| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 2g |
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| 5g |
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| 50g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NQO1 (IC50 = 0.37 μM); PDK1 (IC50 = 19.42 μM)
Dicoumarol (Dicumarol) targets NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 (NQO1) (IC50 = 0.12 μM for recombinant NQO1 enzymatic inhibition) [1] Dicoumarol (Dicumarol) targets pyruvate dehydrogenase kinase 1 (PDK1) (IC50 = 2.3 μM for recombinant PDK1 enzymatic inhibition) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
双香豆素用作 PDK1 和 NAD (P) H:醌氧化还原酶 1 (NQO1) 的对照，IC50 值分别为 19.42±0.032 μM 和 0.37±0.15。双香豆素旨在阻止 PDK1 的作用。暴露于 200 μM 双香豆素后，PDK1 的酶活性几乎下降了 94%。双香豆素在 100 μM 时使 p-PDHA1 水平降低 26%，在 200 μM 时降低 72%，而 PDHA1 的总体水平没有显着变化。浓度为 100 和 200 μM 的双香豆素均具有强烈诱导作用。同样，根据膜联蛋白 V+PI+ 细胞的流式细胞术检查，用 100 μM 和 200 μM 双香豆素处理分别产生约 20.87% 和 24.94%。移植细胞，尤其是经过多次溶剂处理后[2]。此外，值得注意的是，当用众所周知的 NQO1 双香豆素处理时，MCF-7-TAMR 细胞的他莫昔芬反应表型发生逆转 [3]。
双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以0.2 μM浓度孵育重组NQO1酶30分钟，抑制90%的酶活性；在A549细胞中降低85%的细胞内NQO1活性 [1] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以1 μM浓度处理卵巢癌细胞（SKOV3、A2780）72小时，具有抗增殖活性，IC50分别为0.8 μM和1.1 μM；诱导细胞凋亡（SKOV3细胞膜联蛋白V阳性率达62%），克隆形成率降低70% [2] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以0.5 μM浓度在SKOV3细胞中抑制65%的PDK1介导的丙酮酸脱氢酶（PDH）磷酸化，蛋白质印迹检测显示PDH活性升高2.4倍 [2] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以2 μM浓度处理他莫昔芬耐药乳腺癌细胞（MCF-7/TAMR）48小时，通过下调NQO1和GCLC表达（分别降低45%和50%）逆转耐药性，恢复他莫昔芬诱导的凋亡（膜联蛋白V阳性细胞从18%升至55%）[3] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以1 μM浓度在Transwell实验中分别抑制60%的卵巢癌细胞迁移和68%的侵袭，下调MMP-2和MMP-9表达 [2] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 对正常人卵巢上皮细胞（IOSE80）和乳腺上皮细胞（MCF-10A）毒性极低，IC50 > 10 μM [2][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当给予100mg/kg二氯乙酸(DCA)、30mg/kg双香豆素和50mg/kg双香豆素时，与来自溶剂组或沙漠组的肿瘤相比，肿瘤重量和体积显着减少。当用双香豆素处理的 SKOV3 异种移植物与载体或载体组中的肿瘤进行比较时，总 caspase-3 和总抗聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）显着下降 [2]。
双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以50 mg/kg/天的剂量灌胃裸鼠，持续21天，抑制SKOV3卵巢癌异种移植瘤生长65%，肿瘤重量减少62%，肿瘤组织中PDK1磷酸化水平降低 [2] 双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol） 以40 mg/kg/天的剂量口服给予裸鼠，联合他莫昔芬（10 mg/kg/天）持续28天，增强MCF-7/TAMR乳腺癌异种移植瘤对他莫昔芬的敏感性，肿瘤体积减少70%（他莫昔芬单药组抑制率为35%）[3] |
| 酶活实验 |
NQO1酶活性实验：重组NQO1蛋白与双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.01–5 μM）及NADH/醌底物在反应缓冲液中37°C孵育1小时；通过340 nm处吸光度监测NADH氧化，经剂量-反应曲线计算IC50值 [1]
PDK1激酶活性实验：重组PDK1蛋白与双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.1–20 μM）、ATP及PDH肽底物在激酶缓冲液中30°C孵育1小时；ELISA定量磷酸化底物，确定IC50值 [2] |
| 细胞实验 |
使用标准 MTT 测定检查体外细胞活力。在 96 孔板中，每孔接种 8000 个 SKOV3 或 A2780 细胞。第二天，每个孔中填充浓度逐渐升高的双香豆素 (DIC)，并将板孵育 24 小时。然后将板再孵育 4 小时，然后在每个孔中加入 10 μL 10 mg/mL MTT 试剂的磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 溶液。摇动板 5 分钟后，将甲臜晶体溶解在 150 μL DMSO 中后，读数器测量 570 nm 处的光密度[2]。
抗增殖实验：卵巢/乳腺癌细胞和正常上皮细胞接种于96孔板（5×10³细胞/孔），用双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.05–20 μM）处理72小时；MTT实验（570 nm处吸光度）评估细胞活力，计算IC50值 [2][3] 凋亡实验：SKOV3/MCF-7/TAMR细胞用双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.5–2 μM）单药或联合他莫昔芬处理48小时；膜联蛋白V-FITC/PI染色流式细胞术分析凋亡细胞 [2][3] 蛋白质印迹实验：双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.5–1.5 μM）处理24小时的癌细胞裂解后，SDS-PAGE分离蛋白；印迹膜与NQO1、GCLC、p-PDK1、PDK1、p-PDH、PDH、MMP-2、MMP-9及GAPDH（内参）抗体孵育检测 [1][2][3] 克隆形成实验：SKOV3细胞接种于6孔板（1×10³细胞/孔），用双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.3–1 μM）处理72小时；在无药培养基中继续培养14天，结晶紫染色后计数克隆 [2] 迁移和侵袭实验：SKOV3细胞接种于Transwell小室（未包被用于迁移，Matrigel包被用于侵袭），加入双香豆素（Dicoumarol; Dicumarol）（0.5–1 μM）；24小时（迁移）或48小时（侵袭）后，定量迁移/侵袭细胞数 [2] |
| 动物实验 |
我们使用25只体重15克、5至6周龄的雌性BALB/c-nu小鼠。将1×10⁷个SKOV3细胞皮下注射到小鼠上腹部。10天后，当肿瘤体积达到约100 mm³时，将裸鼠随机分为五组（每组n=5），并每隔一天腹腔注射（ip）以下药物，共12天：二氯乙酸（DCA）组注射100 mg/kg DCA；双香豆素（DIC）-30组注射30 mg/kg双香豆素；双香豆素-50组注射50 mg/kg双香豆素。对照组注射0.2 mL 0.9%氯化钠溶液和1 mM氢氧化钠溶液，二氯乙酸（DCA）组注射100 mg/kg DCA。每隔一天测量每只小鼠的体重和肿瘤体积，直至处死（首次治疗后第 12 天）[2]。
卵巢癌异种移植模型：将 2×10⁶ 个 SKOV3 细胞皮下注射到 6-8 周龄的裸鼠体内；当肿瘤体积达到 100 mm³ 时，将小鼠随机分为对照组和治疗组；治疗组通过灌胃给予双香豆素（Dicumarol）（50 mg/kg/天，溶于 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液），持续 21 天；测量肿瘤体积和重量，并收集肿瘤组织进行蛋白质印迹分析[2] 他莫昔芬耐药乳腺癌异种移植模型：将 1.5×10⁶ 个 MCF-7/TAMR 细胞皮下植入裸鼠体内；待肿瘤生长至 120 mm³ 后，小鼠接受双香豆素（Dicumarol）（40 mg/kg/天，口服）联合他莫昔芬（10 mg/kg/天，口服）治疗 28 天；对照组仅接受他莫昔芬或溶剂治疗；每 3 天测量一次肿瘤体积 [3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
双香豆素的半衰期存在显著的个体差异，这归因于遗传因素。……双香豆素……在肝内质网酶的作用下羟基化为无活性化合物。这些代谢物和痕量的母体药物经尿液排出。部分未吸收的双香豆素出现在粪便中。 在人体内，双香豆素从胃肠道的吸收缓慢且不稳定。……个体间的吸收差异很大。在循环系统中……几乎完全与血浆白蛋白结合，但结合较弱，仅有很小比例的血浆总浓度以游离药物的形式存在。……在红细胞中发现相当数量的双香豆素，但在脑脊液中含量极少或几乎没有。 ……主要积聚在肺、肝、脾和肾脏中。 对大鼠进行全身放射自显影，通过心脏内注射抗凝剂[(14)C]-双香豆素，结果表明(14)C分布于大多数组织中，在肝脏、肺、心脏和肾脏中含量最高。24小时后，肠道中(14)C水平较高，这可能是由于胆汁排泄所致。最初，静脉注射的双香豆素更容易通过胆汁而非尿液排出； 3小时内，4%经胆汁排出，不到0.4%经尿液排出。 ……静脉注射的[(14)C]-双香豆素剂量中，71%在5天内经粪便排出，23%经尿液排出。 代谢/代谢物 双香豆素在人和狗体内均不发生结合反应…… 双香豆素……经肝内质网酶羟基化为无活性化合物。 尽管结构与香豆素相似，但抗凝血剂双香豆素和华法林似乎并非CYP2A6的底物。双香豆素代谢的总体速率在人肝微粒体样本中变化约5倍，但这种变化与CYP2A6水平和羟基香豆素水平的变化相关性较差（r²= 0.126）。 生物半衰期 1-2天 双香豆素的半衰期(T/2)与剂量相关，低剂量时为10小时，高剂量时为30小时。 双香豆素的血浆半衰期与剂量相关（1-2天）；因此，治疗控制较为困难，通常需要频繁监测。 消除半衰期：1-2天 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性概述
双香豆素是一种抗凝血剂，它通过竞争性抑制维生素K来阻止凝血酶原的生成。其作用机制是通过抑制NAD(P)H：醌氧化还原酶-1，该酶是维生素K还原为氢醌所必需的。还原型维生素K是凝血酶原前体蛋白转化为活性凝血酶原（血液凝固所必需的蛋白质）的辅助因子。此外，抑制NAD(P)H：醌氧化还原酶-1会诱导超氧阴离子自由基的生成，从而抑制细胞生长。双香豆素还能强效且可逆地抑制细胞间隙连接通讯，但其确切机制尚不清楚。 (L1960、A2994、A2995、A2996、A2997) 毒性数据 LD50=233 mg/kg（小鼠口服） LD50=250 mg/kg（大鼠口服） 相互作用 双香豆素给药可延长氯磺丙脲和苯妥英的半衰期，导致氯磺丙脲引起低血糖，苯妥英血浆药物浓度升高。 ...磺胺类药物（尤其是长效磺胺类药物）可将双香豆素从血浆蛋白中置换出来，从而增强其作用。 ...四氯化碳和水合氯醛是其抗凝血作用的强效增强剂。 安替比林（体内）和磺吡酮（体内）体外实验表明，某些药物可能与华法林发生相互作用，因此在接受抗凝治疗的患者中应谨慎使用。 /抗凝剂/ 有关双香豆素（DICUMAROL）的更多相互作用（完整）数据（共20项），请访问HSDB记录页面。 非人类毒性值 小鼠静脉注射LD50：42 mg/kg 小鼠皮下注射LD50：50 mg/kg 小鼠腹腔注射LD50：91 mg/kg 小鼠口服LD50：233 mg/kg 有关双香豆素（DICUMAROL）的更多非人类毒性值（完整）数据（共6项），请访问HSDB记录页面。 双香豆素（Dicumarol）在小鼠中显示出较低的急性毒性：LD50 = 300 mg/kg（口服）[2] 小鼠长期给药（50 mg/kg/天，持续28天）未引起血清ALT、AST、BUN或肌酐水平表明无明显的肝毒性或肾毒性[2][3] 双香豆素（Dicumarol）在人血浆中的血浆蛋白结合率为92%，在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为89%[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
治疗用途
抗凝剂；酶抑制剂；解偶联剂 抗凝剂适用于预防和/或治疗静脉（或动脉）血栓形成（及其扩散）和肺栓塞（美国产品标签中未包含），以及深静脉血栓形成 (DVT) 或肺栓塞（治疗）。口服抗凝剂用于初始肝素治疗期间和之后，以降低血栓扩散、复发或死亡的风险。（美国产品标签中已包含抗凝剂） 口服抗凝剂用于预防术后血栓栓塞并发症，但更常用的是低剂量皮下注射肝素。（美国产品标签中已包含抗凝剂）美国产品标签中包含/ 抗凝剂适用于预防和/或治疗与房颤相关的血栓栓塞并发症（缺血性卒中）。强烈建议卒中高危患者使用抗凝剂（包括近期发生卒中、短暂性脑缺血发作或全身性栓塞的患者；左心室功能不全；年龄超过75岁；高血压；风湿性二尖瓣疾病；机械瓣膜或生物瓣膜置换术后）。/抗凝剂；包含在美国产品标签中/ 有关双香豆素（共9种）的更多治疗用途（完整）数据，请访问HSDB记录页面。 药物警告 口服抗凝剂的禁忌症包括既往或合并存在的血液凝固异常、活动性出血、近期或即将进行的中枢神经系统或眼部手术、可能导致无法控制出血的诊断或治疗操作（包括腰椎穿刺）、恶性高血压、消化性溃疡、妊娠、先兆流产、宫内节育器、脑血管出血和细菌性心内膜炎。相对禁忌症包括血小板减少症、心包炎、心包积液以及患者或患者监护人不可靠。口服抗凝剂 口服抗凝剂引起的出血最常见的是轻微出血，包括瘀伤、血尿、鼻出血、结膜出血、轻微胃肠道出血、伤口和外伤部位出血以及阴道出血。更严重的出血，例如大出血或致命性出血，最常见于胃肠道、颅内、阴道、腹膜后或与伤口或外伤部位相关的出血，尽管也有报道称其他多种部位也可能发生出血。颅内出血最常发生于因脑血管疾病服用口服抗凝剂的患者，最常见的表现是硬膜下血肿，通常与头部外伤无关。致命性胃肠道出血最常见于消化性溃疡，但任何胃肠道病变都可能导致大出血。总体而言，约三分之二的口服抗凝剂相关出血病例可以发现出血病灶。/口服抗凝剂/ 总体而言，口服抗凝剂治疗的出血率受多种因素影响：抗凝强度，无论是有意还是无意；使用抗凝治疗的潜在临床疾病（出血最常发生于缺血性脑血管疾病和静脉血栓栓塞；老年人出血最为常见）；存在不良药物相互作用或合并症，例如增强华法林作用的临床状态、既往出血倾向、恶性肿瘤、近期手术、创伤或既往潜在出血部位（例如手术伤口、消化性溃疡、近期脑出血、结肠癌）；同时服用阿司匹林（但不包括双嘧达莫）；以及患者的用药依从性（例如，酗酒者出血增加并非由于乙醇与华法林的药物相互作用，而是由于服药不规律）。/口服抗凝剂/ 曾发生过自然流产和死产，以及低出生体重和生长迟缓。此外，还可能发生胎儿或新生儿出血，以及因出血导致的胎儿死亡。据报道，服用抗凝剂会增加子宫内胎儿发育不良的风险，并增加妊娠中晚期产妇出血的风险。有证据表明，胚胎病仅在妊娠第6至12周口服抗凝剂时发生。/抗凝剂/ 有关双香豆素（共34条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。 药效学 双香豆素是一种存在于甜三叶草中的香豆素类化合物。它用作口服抗凝剂，通过抑制肝脏合成维生素K依赖性凝血因子（凝血酶原和因子VII、IX和X）发挥作用。 双香豆素（Dicumarol）是一种天然香豆素衍生物，对NQO1和PDK1具有双重靶点抑制活性[1][2] 它通过抑制以下途径发挥抗肿瘤作用： NQO1介导的氧化还原循环和PDK1依赖的代谢重编程可抑制癌细胞的增殖、迁移和侵袭[1][2] 双香豆素（Dicumarol）通过下调NQO1和GCLC逆转乳腺癌的他莫昔芬耐药性，恢复其对他莫昔芬诱导的细胞凋亡的敏感性[3] 该化合物最初被鉴定为一种抗凝血剂，但其抗肿瘤潜力已在卵巢癌和他莫昔芬耐药性乳腺癌中得到证实[1][2][3] 它对癌细胞相对于正常细胞具有高度选择性，使其成为联合癌症治疗的一个有前景的候选药物[2][3] |
| 分子式 |
C19H12O6
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|---|---|---|
| 分子量 |
336.29
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| 精确质量 |
336.063
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| 元素分析 |
C, 67.86; H, 3.60; O, 28.55
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| CAS号 |
66-76-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
54676038
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
620.7±55.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
290-292 °C(lit.)
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| 闪点 |
231.9±25.0 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.731
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| LogP |
3.55
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| tPSA |
100.88
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
605
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O1C(C(=C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12)O[H])C([H])([H])C1C(=O)OC2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C=1O[H])=O
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| InChi Key |
DOBMPNYZJYQDGZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H12O6/c20-16-10-5-1-3-7-14(10)24-18(22)12(16)9-13-17(21)11-6-2-4-8-15(11)25-19(13)23/h1-8,20-21H,9H2
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| 化学名 |
4-hydroxy-3-[(4-hydroxy-2-oxochromen-3-yl)methyl]chromen-2-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (4.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9736 mL | 14.8681 mL | 29.7362 mL | |
| 5 mM | 0.5947 mL | 2.9736 mL | 5.9472 mL | |
| 10 mM | 0.2974 mL | 1.4868 mL | 2.9736 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT04741334 | Completed | Drug: Dicumarols |
Cerebral Hemorrhage Craniocerebral Trauma |
Fondazione Policlinico Universitario Agostino Gemelli IRCCS |
September 27, 2019 |
JTT251
(S)-CPP
PDHc-E2-IN-1
PDK-IN-3
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