Cy5 maleimide

目录号: V46073 纯度: ≥98%
Cy5马来酰亚胺是一种CY染料。
Cy5 maleimide CAS号: 1437796-65-0
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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产品描述
Cy5马来酰亚胺是一种CY染料。 CY是Cyanine的缩写,是由两个氮原子通过奇数个甲基单元连接而成的化合物。花青类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高、水溶性好、合成相对简单等特点。 CY 染料通常用于标记蛋白质、抗体和小分子化合物。对于标记蛋白抗体来说,通过简单的混合反应即可完成结合。下面我们介绍一下蛋白质抗体标记的标记方法,具有一定的参考意义。 。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
配制原液的最佳方法 1. 蛋白制备:为了获得理想的标记效果,添加 2 mg/mL 的蛋白(抗体)。蛋白质溶液的理想pH值为8.5±0.5。如果 pH 值小于 8.0,请使用 1 M 二氧化碳。 2) 蛋白质浓度低于2 mg/mL将导致标记效率显着降低。最后,建议使用 2–10 mg/mL 的蛋白质浓度范围,以达到最佳的标记效率。 3) 为了确保最大的标记效率,蛋白质需要处于含有铵离子和伯胺(如 Tris 或甘氨酸)的透明缓冲液中。 2. 染料制备:添加无水 DMSO,制成 10 mM CY 染料储备液。使用玻璃管或涡旋器充分混合。 CY储存液分装后应在-20°C或-80°C避光保存。 3. 染料工作液的量 标记反应所需CY染料的量由已标记的蛋白质的量决定。 CY 染料和蛋白质的理想比例如下:假设标记蛋白质需要 500 μL 2 mg/mL IgG (MW = 150,000)。然后,将含有 1 mg CY 染料的管溶解在 100 μL DMSO 中。这意味着需要 3.95 μL 的 CY 体积。以CY3-NHS酯为例,详细计算过程如下: 1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) = 2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol = 6.7×10-6 mmol 2) mmol (CY3-NHS酯) = mmol (IgG) ×10 = 6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol 3) μL (CY3-NHS酯) = mmol (CY3-NHS 酯) ×MW (CY3-NHS 酯) / mg/μL (CY3-NHS 酯) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 3.95 μL (CY3-NHS 酯) -NHS 酯) 使用方法 1. 首先,将 0.5 mL 蛋白质样品溶液添加到计算体积的含有 10 mg/mL CY 染料的新鲜载体中,标记反应。轻轻摇动混合物使其混合,然后将离心后的样品快速收集到反应管底部。 2)不复制:将反应管置于暗处,轻轻摇动,在初始条件下步行60分钟。您还应该轻轻翻转反应管数次,以 2. 以 SepHadex G-25 柱封闭染料缀合物为例,接下来的方案涉及蛋白质封闭和脱盐。 1) 按照制造商的指示准备 SepHadex G-25 柱。 2) 用反应混合物将 SepHadex G-25 柱填充至边缘。当样品浸入顶部树脂表面以下时,应添加 PBS(pH 7.2–7.4)。 4) 为了完成柱状收缩,立即向目标样品中添加更多 PBS (pH 7.2–7.4)。混合含有所选蛋白质-染料组合的成分。
参考文献

[1]. Cy5 maleimide labelling for sensitive detection of free thiols in native protein extracts: identification of seed proteins targeted by barley thioredoxin h isoforms. Biochem J. 2004 Mar 1;378(Pt 2):497-507.

[2]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108.

[3]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C38H45CLN4O3
分子量
641.2419
精确质量
640.318
CAS号
1437796-65-0
相关CAS号
1437872-46-2 (without anion);1437796-65-0 (chloride);
PubChem CID
91757870
外观&性状
Brown to dark brown solid powder
tPSA
72.7
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
12
重原子数目
46
分子复杂度/Complexity
1270
定义原子立体中心数目
0
SMILES
[Cl-].O=C(CCCCCN1C2=CC=CC=C2C(C)(C)/C/1=C/C=C/C=C/C1C(C)(C)C2=CC=CC=C2[N+]=1C)NCCN1C(C=CC1=O)=O
InChi Key
IATQCUIJHBSCGA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C38H44N4O3.ClH/c1-37(2)28-16-11-13-18-30(28)40(5)32(37)20-8-6-9-21-33-38(3,4)29-17-12-14-19-31(29)41(33)26-15-7-10-22-34(43)39-25-27-42-35(44)23-24-36(42)45;/h6,8-9,11-14,16-21,23-24H,7,10,15,22,25-27H2,1-5H3;1H
化学名
6-[(2E)-3,3-dimethyl-2-[(2E,4E)-5-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)penta-2,4-dienylidene]indol-1-yl]-N-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)ethyl]hexanamide;chloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~194.93 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5595 mL 7.7974 mL 15.5948 mL
5 mM 0.3119 mL 1.5595 mL 3.1190 mL
10 mM 0.1559 mL 0.7797 mL 1.5595 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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