| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DO34 specifically targets the enzymes diacylglycerol lipase α (DAGLα) and β (DAGLβ). DAGLα is predominantly expressed in the brain, where it is the primary enzyme responsible for 2-AG synthesis in neurons. DAGLβ is more widely expressed in peripheral tissues and immune cells, playing a role in the immune system and other functions. By inhibiting both isoforms, DO34 effectively blocks the production of 2-AG, a full agonist of the cannabinoid receptors CB1 and CB2. This inhibition disrupts retrograde endocannabinoid signaling, which is crucial for modulating synaptic transmission, plasticity, and various neural processes. The selectivity of DO34 for DAGLα/β over other serine hydrolases is a key feature that minimizes off-target effects and makes it a powerful tool for dissecting the specific roles of these enzymes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
利用基于天然底物的实时荧光检测方法，DO34 被证实是一种高效、选择性强且具有中枢活性的 DAGL 抑制剂，可抑制重组人 DAGLα 的表达。此外，DO34 也被证实是 DAGLβ 的强效抑制剂，其 IC50 值为 3–8 nM[1]。
DO34 在体外表现出卓越的效力和选择性。利用基于天然底物的实时荧光检测方法，以表达重组人 DAGLα 的 HEK293T 细胞膜裂解液为底物，测定 DO34 对 DAGLα 的抑制作用，IC₅₀ 值为 6 nM。它对 DAGLβ 的抑制作用也十分显著，IC₅₀ 值在 3 至 8 nM 之间。这种纳摩尔级的高效性使得 DO34 能够在极低的化合物浓度下有效抑制 2-AG 的合成。该化合物的体外活性特征在于其能够完全阻断底物SAG转化为2-AG。其对其他丝氨酸水解酶的选择性已得到证实，确保其作用特异性地归因于对DAGL的抑制。DO34的作用机制是共价且不可逆的，从而导致对该酶的持续抑制。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
化合物39（DO34）抑制小鼠禁食诱导再摄食过程中常见的由大麻素CB1受体介导的行为。化合物39（DO34）以时间和剂量依赖的方式降低脑内2-AG水平[2]。DO34可阻断补体CB1的激活。在MAGL-TKO小鼠中，AM251显著提高基础PF-EPSC；DAGL抑制剂DO34可逆转AM251的作用[3]。体内研究表明，DO34具有中枢活性，能够有效穿过血脑屏障抑制脑内DAGL。它已被证实能够以剂量和时间依赖的方式降低脑内2-AG水平。DO34在小鼠中的关键表型效应之一是其能够损害恐惧消退，而恐惧消退通常由大麻素CB1受体信号传导介导。此外，DO34 能抑制小鼠禁食诱导的再摄食行为，而这种行为是 CB1 受体介导的典型行为。研究表明，DO34 可以阻断持续的 CB1 激活，并逆转 AM251（一种 CB1 反向激动剂）在 MAGL-TKO 小鼠中的作用。这些体内研究凸显了 DAGL 介导的 2-AG 合成在调节行为和中枢神经系统功能方面的关键作用。
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| 酶活实验 |
DO34 的体外酶活性测定通常采用实时荧光法天然底物测定。在该测定中，使用表达重组人 DAGLα 的 HEK293T 细胞膜裂解液作为酶源。该测定采用一种荧光标记的底物，模拟 DAGL 的天然底物。底物被活性酶切割后会释放荧光团，导致荧光强度增加，该增加可实时监测。将 DO34 与酶孵育一段时间后，加入底物启动反应。测量不同浓度抑制剂下荧光强度增加的初始速率（该速率与酶活性成正比）。使用不添加抑制剂的对照组来确定 100% 的酶活性。然后绘制数据以生成剂量反应曲线并计算 IC₅₀ 值。
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| 细胞实验 |
体外细胞检测DO34的方法通常是测量表达DAGL的细胞（例如原代神经元或细胞系）中2-AG的生成。细胞在特定时间内用DO34处理，通常会加入一种能激活2-AG生成的刺激物。处理后，使用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量细胞培养基或细胞裂解液中的2-AG水平。该方法能够灵敏且特异地测量内源性大麻素。DO34存在下2-AG水平的降低可直接反映细胞内DAGL的抑制情况。这些实验对于确认酶活性测定中观察到的生化抑制是否能转化为活细胞中2-AG合成的功能性阻断至关重要。
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| 动物实验 |
DO34 的体内动物研究通常在小鼠模型中进行。一种常见的实验方案是通过腹腔注射 (ip) 或口服 (po) 给药 DO34，以评估其对行为和脑生化的影响。例如，为了研究恐惧消退，小鼠接受恐惧条件反射训练，使其学会将特定音调与足底电击联系起来。第二天，小鼠接受 DO34 处理，然后再次暴露于该音调但不再接受电击，以测量恐惧反应的消退情况。为了评估 DO34 对 2-AG 水平的影响，小鼠接受 DO34 处理后在不同时间点处死，并采集脑组织，通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量分析 2-AG 的含量。这些研究对于理解 DAGL 和 2-AG 在体内的功能至关重要。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DO34 的分子量为 531.53，其主要特征是具有中枢活性，表明它可以穿过血脑屏障。其 logP 值为 5.1，提示其具有高亲脂性，这与其穿透中枢神经系统的能力相符。该化合物在 DMSO 中的溶解度≥100 mg/mL。公开文献中鲜有关于其详细药代动力学参数（如半衰期、Cmax 和口服生物利用度）的报道，但全身给药后在行为模型中的疗效证实了其足够的暴露量。其不可逆的共价作用机制提示其作用持续时间较长，因为恢复活性需要新的酶合成。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无公开的DO34全面毒性数据。作为一种强效且不可逆的内源性大麻素系统关键酶抑制剂，DO34可能产生靶向效应，包括干扰正常的内源性大麻素信号传导。该化合物被归类为研究工具，不适用于人体。处理DO34时应遵循标准的实验室安全预防措施。任何未来将其开发为治疗药物的计划都需要进行广泛的临床前毒理学研究，以评估其安全性，包括遗传毒性、急性和慢性毒性以及对中枢神经系统和免疫系统的影响。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
DO34 是一种用于研究内源性大麻素系统生物学的先进研究工具。它对 DAGLα/β 具有高效性和选择性，是研究 2-AG 生理和病理作用的首选抑制剂。它广泛应用于神经科学研究，以探索内源性大麻素在学习、记忆、恐惧、疼痛和奖赏中的作用。该化合物也用于免疫学研究，以探索 DAGLβ 在免疫细胞功能中的作用。目前，DO34 尚未进入临床试验，也未获得 FDA 批准用于任何适应症。
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| 分子式 |
C26H28F3N5O4
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|---|---|
| 分子量 |
531.526836395264
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| 精确质量 |
531.209
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| CAS号 |
1848233-58-8
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| 相关CAS号 |
DO34 analog;2098969-71-0
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| PubChem CID |
129188708
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
5.1
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| tPSA |
89.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
810
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC(OC1C=CC(=CC=1)C1=CN(C(N2CCN(C(=O)OC(C)(C)C)C[C@H]2CC2C=CC=CC=2)=O)N=N1)(F)F
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| InChi Key |
CQGMWUWJVBKTRM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H28F3N5O4/c1-25(2,3)38-24(36)32-13-14-33(20(16-32)15-18-7-5-4-6-8-18)23(35)34-17-22(30-31-34)19-9-11-21(12-10-19)37-26(27,28)29/h4-12,17,20H,13-16H2,1-3H3
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| 化学名 |
tert-butyl 3-benzyl-4-[4-[4-(trifluoromethoxy)phenyl]triazole-1-carbonyl]piperazine-1-carboxylate
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| 别名 |
DO 34; DO-34; DO34
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~188.14 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (18.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (18.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (18.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8814 mL | 9.4068 mL | 18.8136 mL | |
| 5 mM | 0.3763 mL | 1.8814 mL | 3.7627 mL | |
| 10 mM | 0.1881 mL | 0.9407 mL | 1.8814 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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