COX-2 (IC50 = 1.1 μM); COX-1 (IC50 = 116 μM)

Etoricoxib，也称为 MK-0663，是一种选择性口服 COX-2 抑制剂。其对人全血中COX-2、COX-1和纯人COX-2的IC50值分别为1.1μM、116μM和5。 CHO (COX-2) 细胞产生的 IQ PGE2 (IC50, 79 nM)、去垢剂纯人 COX-2 (IC50, 4.1 μM) 和 U937 微粒体产生的纯化 PGE2 效果 (低底物; IC50, 12.1 μM) 分别为全部被依托考昔 (MK-0663) 抑制。另一方面，Etoricoxib (MK-0663) 的 Ki 值较低，为 167 μM，对 COX-1 的作用最小 [1]。

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我们在这里报告了Etoricoxib（MK-0663）[5-氯-2-（6-甲基吡啶-3-基）-3-（4-甲基磺酰基苯基）吡啶]的临床前特征，这是一种选择性抑制环氧化酶-2（COX-2）的新型口服活性剂，已开发用于在低底物浓度下使用全血测定和灵敏的COX-1酶测定进行体外高选择性。依他考昔在体外人体全血检测中选择性抑制COX-2，COX-2（LPS诱导的前列腺素E2合成）的IC（50）值为1.1+/-0.1微M，而COX-1（血液凝固后血清血栓素B2的产生）的IC值为116+/-8微M。使用IC（50）值之比（COX-1/CO-2），在人全血测定中，Etoricoxib抑制COX-2的选择性比为106，而罗非昔布、伐地昔布、塞来昔布、尼美舒利、依托度酸和美洛昔康的选择性比分别为35、30、7.6、7.3、2.4和2.0。在大多数测定条件下（IC（50）>100微M），Etoricoxib不抑制血小板或人重组COX-1。在用U937微粒体进行的COX-1高灵敏度测定中，花生四烯酸浓度降至0.1微M，依托昔布、罗非昔布、伐地昔布和塞来昔布的IC（50）值分别为12、2、0.25和0.05微M。这些效力差异与基于化合物延迟吲哚美辛时间依赖性抑制能力的测定所估计的与COX-1结合的解离常数（K（i））一致。

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人牙周膜（hPDL）成纤维细胞在牙周炎和正畸牙齿移动过程中起着重要作用，介导牙周炎症、破骨细胞生成和胶原蛋白合成。高COX-2选择性非甾体抗炎药Etoricoxib具有良好的全身副作用和较高的镇痛效果，特别是对于正畸疼痛。在这项体外研究中，我们在正畸牙齿移动过程中发生的模拟正畸压缩应变模型中，研究了两种临床相关的Etoricoxib浓度对机械应变hPDL成纤维细胞表达模式和相关破骨细胞生成的可能副作用。hPDL成纤维细胞孵育72小时 h在生理条件下与依曲考昔在0 μM, 3.29 μM，5.49 μM，对应于临床正常和亚毒性剂量，在最终48小时内有和没有压缩机械应变（2 g/cm2） h、 模拟正畸牙齿在牙周韧带受压区域移动的条件。然后，我们通过RT-qPCR、ELISA和Western blot分析确定COX-2、IL-6、PG-E2、RANK-L、OPG、ALPL、VEGF-A、P4HA1、COL1A2和FN1的基因和/或蛋白质表达，并通过FACS、MTT和LDH测定确定凋亡、坏死、细胞存活率和细胞毒性。此外，在与RAW267.4细胞共培养72小时后，通过TRAP染色评估hPDL成纤维细胞介导的破骨细胞生成 h.施加的机械压缩应变显著诱导了所有评估因素的基因和蛋白质表达。依他考昔为3.29 μM和5.49 μM显著抑制PG-E2合成，但不抑制COX-2和IL-6基因表达，也不抑制RANK-L-/OPG介导的破骨细胞生成或血管生成（VEGF-A）。相比之下，细胞外基质重塑（COL1A2、FN1）和骨合成代谢（ALPL）在5.49时受到显著刺激 μM.一般来说，未检测到依托昔布对hPDL成纤维细胞在凋亡、坏死、细胞活力或细胞毒性方面的不良影响。临床给药的依托考昔，即一种高度选择性的COX-2抑制剂，在模拟正畸压缩应变期间对hPDL成纤维细胞介导的牙周炎症、细胞外基质重塑、RANK-L/OPG表达和破骨细胞生成没有实质性影响[4]。

在大鼠中，角叉菜胶引起的爪水肿、角叉菜胶引起的爪痛过敏和内毒素引起的发热均受到Etoricoxib/依托考昔 (MK-0663)（0.1-30 mg/kg，口服）的剂量依赖性抑制。在大鼠痛觉过敏模型中，Etoricoxib/依托考昔（≥10 mg/kg）完全逆转痛觉过敏反应。大鼠尿液中 51Cr 的排泄不受依托考昔 (MK-0663) 200 mg/kg/天的影响，猴子也不受该药物 100 mg/kg/天的影响 [1]。 50 和 100 mg/kg 的 etoricoxib (MK-0663) 可有效降低大鼠谷胱甘肽还原酶 (GSHRd) 和总谷胱甘肽 (tGSH) 的水平，而有效提高丙二醛 (MDA) 和髓过氧化物酶 (MPO) 的水平。剂量为 100 mg/kg 的 etoricoxib (MK-0663) 可显着抑制大鼠 NO 的减少 [2]。患有 1,2-二甲基肼二盐酸盐 (DMH) 诱导的大量斑块病变、增生和发育不良的大鼠可以受益于依托考昔 (MK-0663)（0.64 mg/kg，口服）[3]。

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依他考昔是角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀（ID（50）=0.64mg/kg）、角叉菜聚糖诱导的足痛觉过敏（ID（50中）=0.34mg/kg）、LPS诱导的发热（ID（中）=0.88mg/kg）和佐剂诱导的关节炎（ID（下）=0.6mg/kg/天）模型中的强效抑制剂，在200mg/kg/天的剂量下持续10天，对胃肠道通透性没有影响。在松鼠猴中，与较低剂量的双氯芬酸或萘普生相比，依他考昔以3mg/kg的剂量在给药后2小时内将LPS诱导的发热逆转了81%，在100mg/kg/天的胃病粪便51Cr排泄模型中持续5天没有效果。总之，依托考昔是一种新型药物，在体外人体全血检测中以106倍的选择性选择性选择性抑制COX-2，与其他报道的选择性药物相比，对COX-1的抑制效力最低。[1]

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50和100 mg/kg剂量的依他考昔改变了氧化剂/抗氧化剂参数的水平，如MDA、MPO、tHSH、GSHRd、GST、SOD、NO和8-OH/Gua，有利于抗氧化剂。此外，Etoricoxib可防止COX-2基因表达和ALT和AST水平的升高。依托考昔对大鼠肝脏I/R的这种重要保护作用可以在临床环境中进行测试。[2]

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在本研究中，我们评估了非甾体抗炎药Etoricoxib对1,2-二甲基肼二盐酸盐（DMH）诱导的结肠病变发展中增殖和凋亡的影响。雄性SD大鼠分为四组：第1组对照组接受溶媒治疗；第2组每周单独皮下注射DMH（30mg/kg体重）；第3组，每周服用DMH，每天服用Etoricoxib（0.64 mg/kg体重，口服）；第4组，单独使用依托昔布。治疗六周后，处死动物，分析结肠的形态和组织病理学特征。在DMH治疗组中发现了特征明显的肿瘤前异常，如多发性斑块病变、增生和发育不良，而联合使用依托昔布后这些特征有所减少。为了研究细胞凋亡，通过金属螯合从结肠囊中分离出结肠细胞，通过荧光染色进行研究，并通过DNA断裂进一步证实。与对照组相比，DMH处理的动物凋亡细胞核较少，但DMH+依托立考昔和单独使用Etoricoxib的数量更高。通过蛋白质印迹分析和免疫组织化学评估，发现DMH治疗组增殖细胞核抗原（PCNA）的表达升高，依托昔布再次降低。溴脱氧尿苷掺入（BrdU）的结果一致。可以得出结论，药物Etoricoxib具有在结肠中作为抗凋亡和抗增殖剂的潜力[3]。

实验设计[4]
密度为2英寸70000个细胞 将混合的hPDL成纤维细胞（第3-5代）接种到6孔细胞培养板上。对于RT-qPCR分析以及LDH/MTT分析，将6个实验组中的hPDL成纤维细胞分别与0 μM（对照），3.29 μM，或5.49 μMEtoricoxib/依曲考昔72 h、 对应于人体正常和亚毒性临床给药期间PDL中达到的假设局部浓度，有或没有（每块板3/3孔）2的压缩机械应变 克/平方厘米，48 24小时后 h根据已发布和完善的压缩正畸机械应变模拟方案，通过玻璃盘进行预孵育阶段（图1（a））。对7个（N=7）进行RANK-L蛋白质印迹，对6个（N=2，N=6）进行ELISA，对3个（N=3，N=6，）生物重复进行FACS分析（图1（b））。

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LDH测定评估细胞毒性[4]
根据制造商的说明使用市售乳酸脱氢酶（LDH）测定法。 100 μl新制备的LDH溶液（22μl催化剂与1 ml染料）加入到100 μl上清液，在室温下避光孵育30分钟 添加50之前的分钟 μl终止溶液。使用ELISA读数器测量LDH活性（490处的吸光度 nm），减去690处的背景吸光度 nm.

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MTT法评估细胞活力（线粒体酶活性）[4]
对于MTT（3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四氮唑溴化物）测定，400 在孵育的最后五个小时，每孔加入μl MTT PBS溶液（5mg/ml）。之后，删除1 每孔加入ml DMSO，在37°C下继续孵育5分钟 在550℃下测量最终吸光度（细胞存活率）的最小值 nm，用ELISA阅读器。

实验分组[2]
实验动物分为四组：肝脏缺血/再灌注对照组（LIRC）、50 mg/kg依托考昔+肝脏缺血/再灌注组（ETO-50）、100 mg/kg依托考昔+肝脏缺血/再灌注组（ETO-100）和健康假手术组（HG）。

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药理学和手术操作[2]
在硫喷妥钠麻醉前1小时，ETO-50组灌胃给予50 mg/kg依托考昔，ETO-100组灌胃给予100 mg/kg依托考昔，而LIRC组和HG组则以相同方式灌胃给予蒸馏水。在麻醉状态下，于腹部前部做3.5-4 cm长的纵向切口进行开腹手术。随后，除HG组外，其余各组大鼠均被夹闭肝动脉，以造成完全肝脏缺血，缺血1小时，再灌注6小时。实验结束后，各组大鼠均被注射大剂量麻醉剂处死，并测定肝组织中MDA、MPO、tGSH、GSHRd、GST、SOD、NO和8-OH/Gua等氧化/抗氧化指标以及COX-2基因表达水平。同时测定ALT和AST的血液值。将ETO-50组和ETO-100组的结果与LIRC组和HG组的结果进行比较和评估。

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治疗方案 [3]
将动物分为以下几组，每组 4 至 6 只：对照组，每周皮下注射载体（1mM EDTA 生理盐水），每日口服 0.5% 羧甲基纤维素；DMH 组，每周皮下注射 DMH，剂量为 30 mg/kg 体重，此剂量方案此前已在本实验室建立（Kanwar 等，2008）——DMH 用 1mM EDTA 生理盐水新鲜配制，并用稀 NaOH 溶液将 pH 值调节至 7.0；DMH + 依托考昔组，每日口服依托考昔，剂量为治疗性抗炎剂量（大鼠 ED50 为 0.64 mg/kg 体重），同时每周注射 DMH（Riendeau 等，2001）。依托考昔组：每日口服给予依托考昔（0.64 mg/kg 体重）。该抗炎剂量此前已在角叉菜胶诱导的大鼠后爪水肿模型中确定（Sharma 等，2010）。六周后，动物禁食过夜，但可自由饮水，并在第二天处死。所有组别的动物每周记录一次体重，直至实验结束。

吸收、分布和排泄
口服后生物利用度为100%。

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代谢/代谢物
主要通过CYP3A4在肝脏代谢。
依托考昔已知的代谢物包括依托考昔1'-N'-氧化物和6-羟甲基依托考昔。

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生物半衰期
22小时

蛋白结合率
92%

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妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
依托考昔尚未获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 的上市批准，但在其他国家/地区有售。目前尚无关于哺乳期使用依托考昔的信息。由于其蛋白结合率高达 92%，因此乳汁中的含量可能非常低。一些指南建议哺乳期妇女避免使用依托考昔，因为缺乏相关数据。尤其是在哺乳新生儿或早产儿时，建议选择其他替代药物。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

[1]. Etoricoxib (MK-0663): preclinical profile and comparison with other agents that selectively inhibit cyclooxygenase-2. J Pharmacol Exp Ther. 2001 Feb;296(2):558-66.

[2]. The Effect of Etoricoxib on Hepatic Ischemia-Reperfusion Injury in Rats. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:598162.

[3]. Anti-proliferative and apoptotic effects of etoricoxib, a selective COX-2 inhibitor, on 1,2-dimethylhydrazine dihydrochloride-induced colon carcinogenesis. Asian Pac J Cancer Prev. 2010;11(5):1329-33.

[4]. Effects of the Highly COX-2-Selective Analgesic NSAID Etoricoxib on Human Periodontal Ligament Fibroblasts during Compressive Orthodontic Mechanical Strain. Mediators Inflamm. 2019 Mar 10;2019:2514956.

依托考昔属于联吡啶类化合物，其结构为2,3'-联吡啶，在3、5和6'位分别被4-(甲磺酰基)苯基、氯和甲基取代。它是一种环氧合酶-2抑制剂和非甾体类抗炎药。它是一种砜类化合物，属于联吡啶类化合物，也是一种有机氯化合物。
依托考昔是一种新型的COX-2选择性抑制剂。目前的治疗适应症包括：类风湿性关节炎、骨关节炎、强直性脊柱炎、慢性腰痛、急性疼痛和痛风。与其他COX-2选择性抑制剂一样，依托考昔选择性抑制环氧合酶2 (COX-2) 同工酶，从而减少花生四烯酸生成前列腺素 (PGs)。依托考昔已在全球60多个国家获批，但尚未在美国获批。
依托考昔是一种合成的非甾体抗炎药（NSAID），具有解热、镇痛和潜在的抗肿瘤作用。依托考昔特异性地结合并抑制环氧合酶-2（COX-2），从而抑制花生四烯酸转化为前列腺素。抑制COX-2可能诱导细胞凋亡，并抑制肿瘤细胞增殖和血管生成。
依托考昔是一种砜和吡啶衍生物，可作为环氧合酶-2抑制剂。它被用作非甾体抗炎药，用于治疗类风湿性关节炎和强直性脊柱炎引起的疼痛。它还可用于短期治疗中度术后牙痛。

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药物适应症
用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、强直性脊柱炎、慢性腰痛、急性疼痛和痛风。

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作用机制
与其他COX-2选择性抑制剂一样，依托考昔选择性抑制环氧合酶2 (COX-2) 同工酶，从而阻止花生四烯酸生成前列腺素 (PG)。

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药效学
依托考昔是一种COX-2选择性抑制剂（对COX-2的抑制选择性比对COX-1的抑制选择性高约106倍）。

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用于评估依托考昔对肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用的血液ALT和AST活性是评估中最常用的参数。肝功能方面，Tuncer等人报道，肝脏缺血/再灌注（I/R）损伤期间ALT和AST水平升高。实验也表明，I/R引起的肝脏氧化损伤会导致ALT和AST显著升高。肝脏I/R损伤中产生的自由基被认为是导致ALT和AST活性升高的原因。与LIRC组相比，依托昔布组的ALT和AST活性显著降低，且非常接近基线值。这表明，依托昔布组大鼠的肝功能与LIRC组相比差异更大。总之，依托昔布可预防I/R引起的肝脏氧化损伤。LIRC组的氧化剂/抗氧化剂平衡向氧化剂倾斜，而依托昔布组的氧化剂/抗氧化剂平衡向抗氧化剂倾斜。此外，依托昔布改善了I/R引起的肝功能障碍。这些信息表明，依托考昔可能有助于预防临床缺血/再灌注过程中可能出现的损伤。[2]近年来，在细胞生长、分化、增殖和凋亡的背景下，癌基因、抑癌基因和恶性肿瘤之间存在着密切联系（Evan 和 Vousdan，2001）。在本研究中，我们试图评估特异性 COX-2 抑制剂依托考昔对 DMH 诱导的大鼠结肠癌模型中基因组 DNA 状态、增殖标志物（PCNA 和 BrdU）以及细胞凋亡的影响。组织病理学检查显示，DMH 处理的大鼠出现明显的异型增生和增生，并且在 MPL 上也观察到形态学上可识别的肿瘤生长。口服依托昔布可显著减弱这些特征，表明其在当前剂量下作为化学预防剂的有效性，疗程为六周，这可被视为致癌作用的早期阶段（Tanwar et al., 2009; Sharma et al., 2010）。由于增殖是肠道发育和正常功能的关键事件，多项动物研究表明，DMH诱导的实验性结肠肿瘤起源于上皮细胞，并导致结肠隐窝细胞增多和结肠隐窝细胞增殖（Richards, 1977; Heitman et al., 1983）。细胞在细胞周期的S期和G2期表达PCNA，使其成为良好的细胞增殖标志物。它还积极参与多种与哺乳动物细胞的生死相关的分子通路（Paunesku et al., 2001）。除了降低MPL的发生率和组织病理学改变外，PCNA免疫组化和荧光染色结果表明，依托考昔分别抑制了癌细胞的增殖和凋亡。数据表明，与对照组相比，DMH处理组动物的细胞未发生凋亡，而同时给予依托考昔则增加了凋亡细胞的数量。已有报道指出，非甾体抗炎药（NSAIDs）如舒林酸硫化物在培养细胞中的抗增殖和促凋亡作用之间应存在平衡，并且凋亡细胞可能强烈表达增殖标志物Ki-67和PCNA（Qias等，1997）。此外，特异性COX-2抑制剂NS-398也被报道可降低MC-26细胞系的增殖（Yao等，2004）。这种效应与PCNA的减少有关，从而增强了DNA聚合酶的分子伴侣作用。有趣的是，美洛昔康还能下调HepG2细胞系（肝细胞癌细胞）中的PCNA和细胞周期蛋白A，从而抑制细胞增殖（Li et al., 2006）。BrdU是一种胸苷类似物，在细胞周期的S期掺入正常细胞和恶性细胞后，可用单克隆抗体检测，并且与胸苷放射自显影相比具有多项优势（Ma et al., 2002）。BrdU免疫组织化学染色显示，仅DMH处理的动物细胞增殖最为显著。由于BrdU被认为是在细胞分裂的S期掺入细胞的，因此，通过了解BrdU阳性细胞的百分比，可以很容易地推导出增殖指数。此外，DMH处理组细胞中BrdU阳性细胞数量最多，其次是依托考昔处理组。依托考昔联合治疗后凋亡细胞数量增加和DNA片段化，表明非甾体抗炎药在结肠癌中具有促凋亡作用。总之，我们的数据表明，DMH处理组动物体内增殖标志物PCNA和BrdU的表达强烈提示在6周内癌变早期阶段发生了增殖事件。然而，依托考昔通过显著下调这些抗原的表达，对DMH和依托考昔联合治疗组动物表现出抗增殖作用。同样，DMH处理的动物体内细胞凋亡减少，而依托考昔则能恢复这种效应[3]。

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基于我们的结果，依托考昔（一种高选择性COX-2抑制剂）在细胞培养基浓度与临床给药剂量相当，且在牙周膜内局部组织浓度也与临床给药剂量相当的情况下，对模拟正畸加压过程中hPDL成纤维细胞介导的牙周炎症、细胞外基质重塑、RANK-L/OPG表达以及破骨细胞生成没有显著影响。由于其副作用较少且镇痛效果显著，尤其对正畸疼痛有效，因此依托考昔可能是一种有效的正畸治疗镇痛药[4]。

C18H15N2O2SCL

358.8419

358.054

C, 60.25; H, 4.21; Cl, 9.88; N, 7.81; O, 8.92; S, 8.94

202409-33-4

Etoricoxib-d4;1131345-14-6; 202409-40-3; Etoricoxib-13C,d3;2748267-73-2;Etoricoxib-d3;850896-71-8

123619

Light yellow to yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

510.0±50.0 °C at 760 mmHg

134-135°C

262.2±30.1 °C

0.0±1.3 mmHg at 25°C

1.601

2.21

68.3

0

4

3

24

514

0

O=S(C1=CC=C(C2=CC(Cl)=CN=C2C3=CC=C(C)N=C3)C=C1)(C)=O

MNJVRJDLRVPLFE-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C18H15ClN2O2S/c1-12-3-4-14(10-20-12)18-17(9-15(19)11-21-18)13-5-7-16(8-6-13)24(2,22)23/h3-11H,1-2H3

5-Chloro-6'-methyl-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]-2,3'-bipyridine

L-791456, L791456, Etoricoxib; 202409-33-4; Arcoxia; Tauxib; 5-Chloro-6'-methyl-3-(4-(methylsulfonyl)phenyl)-2,3'-bipyridine; Etoricoxibe; Etropain; Torcoxia; L 791456, MK-0663, MK 0663, MK0663; Arcoxia

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~278.68 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.97 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。