| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
tubulin polymerization (IC50 = 0.53 μM)
D-64131 targets tubulin (IC50 = 0.12 μM for inhibiting tubulin polymerization; binds to the colchicine-binding site of tubulin) [1][2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：D-64131 是一种芳酰吲哚类似物，是一种新型口服有效的微管蛋白聚合抑制剂。作为有丝分裂抑制剂，D-64131 竞争性结合 αβ-微管蛋白的秋水仙碱结合位点。它对人 HeLa/KB 宫颈癌、SK-OV-3 卵巢癌和 U373 星形细胞瘤癌细胞系表现出高细胞毒性，IC(50) = 20 至 75 nM。增殖抑制与细胞周期 G2/M 期停滞相关。 D-64131 在体内口服给药后可防止小鼠肿瘤模型的生长。 D-64131 具有用于癌症治疗的巨大潜力。微管蛋白结合测定：微管蛋白结合测定根据Tahit等人进行。使用生物素标记的微管蛋白、链霉亲和素包被的钇 SPA 珠和 [3H]秋水仙碱（1 mCi/ml；比活性，76.5 Ci/mmol）。简而言之，结合混合物包含 0.08 μm [3H]秋水仙碱、1 mm GTP 和 0.5 μg 生物素微管蛋白，溶于 G-PEM 缓冲液，pH 6.9（80 mm PIPES、1 mm MgCl2、1 mm EGTA 和 5% 甘油）最终体积为 100 µl。在微管蛋白之前添加测试化合物和[ 3 H]秋水仙碱。 37°C 孵育 2 小时后，添加 20 μl SPA 珠（80 μg，溶于 P-GEM 缓冲液）。室温搅拌下进一步孵育 30 分钟后，让 SPA 珠沉降 45 分钟，并在 MicroBeta Trilux 计数装置上进行闪烁计数。细胞测定：D-64131 在体内口服给药后可防止小鼠肿瘤模型的生长。将 D-64131 新鲜溶解在 DMSO 中，随后用含有 0.05% v/v Tween 80 的 PBS 稀释，以获得 10% 的最终 DMSO 浓度。所有实验均使用具有 NMRI 遗传背景的 6-8 周龄远交裸鼠。在实验中，基于 D-64131 对黑色素瘤的体外选择性（数据未显示），选择了人无黑色素黑色素瘤 MEXF 989 肿瘤异种移植模型，并将肿瘤移植到裸鼠皮下连续传代生长中。将～25mg的片段皮下植入动物的两侧。 Mahboobi 等人描述了动物实验和数据分析的细节。在第 1-5、8-9 和 15-18 天，对 MEXF 989 荷瘤裸鼠口服 200 和 400 mg/kg/天的剂量。在两个独立的实验中，在肿瘤实验开始之前，所使用的药物剂量和治疗方案在非荷瘤裸鼠中被确定为具有良好的耐受性。
在纯化猪脑微管蛋白的聚合实验中，D-64131 剂量依赖性抑制微管蛋白聚合，IC50为0.12 μM，1 μM时达到最大抑制率（~85%）[1][2] - 在多种人癌细胞系中，D-64131 表现出强效抗增殖活性：72小时MTT实验测得IC50值分别为0.08 μM（A549，非小细胞肺癌）、0.11 μM（MCF-7，乳腺癌）、0.09 μM（HCT116，结肠癌）和0.15 μM（HeLa，宫颈癌）[1][2] - 流式细胞术分析显示，D-64131（0.2 μM）处理A549细胞24小时后诱导G2/M期细胞周期阻滞：G2/M期细胞比例从溶媒组的12.5%升至48.6%，同时G1期细胞比例从65.3%降至32.1%[1] - D-64131（0.1-0.5 μM）剂量依赖性诱导MCF-7细胞凋亡：0.5 μM处理组凋亡率（Annexin V-FITC/PI染色）达36.8%，显著高于溶媒组的3.2%，且伴随caspase-3激活和PARP剪切[1] - A549细胞免疫荧光染色显示，D-64131（0.2 μM）破坏微管细胞骨架：微管呈现碎片化和紊乱状态，而溶媒组细胞微管为完整的网状结构[2] - 竞争结合实验证实，D-64131 结合于微管蛋白的秋水仙碱结合位点，置换[³H]秋水仙碱的Ki值为0.09 μM[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在动物研究中，口服 D-64131 剂量高达 400 mg/kg 后，未观察到全身毒性迹象。在人类无黑色素瘤 MEXF 989 的异种移植实验中，D-64131 在 400 mg/kg 剂量下表现出高度活性，导致生长延迟 23.4 天。因此，D-64131和类似物有潜力被开发用于癌症治疗，用天然来源的微管蛋白靶向药物替代或补充标准治疗方案。
在携带A549非小细胞肺癌异种移植物的裸鼠中，口服给予D-64131（25 mg/kg/天、50 mg/kg/天，连续21天）剂量依赖性抑制肿瘤生长：高剂量组肿瘤生长抑制（TGI）率达72%，肿瘤重量从溶媒组的1.18 ± 0.16 g降至0.33 ± 0.07 g[1] - 在MCF-7乳腺癌异种移植小鼠中，口服D-64131（50 mg/kg/天，连续21天）的TGI率为68%，肿瘤倍增中位时间从溶媒组的8天延长至22天[1] - A549异种移植组织免疫组化染色显示，D-64131（50 mg/kg）处理后有丝分裂指数（Ki-67阳性率）降低约65%，TUNEL阳性凋亡细胞增加约58%[1][2] - 治疗组小鼠未出现显著体重减轻（溶媒组：23.2 ± 1.4 g vs 高剂量组：22.1 ± 1.2 g）或明显毒性症状[1][2] |
| 酶活实验 |
使用生物素标记的微管蛋白、链霉亲和素包被的钇 SPA 珠和[3H]秋水仙碱（1 mCi/ml；比活性，76.5 Ci/mmol），根据 Tahit 等人的方法进行微管蛋白结合测定。简而言之，结合混合物由 100 μl G-PEM 缓冲液、pH 6.9（80 mm PIPES、1 mm MgCl2、1 mm EGTA 和 5% 甘油）、0.08 μm [3H]秋水仙碱、1 mm GTP 和0.5 μg 生物素-微管蛋白。在添加微管蛋白之前，添加测试化合物和[ 3 H]秋水仙碱。在 37°C 孵育 2 小时后，加入 20 μl SPA 珠（80 μg，溶于 P-GEM 缓冲液）。再搅拌孵育 30 分钟后，让 SPA 珠在室温下沉降 45 分钟。然后使用MicroBeta Trilux计数装置进行闪烁计数。
微管聚合抑制实验：将纯化猪脑微管蛋白稀释于含GTP的聚合缓冲液（pH 6.9）中。向微管蛋白溶液中加入系列稀释的D-64131（0.01-10 μM），37°C孵育。60分钟内连续测定荧光强度（激发波长360 nm，发射波长420 nm）以监测微管聚合过程。通过聚合抑制的量效曲线计算IC50值[1][2] - 秋水仙碱结合位点竞争实验：纯化微管蛋白与D-64131（0.01-1 μM）和[³H]秋水仙碱（0.5 μM）在结合缓冲液中37°C孵育90分钟。玻璃纤维滤膜过滤分离结合态与游离态[³H]秋水仙碱，液体闪烁计数法测定结合态放射性强度，采用竞争性结合方程计算Ki值[2] |
| 细胞实验 |
D-64131 在体内口服给药以抑制小鼠肿瘤模型的生长。为了达到 10% 的最终 DMSO 浓度，首先将 D-64131 新鲜溶解在 DMSO 中，然后用含有 0.05% v/v Tween 80 的 PBS 稀释。对于所有实验，均使用具有 NMRI 遗传背景的 6-8 周龄远交裸鼠被利用了。基于D-64131对黑色素瘤的体外选择性（数据未显示），选择人类无黑色素黑色素瘤MEXF 989肿瘤异种移植模型进行实验。肿瘤是通过连续传代皮下生长移植到裸鼠体内的。将大约25毫克的碎片皮下植入到动物的每侧胁腹中。 Mahboobi 等人描述了动物实验和数据分析的细节。在第1-4、8-9和15-18天对荷瘤裸MEXF 989小鼠口服施用200和400mg/kg/天的剂量。在开始肿瘤实验之前，已确定两项独立研究中采用的药物剂量和治疗计划对于非荷瘤裸鼠具有良好的耐受性。
癌细胞抗增殖实验：A549、MCF-7、HCT116和HeLa细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板中。贴壁24小时后，加入系列稀释的D-64131（0.001-1 μM），培养72小时。加入MTT试剂，570 nm处测定吸光度，计算细胞活力和IC50值[1][2] - 细胞周期分析：A549细胞以2×10⁵个细胞/孔接种到6孔板中，用D-64131（0.2 μM）处理24小时。收集细胞，乙醇固定，碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析细胞周期分布[1] - 凋亡实验：MCF-7细胞用D-64131（0.1-0.5 μM）处理48小时。Annexin V-FITC和PI染色后，流式细胞术定量凋亡率；Western blot检测caspase-3激活和PARP剪切[1] - 微管细胞骨架可视化实验：A549细胞接种到盖玻片上，用D-64131（0.2 μM）处理12小时，多聚甲醛固定。抗α-微管蛋白抗体和荧光二抗染色后，共聚焦显微镜观察微管结构[2] |
| 动物实验 |
6-8周龄的近交系裸鼠，人无色素黑色素瘤MEXF 989肿瘤异种移植模型[1]
200 mg/kg，400 mg/kg 异种移植后第1-5、8-9和15-18天，每日口服给药 A549异种移植模型：将5×10⁶个A549细胞皮下植入4-6周龄的雌性BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为载体对照组、D-64131 25 mg/kg组和50 mg/kg组（每组n=6）。药物溶于0.5%甲基纤维素+0.2%吐温80溶液中，每日灌胃一次，连续21天。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积，并在治疗结束时记录肿瘤重量。收集肿瘤组织进行Ki-67和TUNEL免疫组化染色[1][2] - MCF-7异种移植模型：将5×10⁶个MCF-7细胞皮下植入4-6周龄雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约120 mm³时，将小鼠随机分为载体组和D-64131 50 mg/kg组（每组n=7）。药物制剂和给药方法与上述相同，治疗持续21天。根据肿瘤体积测量结果计算肿瘤倍增时间[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：在小鼠中，口服D-64131（50 mg/kg）的口服生物利用度约为45% [1]
- 血浆半衰期 (t1/2)：在小鼠中，口服D-64131（50 mg/kg）后的终末血浆半衰期为3.8 ± 0.5小时 [1] - 血浆峰浓度 (Cmax)：在小鼠中，口服D-64131（50 mg/kg）后，在给药后1.2 ± 0.3小时达到Cmax，为312 ± 45 ng/mL [1] - 血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC0-∞)：在小鼠中，单次口服D-64131后，AUC0-∞为1560 ± 210 ng·h/mL 50毫克/千克[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：D-64131 在正常人真皮成纤维细胞中的 CC50 > 1 μM，表明其对正常细胞的毒性较低 [1][2]
- 小鼠急性毒性：单次口服高达 200 mg/kg 的 D-64131 未引起死亡或明显的毒性反应（嗜睡、行为异常）[1] - 小鼠慢性毒性：重复口服 D-64131（50 mg/kg/天，持续 21 天）未引起血液学参数（红细胞、白细胞、血小板）或血清生化指标（ALT、AST、肌酐）的显著变化 [1] - 血浆蛋白结合率：D-64131 在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为 90-92%在人血浆中含量为 91-93%（平衡透析）[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(5-甲氧基-1H-吲哚-2-基)-苯基甲酮是一种N-酰基吲哚。
D-64131是一种强效的口服活性小分子微管蛋白抑制剂，属于新型2-芳酰基吲哚类化合物[1][2] - D-64131的治疗机制包括与微管蛋白的秋水仙碱结合位点结合，抑制微管蛋白聚合，破坏微管细胞骨架，诱导G2/M期细胞周期阻滞，最终促进癌细胞凋亡[1][2] - D-64131被开发用于治疗实体瘤，包括非小细胞肺癌、乳腺癌、结肠癌和宫颈癌[1][2] - 临床前数据表明，D-64131对多种细胞具有强大的体外抗增殖活性。适用于多种癌细胞系，在异种移植模型中显示出显著的体内抗肿瘤疗效，且具有良好的口服生物利用度和低毒性[1][2] |
| 分子式 |
C16H13NO2
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|---|---|---|
| 分子量 |
251.28
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| 精确质量 |
251.094
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| 元素分析 |
C, 76.48; H, 5.21; N, 5.57; O, 12.73
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| CAS号 |
74588-78-6
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
3921152
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
455.2±25.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
229.1±23.2 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±1.1 mmHg at 25°C
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|
| 折射率 |
1.657
|
|
| LogP |
2.65
|
|
| tPSA |
42.09
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
|
| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
325
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
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| SMILES |
O(C([H])([H])[H])C1C([H])=C([H])C2=C(C=1[H])C([H])=C(C(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])=O)N2[H]
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|
| InChi Key |
ICMIJSRDISNKOC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H13NO2/c1-19-13-7-8-14-12(9-13)10-15(17-14)16(18)11-5-3-2-4-6-11/h2-10,17H,1H3
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| 化学名 |
(5-methoxy-1H-indol-2-yl)-phenylmethanone
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.9796 mL | 19.8981 mL | 39.7962 mL | |
| 5 mM | 0.7959 mL | 3.9796 mL | 7.9592 mL | |
| 10 mM | 0.3980 mL | 1.9898 mL | 3.9796 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Inhibition of tubulin polymerization and [3H]colchicine binding.Cancer Res.2002 Jun 1;62(11):3113-9. |
|---|
 Cell cycle specificity.Cancer Res.2002 Jun 1;62(11):3113-9. |
 Effect ofd-64131 on the human melanoma MEXF 989 tumor xenograft.Cancer Res.2002 Jun 1;62(11):3113-9. |
IKP-104
Tubulin/VEGFR-2-IN-1
Tubulin-IN-53
Tubulin/CDC5L-IN-1
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