Erucic acid   中文名称: 13-二十二碳烯酸

Phosphatidylinositide 3-kinase (PI3K)
Protein kinase C zeta (PKCζ)
Extracellular signal-regulated kinase (ERK)
cAMP response element-binding protein (CREB)
Protein kinase B (Akt) [1]

给予芥酸（Erucic acid）（3 mg/kg，口服）后，小鼠海马组织中PI3K、PKCζ、ERK、CREB和Akt的磷酸化水平较溶媒对照组显著升高（pPI3K：\(t=2.489\)，\(P<0.05\)；pPKCζ：\(t=4.441\)，\(P<0.05\)；pERK：\(t=3.744\)，\(P<0.05\)；pCREB：\(t=4.380\)，\(P<0.05\)；pAkt：\(t=3.669\)，\(P<0.05\)）[1]
芥酸对海马组织中CaMKII的磷酸化水平无影响 [1]

在海马区域，与媒介物处理的对照组相比，芥酸（口服；3 mg/kg）增加了 PI3K、PKC z、ERK、CREB 和 Akt 的磷酸化水平 [1]。

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在正常小鼠中，芥酸（Erucic acid）（3 mg/kg，口服）可增强被动回避实验中的记忆表现，较溶媒对照组显著延长记忆保持期潜伏期（\(F(3,33)=3.609\)，\(P<0.05\)）[1]
在东莨菪碱（1 mg/kg，腹腔注射）诱导的记忆障碍小鼠中，芥酸（3 mg/kg，口服）可改善认知缺陷：逆转被动回避实验中记忆保持期潜伏期的缩短（\(F(5,53)=19.78\)，\(P<0.05\)），提高Y-迷宫实验中的自发交替率（\(F(5,48)=5.064\)，\(P<0.05\)），且不影响总臂进入次数（运动能力）[1]
在Morris水迷宫实验中，芥酸（3 mg/kg，口服）可缩短东莨菪碱处理小鼠在训练第4、5天的逃避潜伏期（第4天：\(F(3,27)=6.736\)，\(P=0.0015\)；第5天：\(F(3,27)=11.14\)，\(P<0.0001\)）；在探索实验中，可恢复目标象限游泳时间的减少，且不影响游泳速度（\(F(3,27)=0.8766\)，\(P=0.4655\)）和总移动距离（\(F(3,27)=2.157\)，\(P=0.1164\)）[1]

海马组织蛋白磷酸化检测（Western blot）：芥酸给药1小时后处死小鼠，分离海马组织。将组织在含蔗糖、EDTA、EGTA、PMSF、原钒酸钠和蛋白酶抑制剂的冰浴Tris–HCl缓冲液中匀浆。蛋白定量后，取15 μg蛋白进行还原条件下的SDS-PAGE（8%凝胶）电泳，随后转移至PVDF膜。膜经5%脱脂牛奶封闭后，与一抗（抗pPI3K、抗PI3K、抗pAkt、抗Akt、抗pPKCζ、抗PKCζ、抗pERK、抗ERK、抗pCREB、抗CREB）在4 °C孵育过夜，再加入辣根过氧化物酶标记的二抗孵育。通过增强化学发光法检测免疫反应性，并用成像软件进行分析 [1]

动物/疾病模型：正常幼鼠[1]
剂量：3 mg/kg
给药途径：po（口服灌胃）3 mg/kg
实验结果：海马PI3K、PKCz、ERK、CREB和Akt的磷酸化水平增强。

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被动回避任务：雄性ICR CD-1®小鼠（25-30 g，6周龄）每笼5只（27×22×14 cm），自由摄食饮水，保持12小时光照/黑暗循环（23±1 °C，60±10%湿度）。记忆增强研究：在学习试验前1小时，分别给予小鼠芥酸（1、3、10 mg/kg，口服，溶于10%吐温80溶液）或溶剂对照。将小鼠置于明亮箱中，10秒后打开闸门；小鼠进入黑暗箱时，施加0.25 mA的足底电击3秒，并记录学习潜伏期（最长60秒）。24小时后测量记忆保持潜伏期（最长600秒）。记忆缺陷改善研究：在学习试验前1小时，分别给予小鼠芥酸（1、3、10 mg/kg，口服）或多奈哌齐（5 mg/kg，口服），并在学习试验前30分钟腹腔注射东莨菪碱（1 mg/kg）。记录学习潜伏期（最长60秒，必要时强制进入），并施加0.5 mA的足底电击。保持潜伏期（最长 300 秒）在 24 小时后测量 [1]
Y 型迷宫任务：小鼠在试验前 1 小时分别口服芥酸（1、3、10 mg/kg）、多奈哌齐（5 mg/kg）或载体，并在试验前 30 分钟腹腔注射东莨菪碱（1 mg/kg）。将小鼠置于 Y 型迷宫（40×3×12 cm，120° 角）的一个臂中，记录 8 分钟内的进入次数。自发交替百分比计算公式为（未重复交替次数 / 总进入次数 - 2）× 100。每次测试之间用 70% 乙醇清洁迷宫 [1]
Morris 水迷宫任务：小鼠接受为期 7 天的测试（适应性训练、5 天训练、探针试验）。水池（直径 90 厘米，高 45 厘米）注满 30 厘米深的 22–24 °C 水（用黑色食用色素染色）。适应性训练：小鼠在没有平台的情况下游泳 60 秒。训练：在目标象限放置一个平台（直径 6 厘米，高 29 厘米）。在首次每日训练前 1 小时，分别给予芥酸（3 毫克/千克，口服）、多奈哌齐（5 毫克/千克，口服）或溶剂对照（每日 2 次）；除对照组外，所有组在训练前 30 分钟腹腔注射东莨菪碱（1 毫克/千克）。记录逃避潜伏期（最长 60 秒）。探针试验：移除平台，小鼠游泳 60 秒；测量目标象限内的游泳时间、速度和总距离[1]
蛋白质印迹动物制备：小鼠灌胃给予芥酸（3 mg/kg）或载体，1 小时后通过颈椎脱臼处死，分离海马体进行蛋白质提取[1]

吸收、分布和排泄
注射菜籽油中的¹⁴C-芥酸乳剂后，大鼠肝脏脂质中的浓度最高，其次是脾脏和肾脏。脑、睾丸和精囊中脂肪酸的脂质摄取量较低。
连续20天喂食芥酸的雄性大鼠，其心脏和肝脏中的二磷脂酰甘油和合成磷脂中掺入了芥酸。
Wistar大鼠单次口服560 mg芥酸（乙酯）……给药后2小时，胃和小肠中的芥酸水平达到峰值（剂量的40%）。给药后8小时，结肠中的芥酸水平达到峰值（剂量的50%）。这表明芥酸的吸收率很低。给药后2小时，心脏血液中芥酸水平达到峰值（占总脂肪酸的14%，而背景水平为2.5%）。
雄性Wistar大鼠经静脉注射游离的¹⁴C标记芥酸和³H标记油酸的混合物。分别在2、4、8、16和30分钟后，检测血液、肝脏、心脏、肾脏和脾脏中的放射性。在所有检测时间点，大部分放射性都存在于肝脏中，主要以甘油三酯（占总脂质放射性的60%）和磷脂（20%至30%）的形式存在。在其他检测器官中，放射性比肝脏低10至15倍。在心脏中，¹⁴C的含量是³H的3至4倍。超过80%的放射性物质存在于甘油三酯中。在脾脏和肾脏中，游离脂肪酸和单甘油酯的 (14)C:(3)H 比值特别高。在肾脏中，60% 的 (14)C 以神经酸的形式存在于单甘油酯中，40% 存在于磷脂中，这表明形成的单神经酸被用于磷脂的生物合成。
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代谢/代谢物
喂食菜籽油（含 46.2% 芥酸）20 周的大鼠心脏鞘磷脂含量增加了 2 倍。高芥酸菜籽油喂养后，22:1 被掺入心磷脂 (5.6%) 和鞘磷脂 (10.5%) 中……
雄性Wistar大鼠连续20天饲喂芥酸。芥酸被掺入心脏和肝脏中的二磷脂酰甘油和鞘磷脂中。心脏中掺入三酰甘油和游离脂肪酸的芥酸水平高于肝脏。
一项利用正常对照组和Zellweger成纤维细胞培养的研究表明，过氧化物酶体在芥酸的链缩短（β-氧化）过程中发挥重要作用。
雄性Sprague-Dawley大鼠连续1周饲喂含有不同水平芥酸（22:1 n-9）的饲料。膳食中 22:1 n-9 含量的增加导致心肌脂质沉积显著增加，这可通过组织学评估以及心脏脂质中 22:1 n-9 的积累来证实；除饲喂高芥酸菜籽油（42.9% 22:1 n-9）外，心脏甘油三酯含量未见增加。
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芥酸 可轻易穿过血脑屏障 (BBB) [1]

相互作用
本研究旨在评估丙酰左旋肉碱预防芥酸诱导的心脏损伤的能力。将大鼠喂食普通饲料或添加10%芥酸的饲料，持续10天，同时腹腔注射或不注射丙酰左旋肉碱（1 mM/kg/天，持续10天）。芥酸饲料导致甘油三酯（从5.6 mg/gww增至12.4 mg/gww，P < 0.01）和游离脂肪酸（从2.0 mg/gww增至5.1 mg/gww，P < 0.01）水平升高，但磷脂水平无变化。用等容灌注法对心脏进行有氧灌注时，两组心脏的机械活动无差异。相反，在测定压力-容积曲线时，芥酸处理组大鼠心脏产生的压力降低。无论饮食如何，丙酰左旋肉碱治疗始终产生正性肌力作用。这伴随着线粒体呼吸的改善（RCI 5.1 vs 9.3，P < 0.01）、组织ATP含量的增加（10.3 vs 18.4 μmol/gdw，P < 0.01）和甘油三酯的减少（12.4 vs 8.0 mg/gww，P < 0.01）。这些数据表明，长期服用丙酰左旋肉碱能够预防芥酸诱导的心脏毒性，其机制可能是通过减少甘油三酯积累和改善能量代谢。
将24只雄性Wistar大鼠分为7组，每日喂食含0、5、10、15、25或30卡路里%菜籽油的饲料（芥酸的相对浓度分别为膳食脂肪的0%、5.5%、11.0%、16.5%、22.0%、27.5%和33.0%）。所有饲料均用葵花籽油补足至40卡路里%。分别于第3天、第6天和第32周处死每组8只动物。对每只动物的骨骼肌、心脏、膈肌和肾上腺进行显微镜检查。此外，对32周后处死的动物的甲状腺、睾丸、胰腺、脾脏、肝脏和肾脏进行了显微镜检查。生长：未观察到体重增加与芥酸处理之间存在明显关系。饲喂30%（卡路里）菜籽油的动物平均体重始终最低，方差分析显示，到试验结束时，这种差异几乎具有统计学意义。然而，饲喂20%和25%（卡路里）菜籽油的动物平均体重始终最高。未观察到体重与菜籽油处理之间存在明显关系。器官重量：对照组与至少饲喂15%（卡路里）菜籽油的动物之间存在一些显著差异。然而，未观察到与处理相关的明显差异。病理学：在3天或6天后处死的动物中，所有饲喂菜籽油的动物均表现出心脏、骨骼肌、膈肌和肾上腺的脂肪变性。脂肪变性的严重程度随菜籽油水平的增加而增加。未观察到其他异常。在32周后处死的动物中，各组动物的骨骼肌、甲状腺、胰腺或肝脏均未观察到与治疗相关的效应。肾脏观察到效应——肾小管轻微扩张，管腔内碎片增多。这些效应在最高剂量组中最为明显。肾上腺皮质细胞在10卡路里及以上剂量组出现增大，且增大程度随剂量增加而加重。心脏也观察到变化，包括轻微的脂质沉积、肌细胞溶解灶（显示单核细胞增生）、网状肌纤维鞘增厚、间质结缔组织成分增多以及Anitskow细胞聚集。这些效应的严重程度随菜籽油剂量增加而加重（尤其是在10卡路里以上剂量组）。在两只对照动物中也观察到了程度极轻的这些变化。断奶雌性Sprague-Dawley大鼠每日饲喂含有0.5%、5%、10%或20%以下脂肪/油的饲料：椰子油、黄油、牛油、猪油、橄榄油、菜籽油、棉籽油、玉米油、大豆油、葵花籽油……大鼠50日龄时，单次口服二甲基苯并[a]蒽（DMBA）。饲喂饲料持续4个月……除牛油组（80%）和菜籽油组（77%）外，所有组别中，20%剂量组的动物肿瘤发生率均超过85%……饲喂不饱和脂肪的动物肿瘤发生率往往更高……大多数肿瘤为腺癌。菜籽油
将8组（每组5只雄性Wistar大鼠）连续12天喂食含15%脂质的饲料（自由采食）。各处理组如下：BR+：高油菜籽酸（占脂质的28%），低钙（0.4%）；BR-：低油菜籽酸（占脂质的1.2%），低钙；BR+Ca：高油菜籽酸，高钙（9.2%）；BR-Ca：低油菜籽酸，高钙；ER+：高芥酸（占脂质的28%），低钙；ER-：低芥酸（占脂质的1.4%），低钙；ER+Ca：高芥酸，高钙；ER-Ca：高芥酸，高钙。各组剩余的脂质均以玉米油补充。各组在单独食物摄入量或体重增加方面均无显著差异。然而，若将体重增加与食物摄入量进行校正，结果显示，低钙组中油菜酸组的体重增加较少。芥酸组的体重增加不受影响。所有4个芥酸组的心脏甘油三酯和C22:1水平相似。与对照组大鼠相比，这些大鼠的心脏均表现出轻度脂质沉积……对于油菜酸组，低钙会降低心脏甘油三酯水平。此外，在两个高油菜酸组中，甘油三酯和C22:1心脏水平较高。
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非人类毒性值
大鼠口服LD50 >19431.7 mg/kg（基于亚油酸的相对密度0.0938）。
斑马鱼LC50 710 mg/L/96小时；条件：半静态。

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单独使用时，芥酸不会对大鼠的存活率或心脏收缩力产生负面影响[1]

[1]. The memory-enhancing effect of erucic acid on scopolamine-induced cognitive impairment in mice. Pharmacol Biochem Behav. 2016 Mar;142:85-90.

芥酸是一种二十二碳烯酸，在 C-13 位具有顺式双键。它主要存在于十字花科蔬菜中——是芥菜油和菜籽油的主要成分，西兰花、抱子甘蓝、羽衣甘蓝和紫罗兰也含有芥酸。它是芥酸的共轭酸。
据报道，芥酸存在于白芥（Sinapis alba）、琉璃苣（Borago officinalis）和其他有相关数据的生物体中。
芥酸是一种单不饱和极长链脂肪酸，具有22个碳原子的主链，其单双键位于甲基末端第9位，且为顺式构型。
另见：鳕鱼肝油（部分成分）。

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作用机制
芥酸的线粒体代谢产物抑制其他脂肪酸的线粒体氧化，尤其是在心脏中。这可以解释喂食含芥酸菜籽油的大鼠心脏中甘油三酯的积累。
通过提供芥酸肉碱酯（与棕榈酰肉碱进行比较），研究了芥酸对幼鼠心脏和肝脏线粒体氧摄取的影响。芥酰肉碱的存在显著抑制了棕榈酰肉碱的线粒体氧化。这些发现表明，芥酸的线粒体代谢产物抑制了其他脂肪酸的线粒体氧化，尤其是在心脏中，这导致了喂食菜籽油的大鼠心脏中甘油三酯的积累。/芥酰肉碱/
研究了高芥酸菜籽油 (HER) 与低芥酸菜籽油 (LER) 对大鼠肝脏脂肪酸氧化的影响。结果表明，给大鼠喂食芥酸（HER）会导致肝脏棕榈酸氧化能力下降，肝脏重量与日粮中芥酸含量以及芥酸喂食时间呈正相关。芥酸对长链脂肪酸氧化的抑制作用可能是由于芥酸掺入线粒体膜，干扰膜上的脂肪酰辅酶A转移系统，而不是由于线粒体中的β-氧化酶系统被直接抑制。

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治疗用途
/实验治疗/ 10名患有儿童肾上腺脑白质营养不良（ALD）的日本男孩、1名患有肾上腺脊髓神经病（AMN）的成年患者和2名无症状ALD男孩接受了超过12个月的膳食芥酸（C22:1）治疗；除一例儿童肾上腺脑白质营养不良症（ALD）患者在开始芥酸治疗7个月后死亡外，其余患者在芥酸治疗期间，血清中极长链脂肪酸（VLCFA）（C24:0/C22:0）水平在1-2个月内均有所下降，其中4例患者的VLCFA水平降至正常范围。所有10例儿童ALD患者的神经系统检查和MRI结果均显示，在接受饮食治疗期间，病情有所进展。然而，饮食治疗组患者从出现步态异常到进入植物状态的平均间隔时间显著长于未治疗组患者。1例肾上腺脑白质营养不良症（AMN）患者的痉挛性步态略有改善，下肢痉挛引起的疼痛也有所减轻。两名无症状的肾上腺脑白质营养不良症（ALD）男孩在开始饮食治疗后，临床检查和磁共振成像（MRI）结果分别维持了38个月和23个月。
/实验治疗/ 一名5岁患有肾上腺脑白质营养不良症的男孩，其视觉、精神和运动障碍的临床症状迅速进展，接受了由1份甘油三芥酸酯和4份甘油三油酸酯组成的洛伦佐油治疗。治疗5个月后，吞咽能力有所改善，脑部T2加权磁共振成像显示顶枕叶白质高信号区域消退。 /洛伦佐油/
/实验疗法/ 一项为期两年的开放性试验研究了油酸和芥酸（洛伦佐油）对肾上腺脊髓神经病的影响，受试者包括14名患有肾上腺脊髓神经病的男性、5名有症状的杂合子女性和5名患有临床前期肾上腺脊髓神经病的男孩。研究未发现饮食疗法对肾上腺脊髓神经病（极长链脂肪酸积累）患者具有临床意义的益处。/洛伦佐油/

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药物警告
研究人员对4名曾接受甘油三油酸酯和三芥酸酯油混合物（“洛伦佐油”）治疗的肾上腺脑白质营养不良患者的尸检组织进行了脑、肝和脂肪组织脂质分析，并与7名未经治疗的肾上腺脑白质营养不良患者和3名健康对照者进行了比较。饮食疗法似乎降低了血浆、脂肪组织和肝脏中饱和极长链脂肪酸的水平；但在四名患者中，仅有一名患者的脑组织中饱和极长链脂肪酸水平降低。尽管在停药12个月后，某些组织中仍存在大量的芥酸，但脑组织中的芥酸水平在任何时间点均未超过对照组。芥酸未能大量进入大脑可能是饮食疗法治疗肾上腺脑白质营养不良效果不佳的原因之一。/洛伦佐油/
40名男性和6名女性肾上腺脑白质营养不良患者接受了洛伦佐油（20%芥酸和80%油酸）治疗。其中19名患者的血小板计数显著下降。6名血小板减少症患者在停止摄入芥酸后2至3个月内血小板计数恢复正常。观察表明，需要大量补充芥酸的肾上腺脑白质营养不良症饮食管理策略可能与血小板减少症相关，而洛伦佐油中的芥酸成分是导致血小板减少症的原因。接受芥酸治疗的患者应密切监测血小板计数。/洛伦佐油：20%芥酸和80%油酸/
……本文报告了20例X连锁肾上腺脑白质营养不良症（ALD）患者在接受芥酸（C22:1）饮食治疗期间的生化和临床结果。其中6例患者病情非常严重，9例患者有较轻的神经系统症状，5例患者处于无症状期。肾上腺脑白质营养不良症（ALD）患者的血浆C26:0基础平均水平为1.41±0.48 μg/mL（对照组：0.33±0.12 μg/mL）。所有患者的C26:0水平均降至接近正常值。尽管生化指标反应良好且未出现持续的治疗副作用，但在临床随访期间未观察到令人鼓舞的数据。无症状患者在治疗1年多后仍无症状。然而，有症状的患者病情恶化或未见任何改善。
15名患有肾上腺脑白质营养不良症的男性和3名有症状的杂合子女性接受了油酸和芥酸（洛伦佐油）治疗。5名患者出现无症状性血小板减少症（血小板计数在37000至84000/mm³之间），但在停用芥酸后2至3周内恢复正常。此外，这5例患者长期（24至43个月）使用洛伦佐油治疗后出现淋巴细胞减少症。观察结果提示，长期使用洛伦佐油治疗肾上腺脑白质营养不良症可诱发严重的淋巴细胞减少症，并伴有免疫抑制和反复感染。洛伦佐油

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芥酸（顺式-13-二十二碳烯酸）是一种从萝卜（Raphanus sativus L.）种子中分离得到的单不饱和ω-9脂肪酸。[1]
它可以使X连锁肾上腺脑白质营养不良症（一种与痴呆相关的神经退行性疾病）患者大脑中极长链脂肪酸的积累恢复正常。[1]
其增强记忆和抗认知障碍的作用部分是通过激活PI3K-PKCζ-ERK-CREB信号通路并增加海马中磷酸化Akt的水平来实现的。[1]
在被动回避和Y迷宫任务中，其剂量-反应曲线呈倒U型，3 mg/kg为最佳剂量，10 mg/kg效果较差。[1]
它可能是一种治疗认知缺陷相关疾病的潜在药物，例如……阿尔茨海默病[1]

C22H42O2

338.5677

338.318

112-86-7

63541-50-4

5281116

White to off-white <28°C powder,>32°C liquid

0.9±0.1 g/cm3

386.1±0.0 °C at 760 mmHg

28-32 °C(lit.)

349.9±15.2 °C

0.0±1.8 mmHg at 25°C

1.468

9.82

37.3

1

2

19

24

284

0

O([H])C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C(/[H])=C(/[H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])=O

DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N

InChI=1S/C22H42O2/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18-19-20-21-22(23)24/h9-10H,2-8,11-21H2,1H3,(H,23,24)/b10-9-

(Z)-docos-13-enoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 100 mg/mL (~295.36 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.38 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.38 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。