| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ERK5 (IC50 = 0.82 μM); ERK5 MEF2D (IC50 = 3 μM)
ERK5 (IC₅₀ = 0.82 ± 0.10 μM), p38α (IC₅₀ > 120 μM) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
46 在生化实验中抑制ERK5激酶活性，IC₅₀为0.82 μM，对p38α的选择性超过146倍。
在HEK293细胞的ERK5依赖性MEF2D报告基因实验中，46 的IC₅₀为3.0 ± 1.2 μM。 46 抑制PC3前列腺癌细胞的增殖，GI₅₀为44 ± 2.8 μM。 在10 μM浓度下对456种激酶进行筛选，结果显示除ERK5外，46 仅对另外7种激酶有≥90%的抑制（DCAMKL3、JAK1、SLK、MAP3K15、TYK2、JAK2、MST2和DCAMKL1）。 表面等离子体共振（SPR）分析证实，与对照化合物XMD8-92不同，46 不结合BRD4的第一个溴结构域。 46 与ERK5激酶结构域结合的晶体结构（PDB: 5O7I）已在2.4 Å分辨率下解析，揭示了其在ATP结合位点的结合模式。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
ERK5-IN-2（化合物 46）（软骨；100 mg/kg；CD1 小鼠 7 天，CD1 裸 (nu/nu) 小鼠 10 天）具有低血红蛋白浓度和抗血管生成特性 [1]。在人类和动物的 caco-2 细胞渗透性测试中，ERK5-IN-2（静脉注射或静脉注射 10 mg/kg，持续 0.083-24 小时）显示出低内部清除率、高通量和低流出比 (ER)
在雌性CD1小鼠的Matrigel栓血管生成实验中，口服给予46（100 mg/kg，每日两次，持续7天）显著降低了栓内的血红蛋白含量（p = 0.0009），表明其抑制了bFGF驱动的血管生成。 在雌性CD1裸鼠的A2780人卵巢癌异种移植模型中，口服给予46（100 mg/kg，每日两次，持续10天）使肿瘤体积较载体对照组显著减小57%（p = 0.002）。 |
| 酶活实验 |
ERK5生化活性采用荧光偏振（FP）法测定。将重组ERK5/MEK5复合物（5-10 nM）与FAM标记的肽底物、ATP及系列稀释的化合物在反应缓冲液中于37°C孵育2小时。通过加入结合溶液，室温孵育2小时后测量荧光偏振来检测磷酸化产物。
p38α生化活性采用LANCE TR-FRET法测定。将全长p38α（1-3 nM）与Ulight标记的肽底物、ATP及系列稀释的化合物在反应缓冲液中于37°C孵育1小时。反应用EDTA淬灭，通过加入铕标记的抗磷酸化抗体，室温避光孵育2小时后测量TR-FRET进行检测。 |
| 细胞实验 |
ERK5依赖性细胞活性通过在HEK293细胞中进行双荧光素酶报告基因实验来评估。细胞共转染组成型活性MEK5（MEK5DD）、ERK5、GAL4-MEF2D融合蛋白表达载体以及GAL4驱动的荧光素酶报告基因。转染后4小时，用不同浓度化合物处理细胞。20小时后收集细胞，测量萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶活性以计算IC₅₀值。
通过测定化合物处理指定时间后的细胞活力来确定其对PC3细胞的抗增殖活性，并计算GI₅₀值。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 接种Matrigel的雌性CD1小鼠（8-10周龄）和携带A2780人卵巢癌异种移植瘤的雌性CD1裸鼠（nu/nu）（8-10周龄）[1]
剂量： 100 mg/kg 给药途径： 口服；每日两次；CD1小鼠连续给药7天，CD1裸鼠（nu/nu）连续给药10天 实验结果： 肿瘤体积显著缩小。 动物/疾病模型： 8-10周龄雌性CD1小鼠[1] 剂量： 10 mg/kg 给药途径： 静脉注射或口服；0.083-24小时 实验结果： 终末血浆半衰期为38分钟，血浆清除率为27 mL/min/kg，口服生物利用度为68%。 在Matrigel胶塞血管生成试验中，将含有bFGF（500 ng/mL）的500 μL Matrigel胶皮下注射到8-10周龄的雌性CD1小鼠体内。 24小时后，将小鼠随机分为三组，分别接受载体、XMD8-92（50 mg/kg，腹腔注射，每日两次）或46（100 mg/kg，口服，每日两次）治疗，疗程7天。第7天，切取栓塞组织，速冻后，采用比色法定量分析血红蛋白含量。 对于A2780异种移植瘤模型，将A2780细胞皮下接种于8-10周龄的雌性CD1裸鼠。7天后，当肿瘤平均体积达到72 mm³时，将小鼠随机分为三组，分别接受载体、XMD8-92（50 mg/kg，腹腔注射，每日两次）或46（100 mg/kg，口服，每日两次）治疗，疗程10天。定期使用游标卡尺测量肿瘤体积，并监测体重。 在药代动力学研究中，8-10周龄的雌性CD1小鼠单次静脉注射或口服给予46（10 mg/kg）。在终末麻醉下，通过心脏穿刺在多个时间点采集血液。分离血浆，并通过液相色谱-质谱联用（LC-MS）测定药物浓度。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
46在人肝微粒体和鼠肝微粒体中均表现出较低的固有清除率（HLM Clᵢₙₜ < 5 μL/min/mg 蛋白；MLM Clᵢₙₜ = 26 μL/min/mg 蛋白）。
在 Caco-2 细胞渗透性试验中，46显示出较高的表观渗透性（Pₐₚₚ > 10 × 10⁻⁶ cm/s）和较低的外排比（0.82）。 通过浊度法测定，46的热力学溶解度估计为 >100 μM。 46在小鼠体内的血浆蛋白结合率为中等（fᵤ = 0.06）。 在小鼠体内，单次静脉注射 10 mg/kg 后，46的终末血浆半衰期为半衰期 (T₁/₂) 为 38 分钟，血浆清除率 (CL) 为 27 mL/min/kg，分布容积 (Vd) 为 1.2 L/kg。 单次口服 10 mg/kg 后，46在 15 分钟 (Tₘₐₓ) 时达到最大血浆浓度 (Cₘₐₓ) 为 6 μM，曲线下面积 (AUC) 为 254 μg/mL·min，口服生物利用度 (F) 为 68%。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在A2780异种移植研究中未观察到明显的毒性。46治疗组的最低体重为初始体重的99%，而对照组为96%，XMD8-92组为98%。
46对四种细胞色素P450同工酶（2C19、2C9、2D6、3A4）的IC₅₀ > 5 μM，表明其CYP抑制潜力较低。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化合物 46 是一种吡咯-2-甲酰胺衍生物，是通过对高通量筛选先导化合物进行优化而发现的。结构优化包括截短酰胺取代基，这显著提高了其对 p38α MAP 激酶的选择性。该化合物可作为一种选择性药理学工具，用于研究 ERK5 信号通路在癌症和血管生成中的作用，并已证实具有良好的口服生物利用度和体内疗效。
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| 分子式 |
C17H11BRFN3O2
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|---|---|
| 分子量 |
388.190546274185
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| 精确质量 |
387.001
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| CAS号 |
1888305-96-1
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| 相关CAS号 |
1888305-96-1
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| PubChem CID |
118959080
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| 外观&性状 |
White to off-white solid
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| LogP |
2.9
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| tPSA |
74.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
479
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
ATKCERYALDNMPL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H11BrFN3O2/c18-12-4-1-5-13(19)15(12)16(23)10-7-14(21-8-10)17(24)22-11-3-2-6-20-9-11/h1-9,21H,(H,22,24)
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| 化学名 |
4-(2-bromo-6-fluorobenzoyl)-N-pyridin-3-yl-1H-pyrrole-2-carboxamide
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| 别名 |
ERK5-IN 2; ERK5 IN-2; ERK5-IN-2
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 78~250 mg/mL (200.9~644.0 mM)
Ethanol: ~3 mg/mL (~7.7 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5761 mL | 12.8803 mL | 25.7606 mL | |
| 5 mM | 0.5152 mL | 2.5761 mL | 5.1521 mL | |
| 10 mM | 0.2576 mL | 1.2880 mL | 2.5761 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
(R)-MK-8353
Biotin-ERK2 Recombinant Human Active Protein Kinase
APS03118
C3 sodium
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
