 DMF:PBS 混合溶剂。作为一种胺反应探针，CY2-SE 可通过 NHS 酯化学反应高效标记靶生物分子上的氨基，形成稳定的共价键。CY2-SE 染料与蛋白质的最佳标记摩尔比约为 10:1。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于CY2-SE具有反应活性的NHS酯化学性质，会非特异性地标记多种蛋白质，因此通常不用于体内应用。该化合物主要用于体外标记纯化的蛋白质、抗体和其他生物分子，以用于下游应用，包括荧光显微镜、流式细胞术、蛋白质印迹法和其他检测方法。
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| 酶活实验 |
CY2-SE标记蛋白质：将蛋白质（抗体）配制成浓度为2 mg/mL的缓冲液，pH值为8.5+/-0.5。将CY2-SE溶解于无水DMF或DMSO中，配制成适当浓度。将染料溶液以约10:1的摩尔比（染料：蛋白质）加入蛋白质溶液中。将反应混合物在室温下轻柔搅拌孵育1-2小时。通过透析、凝胶过滤或尺寸排阻色谱法去除未反应的染料。通过测量280 nm（蛋白质）和486 nm（Cy2）处的吸光度来确定标记效率。
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| 细胞实验 |
CY2-SE 用于体外实验中蛋白质和抗体的标记。将细胞或组织与 CY2-SE 标记的探针孵育，然后通过荧光显微镜或流式细胞术进行检测。对于抗体标记，将纯化的抗体在与蛋白质标记相同的条件下与 CY2-SE 孵育。标记后的抗体随后用于固定细胞或组织切片的免疫荧光染色。对于寡核苷酸标记，将胺基修饰的寡核苷酸在合适的缓冲液中与 CY2-SE 反应。
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| 动物实验 |
由于CY2-SE具有反应活性，因此不适用于体内动物实验。该化合物严格来说是一种体外标记试剂。在动物实验中，可使用预先标记的生物分子（例如，CY2-SE标记的抗体或肽）来追踪其分布或靶点结合情况，但染料本身不会直接注射到动物体内。标记探针通常通过静脉注射或腹腔注射给药，剂量根据具体的实验需求而定。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CY2-SE并非治疗性化合物，其药代动力学数据不适用。该化合物是一种用于体外标记生物分子的研究试剂。一旦与蛋白质或抗体偶联，标记探针的药代动力学将由载体分子而非染料本身决定。CY2-SE不适用于以游离化合物形式进行体内给药。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CY2-SE 是一种胺反应性荧光探针，不适用于治疗用途。由于该化合物仅用作标记试剂而非治疗剂，因此其毒性数据有限。处理 CY2-SE 时应遵循标准实验室安全操作规程，包括使用适当的个人防护装备。该化合物应在通风橱内操作，并避免接触皮肤和眼睛。处置应遵循机构化学废弃物处理指南。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CY2-SE（花菁2琥珀酰亚胺酯）是一种荧光标记试剂，用于蛋白质、肽和寡核苷酸上伯胺的共价修饰。其激发/发射波长最大值分别为473/510 nm。NHS酯基团使其能够在温和条件下高效标记。CY2-SE广泛应用于生物化学研究中的荧光检测和成像。该化合物仅供研究使用，未获准用于诊断或治疗用途。
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| 分子式 |
C29H30IN3O6
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|---|---|
| 分子量 |
643.469480037689
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| 精确质量 |
643.117
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| CAS号 |
186205-33-4
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| PubChem CID |
121596142
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| tPSA |
93.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
11
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
919
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCN\1C2=CC=CC=C2O/C1=C\C=C\C3=[N+](C4=CC=CC=C4O3)CCCCCC(=O)ON5C(=O)CCC5=O.[I-]
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| InChi Key |
RQYPAAVMQSMNBY-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H30N3O6.HI/c1-2-30-21-11-5-7-13-23(21)36-27(30)15-10-16-28-31(22-12-6-8-14-24(22)37-28)20-9-3-4-17-29(35)38-32-25(33)18-19-26(32)34;/h5-8,10-16H,2-4,9,17-20H2,1H3;1H/q+1;/p-1
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| 化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[2-[(E,3Z)-3-(3-ethyl-1,3-benzoxazol-2-ylidene)prop-1-enyl]-1,3-benzoxazol-3-ium-3-yl]hexanoate;iodide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~97.13 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 3.13 mg/mL (4.86 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 31.3mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5541 mL | 7.7704 mL | 15.5407 mL | |
| 5 mM | 0.3108 mL | 1.5541 mL | 3.1081 mL | |
| 10 mM | 0.1554 mL | 0.7770 mL | 1.5541 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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