| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of Cy5 maleimide is thiol groups (-SH) in proteins and peptides, particularly cysteine residues. Its mechanism of action is based on the Michael addition reaction between the maleimide group and the thiolate anion of cysteine under mild conditions (pH 6.5-7.5). This reaction forms a stable thioether bond, covalently attaching the Cy5 fluorophore to the target protein. The Cy5 dye provides bright red/near-infrared fluorescence, which is advantageous for imaging applications due to reduced background autofluorescence in biological samples.
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| 体外研究 (In Vitro) |
制备储备液的最佳方法：1. 蛋白质制备：为获得理想的标记效果，加入 2 mg/mL 的蛋白质（抗体）。蛋白质溶液的理想 pH 值为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，则使用 1 M 二氧化碳。2) 蛋白质浓度低于 2 mg/mL 会导致标记效率显著降低。最终，建议使用 2–10 mg/mL 的蛋白质浓度范围以获得最佳标记效率。3) 为确保最大标记效率，蛋白质需要溶于含有铵离子和伯胺的透明缓冲液中，例如 Tris 或甘氨酸。2. 染料制备：通过加入无水 DMSO 制备 10 mM 的 CY 染料储备液。使用玻璃管或涡旋振荡器充分混匀。分装后，CY 储存液应避光保存在 -20°C 或 -80°C。 3. 染料工作液的用量 标记反应所需的CY染料用量取决于待标记蛋白的量。CY染料与蛋白的理想比例如下：假设标记蛋白需要500 μL浓度为2 mg/mL的IgG（分子量=150,000）。那么，将含有1 mg CY染料的试管溶解于100 μL DMSO中。这意味着需要3.95 μL的CY染料溶液。以CY3-NHS酯为例，详细计算过程如下：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) × mL (IgG) / MW (IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7 × 10⁻⁶ mmol 2) mmol (CY3-NHS酯) = mmol (IgG) × 10 = 6.7 × 10⁻⁶ mmol × 10 = 6.7 × 10⁻⁵ mmol 3) μL (CY3-NHS酯) = mmol (CY3-NHS酯) × MW (CY3-NHS酯) / mg/μL (CY3-NHS酯) = 6.7 × 10⁻⁵ mmol × 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 3.95 μL (CY3-NHS酯) 使用方法：1. 首先，标记反应物。将 0.5 mL 蛋白质样品溶液加入到计算体积的含有 10 mg/mL CY 染料的新鲜载体中。轻轻摇晃混合物使其充分混合，然后迅速收集离心后的样品至反应管底部。2) 请勿复制：将反应管置于黑暗处，轻轻摇晃，并在初始条件下静置 60 分钟。您还应轻轻地将反应管翻转数次。2. 以 SepHadex G-25 柱封闭的染料偶联物为例，以下方案涉及蛋白质封闭和脱盐。1) 按照制造商的说明制备 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物加满 SepHadex G-25 柱。当样品低于顶部树脂表面时，应加入 PBS（pH 7.2–7.4）。4) 为完成柱收缩，立即向目标样品中加入更多 PBS（pH 7.2–7.4）。将含有所选蛋白质-染料组合的成分混合。
在体外，Cy5 马来酰亚胺是一种硫醇反应性花菁类荧光试剂，用于共价标记蛋白质和肽中的半胱氨酸残基。它能发出红色/近红外荧光，适用于成像和基于荧光的检测。该染料可用于流式细胞术和其他标记技术。它是一种高灵敏度的花菁染料，可用于检测天然蛋白质提取物中的游离硫醇。其长波长、可调节的吸收和发射、高消光系数和良好的水溶性是花菁染料的特征。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于Cy5马来酰亚胺是一种标记试剂，因此通常不研究其体内活性。然而，Cy5标记的蛋白质或肽可用于体内成像应用。Cy5的红色/近红外荧光使其能够进行深层组织成像，并降低背景自发荧光。这使其成为研究活体动物体内蛋白质分布、肿瘤靶向和其他生物学过程的宝贵工具。
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| 酶活实验 |
使用 Cy5 马来酰亚胺进行体外酶/受体结合（非细胞）检测通常需要用该染料标记蛋白质或肽。蛋白质标记的标准流程如下：将蛋白质溶解于缓冲液（例如，pH 7.4 的 PBS）中，并用还原剂（例如，TCEP）处理以还原二硫键。向蛋白质溶液中加入 Cy5 马来酰亚胺，并将反应混合物在室温下避光孵育 1-2 小时。标记后的蛋白质通过透析或尺寸排阻色谱法纯化。标记程度通过测量 650 nm（Cy5）和 280 nm（蛋白质）处的吸光度来确定。
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| 细胞实验 |
使用Cy5马来酰亚胺的体外细胞检测通常涉及标记细胞表面或细胞内蛋白。标准流程如下：收集细胞，并在4°C下用PBS缓冲液孵育30-60分钟，其中含有Cy5马来酰亚胺标记的抗体或其他蛋白。洗涤细胞以去除未结合的探针，然后通过流式细胞术进行分析。测得的荧光强度对应于目标蛋白的表达水平。或者，也可以使用标记的蛋白进行免疫荧光显微镜观察目标蛋白。
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| 动物实验 |
用于体内动物实验的Cy5马来酰亚胺通常并非针对化合物本身，而是针对Cy5标记的生物分子。Cy5标记抗体的成像标准方案如下：将标记抗体静脉注射到小鼠体内。在不同时间点，使用配备适用于Cy5的激发和发射滤光片（激发波长约650 nm，发射波长约670 nm）的体内成像系统对动物进行成像。荧光信号用于追踪抗体在肿瘤或其他组织中的分布和积累。这种方法广泛应用于癌症研究和药物开发。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Cy5马来酰亚胺的药代动力学性质并非本研究的主要重点。该化合物是一种反应性标记试剂，通常用于体外实验。一旦与生物分子偶联，偶联物的药代动力学性质将由生物分子而非染料决定。该化合物通常储存在-20°C的避光条件下。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cy5马来酰亚胺的毒性数据有限。作为一种荧光染料，在标记浓度下，其毒性通常被认为较低。然而，与所有化学试剂一样，处理该化合物时应采取适当的安全预防措施。应避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物不适用于人体。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Cy5 马来酰亚胺是一种硫醇反应性花菁类荧光染料，用于半胱氨酸残基的共价标记。它能发出红色/近红外荧光，可用于成像和检测。它可用于标记蛋白质和肽。它并非药物，目前没有临床用途或获得批准。该产品仅供科研用途，可从化学品供应商处购买。
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| 分子式 |
C38H45CLN4O3
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|---|---|
| 分子量 |
641.2419
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| 精确质量 |
640.318
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| CAS号 |
1437796-65-0
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| 相关CAS号 |
1437872-46-2 (without anion);1437796-65-0 (chloride);
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| PubChem CID |
91757870
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| 外观&性状 |
Brown to dark brown solid powder
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| tPSA |
72.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
46
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| 分子复杂度/Complexity |
1270
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[Cl-].O=C(CCCCCN1C2=CC=CC=C2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C=C/C1C(C)(C)C2=CC=CC=C2[N+]=1C)NCCN1C(C=CC1=O)=O
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| InChi Key |
IATQCUIJHBSCGA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C38H44N4O3.ClH/c1-37(2)28-16-11-13-18-30(28)40(5)32(37)20-8-6-9-21-33-38(3,4)29-17-12-14-19-31(29)41(33)26-15-7-10-22-34(43)39-25-27-42-35(44)23-24-36(42)45;/h6,8-9,11-14,16-21,23-24H,7,10,15,22,25-27H2,1-5H3;1H
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| 化学名 |
6-[(2E)-3,3-dimethyl-2-[(2E,4E)-5-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)penta-2,4-dienylidene]indol-1-yl]-N-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)ethyl]hexanamide;chloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~194.93 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5595 mL | 7.7974 mL | 15.5948 mL | |
| 5 mM | 0.3119 mL | 1.5595 mL | 3.1190 mL | |
| 10 mM | 0.1559 mL | 0.7797 mL | 1.5595 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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