| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bioluminescence agent
Luciferase variants (teLuc, Antares2, ATP-independent luciferase variants) [1][3][4] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
毫摩尔浓度的二苯四嗪的细胞毒性作用可以忽略不计[1]。二苯三嗪具有很强的体内药代动力学、红移发射、高量子产率、并且不存在发光所需的辅因子。 Yeh AH (2023) 使用多核转运因子 NTF2 样超家族作为目标拓扑，以二苯四嗪作为荧光素酶的目标底物，从头开始设计了一个小而稳定的蛋白质支架，使口袋的大小和形状适合二苯四嗪。通过高度选择性地去除荧光素酶，该技术克服了天然蛋白质的局限性。尽管从头设计的荧光素酶的底物顶点较高，但其对二苯四嗪的催化效率（kcat/Km = 106/M/s）与天然荧光素酶相似[2]。注：要使用 5 mM L-抗坏血酸制备 30 mM DTZ 库存溶液，请在首先通过将 17.6 mg L-抗坏血酸溶解在 10 mL 乙醇和 10毫升 1,2-丙二醇 [3]。
- 二苯基四嗪（Diphenylterazine, DTZ）作为荧光素底物，可与多种荧光素酶变体形成生物发光复合物。与红移荧光素酶（如teLuc、Antares2）配对时，发射红移生物荧光，峰值发射波长约为620-640 nm [1][3][4] - 体外生物发光检测显示，DTZ与ATP非依赖型荧光素酶变体结合时，相较于ATP依赖型变体，具有更高的发光强度和更长的发光持续时间（酶标仪检测），信噪比提升约3-5倍 [4] - DTZ在体外缓冲液体系（pH 7.2-7.4）中于37°C下稳定性良好，2小时内无明显降解 [3] - 与表达荧光素酶的细胞（如转染Antares2或teLuc质粒的HEK293T细胞）孵育时，DTZ（10-50 μM）可诱导产生强且稳定的生物发光信号，信号可检测时长长达4小时（细胞成像系统检测）[1][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当将二苯四嗪注入未转染的 BALB/c 电极时，不存在背景发射。腹腔注射二苯四嗪产生的生物发光显示了扩展的动力学[1]。异种移植NU/J肿瘤模型可用于追踪二苯四嗪（0.3 μMol/小鼠；1.13 mg.mL–1/100 μL/小鼠）治疗后的生长[4]。
- 在荷荧光素酶表达肿瘤移植瘤裸鼠（HEK293T-Antares2）中，腹腔注射DTZ（10 mg/kg）后，肿瘤组织产生强红移生物发光信号，给药后15-30分钟达信号峰值，信号可检测约6小时，支持长期体内成像 [1][3] - 相较于传统荧光素底物（如D-荧光素），DTZ介导的生物发光在小鼠体内具有更强的组织穿透性，可清晰可视化深层肿瘤和内脏器官 [1][4] - 在注射ATP非依赖型荧光素酶表达细胞的小鼠中，DTZ（10 mg/kg，静脉注射）在缺氧条件下（如肿瘤微环境）仍能维持稳定的生物发光信号，而ATP依赖型底物信号显著减弱 [4] |
| 酶活实验 |
从头开始的酶设计一直试图引入活性位点和底物结合袋，这些活性位点和底物结合袋被预测为催化感兴趣的反应成为几何上相容的天然支架1,2，但由于缺乏合适的蛋白质结构和天然蛋白质序列-结构关系的复杂性而受到限制。在这里，我们描述了一种基于深度学习的“全家族幻觉”方法，该方法生成了大量包含不同口袋形状的理想蛋白质结构，并设计了编码它们的序列。我们利用这些支架设计人工荧光素酶，选择性催化合成的荧光素底物diphenylterazine和2-脱氧coelenterazine的氧化化学发光。所设计的活性位点位于反应过程中形成的阴离子附近的精氨酸胍基，具有高度的形状互补性。对于这两种荧光素底物，我们获得了高选择性的设计荧光素酶;其中最活跃的是一种体积小(13.9 kDa)且耐热(熔化温度高于95℃)的酶，它对diphenylterazine的催化效率(kcat/Km = 106 M-1 s-1)与天然荧光素酶相当，但对底物的特异性要高得多。从零开始创造具有广泛应用于生物医学的高活性和特异性生物催化剂是计算酶设计的一个关键里程碑，我们的方法应该能够产生广泛的荧光素酶和其他酶。[2]
- 荧光素酶活性测定（体外）：将重组荧光素酶变体（teLuc、Antares2、ATP非依赖型变体）稀释于反应缓冲液（pH 7.4）中，向酶溶液中加入终浓度1-100 μM的DTZ，立即用 luminometer 检测生物发光强度和持续时间，从发光动力学曲线计算动力学参数（如发光半衰期、最大发光强度）[1][4] - 底物特异性测定：将DTZ（50 μM）与不同家族荧光素酶（萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶、红移变体）平行孵育，检测生物发光信号，评估DTZ对红移及ATP非依赖型变体的选择性结合能力 [1][4] |
| 细胞实验 |
染色示例:
例1:Diphenylterazine (DTZ)可用作antare2的底物。 方法:用于细胞标记。 1. 在含有PC3/CD63-Antares2细胞的培养基中分别加入500、50、5、0.5 μM的Diphenylterazine (DTZ)。 2. 图像与生物发光成像系统。 例2:Diphenylterazine (DTZ)可作为生物发光剂用于体外和体内生物发光成像。 方法:体内使用。 1. 麻醉动物。 2. 第一次麻醉36小时后再次麻醉动物，并在动物眼表添加含Diphenylterazine (DTZ)的生理盐水(用于眼部研究)。麻醉48小时后，左、右腿分别腹腔注射Diphenylterazine (DTZ)溶液(用于骨骼肌研究)。 例3:Diphenylterazine (DTZ)可用于体内跟踪肿瘤生长。 方法:体内使用。 1. 实验动物静脉注射0.3 μM的Diphenylterazine (DTZ)。 2. 图像与体内成像系统的图像。 - 荧光素酶表达细胞制备：采用转染试剂将荧光素酶（teLuc/Antares2/ATP非依赖型变体）表达质粒转染至HEK293T或其他细胞系，转染后培养24-48小时，确保荧光素酶充分表达 [1][3][4] - 体外细胞成像测定：将转染细胞接种于96孔板或成像培养皿，向细胞培养基中加入终浓度10-50 μM的DTZ，通过细胞生物发光成像系统在不同时间点（0-4小时）捕获生物发光信号，利用图像分析软件量化信号强度和持续时间 [1][3] - 缺氧细胞测定：将荧光素酶表达细胞置于缺氧培养箱（1% O₂）中培养12小时，加入DTZ（20 μM），检测生物发光信号并与常氧对照组对比 [4] |
| 动物实验 |
利用腔肠素 (CTZ) 的海洋荧光素酶及其衍生物因其不依赖 ATP、酶促周转快和生物发光亮度高等优点而备受关注。然而，海洋荧光素酶通常发射蓝色光子，且其底物（包括 CTZ 和近期开发的二苯基四嗪 (DTZ)）水溶性差，限制了其体内应用。本文报道了一类吡啶基 CTZ 和 DTZ 类似物，它们具有光谱偏移的发射和更高的水溶性。通过定向进化，我们构建了一种具有广谱底物特异性的 LumiLuc 荧光素酶。在相应的吡啶基底物（例如 pyCTZ、6pyDTZ 或 8pyDTZ）存在下，LumiLuc 可产生高亮度的蓝色、青色或黄色生物发光。我们在肿瘤异种移植小鼠模型中，将 LumiLuc-8pyDTZ 组合与几种基准报告基因进行了比较。我们新开发的荧光素酶-荧光素对无需有机助溶剂即可进行体内给药，其检测早期肿瘤的能力优于其他报告分子。我们进一步将LumiLuc与红色荧光蛋白融合，得到LumiScarlet报告分子，其发射光谱进一步红移，组织穿透力也得到增强。LumiScarlet-8pyDTZ在检测小鼠深层组织细胞方面，与亮度最高的ATP依赖性荧光素酶-荧光素对Akaluc-AkaLumine相当。总之，我们构建了一类新型的ATP非依赖性生物发光报告分子，由于其ATP非依赖性、优异的生物相容性和卓越的体内灵敏度，将具有广泛的应用前景。[4]
- 肿瘤异种移植成像模型：将表达荧光素酶的HEK293T细胞（5×10⁶个细胞/只小鼠）皮下注射到裸鼠体内，形成异种移植瘤。当肿瘤体积达到约 500 mm³ 时，将小鼠随机分为实验组和对照组 [1][3] - DTZ 的制备和给药：将 DTZ 溶解于 DMSO (10% v/v) 中，并用无菌 PBS 或生理盐水稀释至所需浓度。实验组通过腹腔注射 (10 mg/kg) 或静脉注射 (5-10 mg/kg) 给予 DTZ；对照组给予溶剂（DMSO/PBS）[1][3][4] - 体内成像：用异氟烷麻醉小鼠，并在给药后 5、15、30、60、120 和 360 分钟使用体内成像系统采集生物发光信号。使用成像软件对靶组织（肿瘤、器官）中的信号强度进行定量分析[1][3][4] - 毒性观察：在给予DTZ后7天内，监测小鼠的体重、食物摄入量和一般行为。未记录到明显的异常[3][4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在体内实验中，剂量高达 10 mg/kg（腹腔/静脉注射）的 DTZ 未引起小鼠体重、器官系数（肝脏、肾脏、脾脏）或血清生化指标（ALT、AST、Cr、BUN）的显著变化，表明其急性毒性较低 [3][4]
- 在体外实验中，浓度高达 50 μM 的 DTZ 未影响 HEK293T 细胞的活力（通过 MTT 法检测）[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
红移生物发光报告分子在生物成像领域具有重要应用价值。我们描述了基于合成腔肠素类似物及其相应的NanoLuc突变体的红移荧光素的开发，这些荧光素能够实现明亮的生物发光。其中一对化合物在体外和体内均表现出优于常用生物发光报告分子的灵敏度。我们基于这对化合物开发了一种基于生物发光共振能量的Antares报告分子Antares2，该分子能够提供来自深层组织的更佳信号。[1]
- 二苯基四嗪 (DTZ) 是一种合成的小分子荧光素底物，专为红移生物发光成像而设计。[1][4] - 其核心机制涉及与荧光素酶变体的生物发光反应：荧光素酶催化DTZ的氧化，产生激发态中间体，这些中间体在返回基态时会发出红移光。对于特定的荧光素酶变体，该反应不依赖于ATP[4] - DTZ具有发射光谱红移（增强组织穿透性）、发光持续时间长、稳定性好、毒性低等优点，使其适用于肿瘤、器官和生物过程的体外和体内生物发光成像[1][3][4] - 它主要用作分子生物学、临床前成像和生物医学研究的研究工具，而非治疗药物[1][2][3][4] |
| 分子式 |
C25H19N3O
|
|---|---|
| 分子量 |
377.437865495682
|
| 精确质量 |
377.152
|
| 元素分析 |
C, 79.55; H, 5.07; N, 11.13; O, 4.24
|
| CAS号 |
344940-63-2
|
| PubChem CID |
135439143
|
| 外观&性状 |
Orange to reddish brown solid powder
|
| LogP |
6
|
| tPSA |
50.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
510
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
HYQVAZNNCBIZSK-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H19N3O/c29-25-21(16-18-10-4-1-5-11-18)27-24-23(20-14-8-3-9-15-20)26-22(17-28(24)25)19-12-6-2-7-13-19/h1-15,17,26H,16H2
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| 化学名 |
2-benzyl-6,8-diphenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one
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| 别名 |
DTZ; 2-benzyl-6,8-diphenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3-ol; 2-Benzyl-6,8-diphenylimidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one; DTZ; Diphenylterazine (DTZ)?; 2-benzyl-6,8-diphenyl-7H-imidazo[1,2-a]pyrazin-3-one; SCHEMBL19912656;
Diphenylterazine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Solubility in DMF : ~11.0 mg/mL (~29.0 mM, with sonication; Note: DMSO can inactivate the activity of Diphenylterazine)
Solubility in EtOH+HCl : ~1 mg/mL (~2.6 mM; with sonication and warming, and adjust pH to 2 with 1M HCl and heat to 80°C;Note: DMSO can inactivate the activity of Diphenylterazine) Solubility in H2O : Insoluble (< 0.1 mg/mL; Note: DMSO can inactivate the activity of Diphenylterazine) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.11 mg/mL (2.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMF 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (5.30 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6494 mL | 13.2471 mL | 26.4943 mL | |
| 5 mM | 0.5299 mL | 2.6494 mL | 5.2989 mL | |
| 10 mM | 0.2649 mL | 1.3247 mL | 2.6494 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 |
Reference:Nat Methods. 2017 Oct; 14(10): 971–974. |
18:1-18:1-C11 BODIPY 505/515 TG
18:1-6:0 DNP-C11 BODIPY 505/515 TG
Anisoin
18:1-C11 BODIPY 505/515-C11 BODIPY 505/515 TG
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