EIDD-1931 (Beta-d-N4-hydroxycytidine; NHC)

别名: EIDD-1931; EIDD 1931; EIDD1931; N4-Hydroxycytidine; β-D-N4-hydroxycytidine; Uridine, 4-oxime; N(4)-Hydroxycytidine; 3258-02-4; EIDD-1931; Beta-D-N4-hydroxycytidine; Uridine, 4-oxime; N-hydroxycytidine; 4-N-Hydroxycytidine; NHC; EIDD-2801-metabolite; Molnupiravir-,etabolite
目录号: V39191 纯度: ≥98%
EIDD-1931(EIDD1931; Beta-d-N4-羟基胞苷; NHC) 是一种新型、有效的核糖核苷类似物,具有抗病毒活性。
EIDD-1931 (Beta-d-N4-hydroxycytidine; NHC) CAS号: 3258-02-4
产品类别: SARS-CoV
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
2mg
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
EIDD-1931(EIDD1931;Beta-d-N4-羟基胞苷;NHC)是一种新型、有效的核糖核苷类似物,具有抗病毒活性。 EIDD-1931是英国批准的抗COVID-19药物Molnupiravir(EIDD2801;前药-EIDD1931;MK-4482;Lagevrio)的活性代谢物,因此有潜力用作抗COVID-19药物。 EIDD-1931具有广谱抗病毒活性,可抑制Vero 76细胞中的严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、Calu-3 2B4细胞中的中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)和SARS-CoV的复制Vero 细胞中的值为 -2(IC 50 s 分别为 0.1、0.15 和 0.3 μM)。它增加了对抗对核苷类似物抑制剂瑞德西韦产生耐药突变的冠状病毒的效力。
生物活性&实验参考方法
靶点
P2Y12 Receptor
体外研究 (In Vitro)
抗 VEEV(委内瑞拉马脑炎病毒)剂 β-d-N4-hydroxycytidine (NHC)的 EC50、EC90 和 EC99 值分别为 0.426、1.036 和 2.5 μM[1]。
在 Huh-7–CHIKV 中复制子细胞系,β-d-N4-羟基胞苷抑制CHIKV复制子活性,50%有效浓度(EC50)为0.8 μM。关于 BHK-21 细胞中的复制子,已报告了类似的结果 (EC50=1.8 μM)。根据 MTT 测定,NHC 在 Huh-7 细胞培养系统中浓度高达 100 μM 时不会引起任何细胞毒性。对于外周血单核 (PBM)、Vero 和 CEM 细胞,NHC 的 50% 细胞毒性浓度 (CCsub>50) 值分别为 30.6 μM、7.7 μM 和 2.5 μM。NHC 充当嘧啶类似物;外源核苷,例如嘧啶 C 和 U,可以逆转 NHC 介导的 CHIKV 复制子抑制;然而,复制子不受 dA、dC、dG、dU 或 T 的影响。无论有或没有 NHC,嘧啶 A 和 G 都在复制子抑制中发挥作用 [2]。
体内研究 (In Vivo)
在小鼠模型中对VEEV抑制剂核糖核苷类似物EIDD-1931(β-D-N4-羟基胞苷)进行了表征。[4]
• EIDD-1931可口服,成功递送至脑组织并转化为活性5′-三磷酸形式。[4]
• EIDD-1931在长达1000mg/kg/天的7天剂量范围毒理学研究中表现出良好的耐受性。[4]
• EIDD-1931在预防性或治疗性给药时保护小鼠免受VEEV的致命鼻内攻击。[4]
酶活实验
细胞内NHC-TP t1/2s的测定。[2]
Huh-7细胞(六孔板每孔2.5×106)与10μM[3H]NHC(β-d-N4-羟基胞苷,500 dpm/pmol)在37°C、5%CO2气氛中孵育24小时。然后用无药物培养基洗涤细胞三次以去除细胞外NHC,并用常规培养基孵育特定时间段(0、1、2、4、8和24小时)。如下所述提取细胞内代谢物。
细胞内代谢物的测定。[2]
在NHC-TP积累或NHC-TP t1/2研究时间点测定的选定时间,去除细胞外培养基,用冷磷酸缓冲盐水洗涤细胞层。用60%甲醇(1ml)刮除细胞后,在-20°C下孵育过夜提取NHC及其各自的代谢物,然后以14000 rpm离心样品5分钟,收集上清液。第二天,在冰上提取1小时(200μl,含60%甲醇),然后再次以14000 rpm的速度离心样品(Eppendorf 5415C型离心机)5分钟。将提取物合并,在温和的过滤气流下干燥,然后储存在-20°C下,直至通过HPLC分析。将残留物重新悬浮在200μl水中,并将等分试样注入HPLC柱中。
猴和人全血中NHC的稳定性研究。[2]
将10微摩尔[3H]NHC(1000 dpm/pmol)在猴子或人类血液中孵育不同时间段(0、0.08、0.16、1、2、4和24小时)。在选定的时间点,取200μl的等分试样,以14000 rpm离心5分钟。收集上清液,加入500μl乙腈并混合。将样品在14000rpm下重新离心5分钟,并使用DNA快速真空干燥上清液。将残留物重新悬浮在200μl水中,并将等分试样注入HPLC柱中。
细胞实验
病毒复制分析。将总共5×10~5个Vero细胞接种到6孔Costar平板中,并以图例中所示的MOI感染。在指定时间将β-d-N4-hydroxycytidine (NHC)添加到细胞中,收获培养基,并通过Vero细胞上的空斑试验测定样品中的病毒滴度,如别处所述[1]。
发现β-d-N4-hydroxycytidine (NHC)在HCV复制子系统(克隆A)中具有选择性抗丙型肝炎病毒(HCV)活性。在HCV复制子系统、Huh-7细胞、HepG2细胞和原代人肝细胞中研究了氚化NHC的细胞内代谢。用10微M放射性标记的NHC孵育细胞表明,所有肝细胞中都存在广泛而快速的磷酸化。除了NHC的5'-单磷酸、-二磷酸和-三磷酸代谢物外,还对其他代谢物进行了表征。这些包括胞苷和尿苷单磷酸盐、二磷酸盐和三磷酸盐。UTP是Huh-7细胞和原代人肝细胞中主要的早期代谢产物,表明NHC的脱氨基是主要的分解代谢途径。经计算,放射性标记的NHC三磷酸盐和来源于Huh-7细胞中NHC孵育的CTP和UTP的细胞内半衰期分别为3.0+/-1.3、10.4+/-3.3和13.2+/-3.5小时(平均值+/-标准差)。使用猴子和人类全血的研究表明,猴子细胞的脱氨基和氧化速度比人类细胞快,这表明NHC在血浆中的持续时间可能不足以输送到肝细胞。
动物实验
小鼠体内的药代动力学和组织分布[4]
本研究采用6-8周龄的雌性ICR (CD-1®)小鼠(与疗效研究中使用的小鼠相同)。EIDD-1931以240 mM柠檬酸缓冲液(pH 3 ± 0.3)灌胃给药,或以生理盐水腹腔注射给药。口服剂量为50、150和500 mg/kg体重,腹腔注射剂量为10和50 mg/kg体重。分别于腹腔注射后0.08、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时,以及口服给药后0.25、0.5、1、2、3、4、8和24小时采集血样。采集血液后30分钟内,将血液样本在4℃下以2000g离心10分钟制备血浆,并在进行LC-MS/MS分析前储存于-80℃。从给药后0.5小时开始,立即从所有小鼠采集血液样本,并收集其器官(肺、脾、肝、肾、心脏和脑)。组织样本立即用液氮速冻,并在进行LC-MS/MS分析前储存于-80℃。
剂量范围探索(DRF)毒理学和毒代动力学研究[4]
该研究分两个阶段进行:A阶段(单次给药,急性毒性)和B阶段(多次给药)。在A阶段,两组各6只小鼠(每组3只雄性,3只雌性)分别以500 mg/kg和1000 mg/kg的剂量,通过灌胃法单次给予EIDD-1931。经过4天的洗脱期后,同一批小鼠分别以1500 mg/kg和2000 mg/kg的剂量再次接受灌胃给药。化合物以10 ml/kg的体积溶于柠檬酸钠溶液(0.24M柠檬酸钠,pH 3 ± 0.3)中。给药后,连续4天,每天两次监测小鼠的体重、食物消耗量、一般体貌特征和行为。在B阶段,EIDD-1931连续7天每日一次给药。每个剂量组10只雄性和10只雌性小鼠(共80只小鼠)分别以200 mg/kg/天、500 mg/kg/天和1000 mg/kg/天的剂量水平进行测试,给药体积为10 ml/kg。 [4]

在毒代动力学 (TK) 研究中,动物接受的 EIDD-1931 剂量、给药体积和给药方式与主要研究组相同,剂量分别为 200、500 和 1000 mg/kg/天。TK 组每个剂量水平使用 36 只雄性小鼠和 36 只雌性小鼠。从 TK 组动物采集血样,用于测定血浆中 EIDD-1931 的浓度。在第 1 天给药后 1、2、4、6、8 和 24 小时,以及在第 7 天给药前和给药后 1、2、4、6 和 8 小时,从每组 3 只 TK 组动物(性别/组别/时间点)采集血样。血样收集于含有肝素锂作为抗凝剂的试管中,并置于冰上保存。
鼻内委内瑞拉马脑炎病毒(VEEV)感染的小鼠模型[4]
所有研究均使用7至8周龄的ICR(Crl:CD1)雌性小鼠。在预防性研究中确定了EIDD-1931的剂量依赖性。将小鼠分为四组,分别灌胃给予150、300或500 mg/kg的EIDD-1931(溶于240 mM柠檬酸钠缓冲液,pH 3 ± 0.3),或仅给予溶剂作为对照,所有剂量体积均为10 ml/kg,于感染前2小时开始给药。第二次给药于感染后2小时(+2 h P1),之后每日两次(bid)给药,持续6天。在第二项(治疗性)研究中,分别于感染后 6、12、24 或 48 小时开始给予 500 mg/kg EIDD-1931 治疗,并将治疗组与载体(假)治疗组进行比较。对于感染后 6 小时组,第二次治疗在感染后 12 小时进行;之后,所有组均每 12 小时(每日两次)继续治疗 6 天。
药代性质 (ADME/PK)
吸收、分布和排泄
N4-羟基胞苷在小鼠体内具有口服生物利用度,但在非人灵长类动物体内生物利用度较低。
代谢/代谢物
N4-羟基胞苷分布于组织中,并在组织中被磷酸化为5'-三磷酸形式。
参考文献

[1]. β-d-N4-Hydroxycytidine Is a Potent Anti-alphavirus Compound That Induces a High Level of Mutations in the Viral Genome. J Virol. 2018 Jan 17;92(3). pii: e01965-17.

[2]. Metabolism of the anti-hepatitis C virus nucleoside beta-D-N4-hydroxycytidine in different liver cells. Antimicrob Agents Chemother. 2004 Dec;48(12):4636-42

[3]. Characterization of β-d- N4-Hydroxycytidine as a Novel Inhibitor of Chikungunya Virus. Antimicrob Agents Chemother. 2017 Mar 24;61(4):e02395-16.

[4]. The prophylactic and therapeutic activity of a broadly active ribonucleoside analog in a murine model of intranasal venezuelan equine encephalitis virus infection. Antiviral Res . 2019 Nov:171:104597.

其他信息
N(4)-羟基胞苷是一种核苷类似物,是胞苷在N(4)位连接一个羟基后形成的衍生物。它对流感病毒、SARS-CoV、SARS-CoV-2和MERS-CoV均具有广谱抗病毒活性。它可作为药物代谢物、人类异生物质代谢物、抗冠状病毒药物和抗病毒药物发挥作用。它是一种核苷类似物和酮肟类化合物,在功能上与胞苷相关。
N4-羟基胞苷,又称EIDD-1931,是一种核糖核苷类似物,可诱导RNA病毒颗粒发生突变。N4-羟基胞苷最早于1980年被文献报道为一种强效的细菌和噬菌体诱变剂。体外实验表明,N4-羟基胞苷对委内瑞拉马脑炎病毒和人冠状病毒HCoV-NL63具有抗病毒活性。N4-羟基胞苷已被证实能够抑制小鼠和人呼吸道上皮细胞中的SARS-CoV-2以及其他人类和蝙蝠冠状病毒。在小鼠体内,N4-羟基胞苷具有良好的口服生物利用度,并能分布到组织中,最终转化为活性5'-三磷酸形式,该形式可整合到新病毒颗粒的基因组中,导致失活突变的积累。在非人灵长类动物中,N4-羟基胞苷的口服生物利用度较低。此外,一种对瑞德西韦耐药的小鼠肝炎病毒突变株也表现出对N4-羟基胞苷的敏感性增加。 N4-羟基胞苷的前药[EIDD-2801]也正在研究其对冠状病毒家族的广谱活性。
药物适应症
N4-羟基胞苷及其前药[EIDD-2801]正在研究其对多种病毒感染的活性,包括流感病毒、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)和SARS-CoV-2。
作用机制
N4-羟基胞苷在组织中磷酸化为活性5'-三磷酸形式,该形式被整合到新病毒颗粒的基因组中,导致失活突变的积累,即病毒错误灾难。一种对[瑞德西韦]耐药的小鼠肝炎病毒突变株也显示出对N4-羟基胞苷的敏感性增加。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C9H13N3O6
分子量
259.21602
精确质量
259.08
元素分析
C, 41.70; H, 5.06; N, 16.21; O, 37.03
CAS号
3258-02-4
PubChem CID
197020
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
-2.2
tPSA
137.07
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
398
定义原子立体中心数目
4
SMILES
C1(N2C=C/C(=N\O)/NC2=O)OC(CO)C(O)C1O
InChi Key
XCUAIINAJCDIPM-XVFCMESISA-N
InChi Code
InChI=1S/C9H13N3O6/c13-3-4-6(14)7(15)8(18-4)12-2-1-5(11-17)10-9(12)16/h1-2,4,6-8,13-15,17H,3H2,(H,10,11,16)/t4-,6-,7-,8-/m1/s1
化学名
N4-Hydroxycytidine
别名
EIDD-1931; EIDD 1931; EIDD1931; N4-Hydroxycytidine; β-D-N4-hydroxycytidine; Uridine, 4-oxime; N(4)-Hydroxycytidine; 3258-02-4; EIDD-1931; Beta-D-N4-hydroxycytidine; Uridine, 4-oxime; N-hydroxycytidine; 4-N-Hydroxycytidine; NHC; EIDD-2801-metabolite; Molnupiravir-,etabolite
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~385.77 mM)
H2O : ≥ 25 mg/mL (~96.44 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.8577 mL 19.2886 mL 38.5773 mL
5 mM 0.7715 mL 3.8577 mL 7.7155 mL
10 mM 0.3858 mL 1.9289 mL 3.8577 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • NHC has a strong negative effect on VEEV TC-83 replication. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • The antiviral effect of NHC depends on its application time. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • The first 4 h p.i. are a critical time for the antiviral effect of NHC. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • NHC is a potent anti-VEEV compound with low cytotoxicity. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • VEEV TC-83 accumulates a large number of mutations when exposed to NHC. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • NHC has stronger negative effects on the release and infectivity of VEEV TC-83 and PREV1 particles than those of the PP2 mutant. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • Drug-resistant VEEV isolate PP2 replicates more efficiently than parental VEEV TC-83 and pseudorevertant PREV1 in the presence, but not in the absence of NHC. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • VEEV TC-83 passaging in the presence of increasing concentrations of NHC leads to rapid accumulation of mutations in viral pool.[1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
  • The mutations that lead to NHC-resistant and NHC-sensitive phenotypes of VEEV TC-83 are closely located in the 3D structure of the catalytic domain of VEEV nsP4. [1].J Virol. 2018 Jan 17;92(3).
相关产品
联系我们