| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Dihydrorhodamine 123 does not directly target a specific enzyme or receptor. Its oxidation to rhodamine 123 is mediated by H₂O₂ in the presence of peroxidases (e.g. catalase, horseradish peroxidase). [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在10 μM二氢罗丹明123 (DHR 123)存在下，用50 nM佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯 (PMA) 刺激中性粒细胞NADPH氧化酶可提高发光速率。加入50 nM PMA后，在10 μM二氢罗丹明123存在下，细胞的荧光强度随时间增加。当在10 μM二氢罗丹明123存在下向诱导的HL60细胞中加入50 nM PMA时，细胞的荧光强度持续增加[1]。在无细胞体系中，二氢罗丹明123 (10 μM) 会被H₂O₂ (147 μM) 缓慢氧化；过氧化氢酶或辣根过氧化物酶可显著提高其氧化速率，但超氧化物歧化酶则无此作用。没有H₂O₂，该反应不会发生。[1]
在佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯（PMA）刺激的人中性粒细胞中，二氢罗丹明123转化为罗丹明123。该转化对超氧化物歧化酶（10 μg/ml）不敏感，但可被叠氮化物（2 mM）抑制，并可被二苯碘鎓（10 μM）部分抑制。外源过氧化氢酶（50 μg/ml）可消除荧光增强，表明细胞外释放的H₂O₂穿过质膜，并在细胞过氧化物酶存在下与细胞内二氢罗丹明123反应。 [1] 未诱导的HL60细胞（缺乏NADPH氧化酶活性）在PMA刺激下无法由二氢罗丹明123生成罗丹明，但在加入H₂O₂后立即生成罗丹明。相反，诱导的HL60细胞（表达NADPH氧化酶）在加入PMA后荧光强度持续增加。在诱导和未诱导HL60细胞50:50的混合群体中，两种细胞群在PMA刺激下均呈罗丹明阳性，表明H₂O₂从产生细胞扩散到邻近细胞。[1] |
| 酶活实验 |
在37 °C下，于含钠离子的培养基（150 mM NaCl、1 mM KCl、5 mM Hepes/Tris、5.5 mM 葡萄糖，pH 7.4）中，使用荧光计连续监测二氢罗丹明123氧化为罗丹明123的过程。激发波长为488 nm，发射波长为525 nm。为检测无细胞转化，将10 μM二氢罗丹明123与147 μM H₂O₂孵育，并记录荧光强度的增加。加入过氧化氢酶（15 μg/ml）或辣根过氧化物酶（2 μg/ml）以评估其增强效果。同时还测试了超氧化物歧化酶（10 μg/ml）。在没有H₂O₂的情况下，未观察到罗丹明的生成。 [1]
黄嘌呤氧化酶用于生成超氧化物；由二氢罗丹明123生成的罗丹明不受超氧化物歧化酶抑制，证实H₂O₂（歧化产物）是活性物质。[1] |
| 细胞实验 |
从白细胞层中分离人中性粒细胞，并重悬于含钠培养基中。用 50 nM PMA 刺激后，在 37 °C 下使用荧光计监测二氢罗丹明 123 (10 μM) 向罗丹明 123 的转化。通过注射口加入抑制剂，例如二苯碘鎓 (10 μM 或 20 μM)、超氧化物歧化酶 (10 μg/ml) 和叠氮化钠 (2 mM)。评估罗丹明的生成速率。[1]
使用共聚焦显微镜对单个中性粒细胞进行成像。将细胞置于含有 10 μM 二氢罗丹明 123 的 750 μl 溶液中，并在 37 °C 下孵育，盖玻片上放置细胞。加入 PMA (50 nM) 后，在选定的时间点采集图像，并进行五次扫描的卡尔曼平均。加入 PMA 后，单个细胞的荧光强度增加；这种增加可通过在培养液中加入 50 μg/ml 过氧化氢酶来消除。在另一项实验中，用 1.67 μM 罗丹明 123 孵育的中性粒细胞，除非加入 0.2% Triton X-100，否则不会积累荧光，表明细胞对罗丹明 123 不通透。[1] HL60 细胞在不含 CO₂ 的培养基中培养，该培养基含有 10% 胎牛血清和 2 mM L-谷氨酰胺。用 60 mM 二甲基甲酰胺诱导分化（NADPH 氧化酶表达）6 天。将细胞（6×10⁶/ml）与 10 μM 二氢罗丹明 123 在 37 °C 的 Krebs-Ringer 缓冲液中孵育，然后加入 PMA（50 nM）。使用 50 μl 稀释十倍的等分试样，通过 FACScan（激发波长 488 nm，发射波长 525 nm）测量罗丹明荧光。诱导细胞的荧光强度随时间增加，而未诱导细胞除非加入 H₂O₂，否则不会出现荧光强度增加。在 50:50 的混合细胞群（未诱导细胞预先加载 5 μM SNARF-AM 作为标记物）中，PMA 刺激后，SNARF 阳性细胞和 SNARF 阴性细胞均变为罗丹明阳性。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
二氢罗丹明123对光和空气敏感；配制2 mM的二甲基亚砜储备液，并在氮气保护下于-20 °C避光保存。该探针不适用于单细胞或亚细胞水平的超氧化物检测，因为过氧化氢可以从产生超氧化物的细胞扩散出来，氧化任何含有过氧化物酶的细胞中的二氢罗丹明123，导致对非产生细胞的假阳性识别。只有含有过氧化物酶的细胞才会发出荧光。该研究得出结论，二氢罗丹明123只能用作细胞群体中超氧化物的探针，而不能用于单细胞水平的检测。[1]
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| 分子式 |
C21H18N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
346.37922
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| 精确质量 |
346.131
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| CAS号 |
109244-58-8
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| PubChem CID |
105032
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| 外观&性状 |
White to pink solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
526.9±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
222.4±26.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.684
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| LogP |
1.84
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| tPSA |
87.57
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
488
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
FNEZBBILNYNQGC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H18N2O3/c1-25-21(24)15-5-3-2-4-14(15)20-16-8-6-12(22)10-18(16)26-19-11-13(23)7-9-17(19)20/h2-11,20H,22-23H2,1H3
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| 化学名 |
methyl 2-(3,6-diamino-9H-xanthen-9-yl)benzoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~288.70 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.22 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8870 mL | 14.4350 mL | 28.8700 mL | |
| 5 mM | 0.5774 mL | 2.8870 mL | 5.7740 mL | |
| 10 mM | 0.2887 mL | 1.4435 mL | 2.8870 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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