Xanthine oxidase (XO) (Ki = 0.6 nM)

Ki 和 Ki' 值分别为 0.6 nM 和 3.1 nM，显示出对氧化型和还原型黄嘌呤氧化酶的抑制作用，非布索坦对纯牛乳黄嘌呤氧化酶的活性表现出强烈的混合型抑制作用[1]。

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嘌呤类似物别嘌呤醇作为黄嘌呤氧化酶（XO）抑制剂在治疗高尿酸血症和痛风方面的临床应用已有30多年。然而，由于与嘌呤化合物结构相似，别嘌呤醇及其主要活性产物氧嘌呤醇及其各自的代谢产物抑制了参与嘌呤和嘧啶代谢的其他酶。非布索坦（TEI-6720，TMX-67）是一种强效的XO非嘌呤抑制剂，目前正在进行临床评估，用于治疗高尿酸血症和痛风。在这项研究中，我们研究了非布索坦对嘌呤和嘧啶代谢中几种酶的影响，并表征了非布索坦抑制XO活性的机制。非布索坦对纯化牛乳XO的活性表现出强烈的混合型抑制作用，Ki和Ki'值分别为0.6和3.1 nM，表明对氧化和还原形式的XO都有抑制作用。相比之下，在高达100μM的浓度下，非布索坦对以下嘌呤和嘧啶代谢酶的活性没有显著影响：鸟嘌呤脱氨酶、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶、乳清酸磷酸核糖基转移酶和乳清酸-5'-单磷酸脱羧酶。这些结果表明，非布索坦是一种有效的非嘌呤选择性XO抑制剂，可用于治疗高尿酸血症和痛风[1]。

与果糖+P大鼠相比，给予高果糖饮食（即60%果糖）8周的大鼠在给予非布索坦（5-6mg/kg；即，每天一次，持续 4 周）。然而，给予正常饮食的大鼠单独使用非布索坦治疗并没有表现出明显的效果[2]。在患有或不患有并发高尿酸血症的 5/6 Nx（5/6 肾切除术）大鼠中，非布索坦（3-4 mg/kg；口服；每天 4 周）联合氧酸（750 mg/kg；口服灌胃；每天 4 周）周）可预防肾损伤[3]。非布索坦（2.5 mg/kg；口服；每天服用，持续 12 周）可降低动脉粥样硬化动物主动脉壁中 ROS 的含量，并防止 ApoE−/− 小鼠中斑块的形成[4]。 fruxostat（15.6 mg/kg；口服；每天一次，持续 21 天）的抗抑郁作用通过小鼠强迫游泳试验 (FST) 中不动时间的大幅减少得到证实 [5]。当与多柔比星（10 mg/kg；口服；每日给药，持续 21 天）联合给药时，fruxostat（10 mg/kg；口服；口服；每日给药，持续 21 天）显着降低肾毒性指标和炎症介质，将氧化应激生物标志物水平恢复至正常，并抑制肾 caspase-3 的表达[6]。

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果糖摄入增加与高尿酸血症、代谢综合征和肾损伤有关。本研究评估了非布索坦（Fx），一种研究性非嘌呤和选择性黄嘌呤氧化酶抑制剂，是否可以缓解代谢综合征的特征以及高果糖饮食引起的大鼠肾脏血流动力学改变和传入动脉病变。两组大鼠喂食高果糖饮食（60%果糖）8周，两组接受正常饮食。对于每种饮食，一组在最后4周（即代谢综合征发作后）服用Fx（5-6mg/kg（-1）.天（-1）的饮用水），另一组不接受治疗（安慰剂；P）。每天测量体重。在基线、4周和8周时测量收缩压和空腹血浆尿酸（UA）、胰岛素和甘油三酯。研究结束时，对肾脏血流动力学和组织形态学进行了评估。高果糖饮食与高尿酸血症、高血压以及血浆甘油三酯和胰岛素升高有关。与果糖+P相比，果糖+Fx大鼠的血压、UA、甘油三酯和胰岛素显著降低（所有比较均P<0.05）。此外，与果糖+P大鼠相比，果糖+Fx大鼠的肾小球压力、肾血管收缩和传入小动脉面积显著降低。对正常饮食的大鼠进行Fx治疗没有显著影响。总之，代谢综合征大鼠血浆UA与Fx的正常化缓解了代谢和肾小球血流动力学和形态学改变。这些结果为高尿酸血症在果糖介导的代谢综合征中的致病作用提供了进一步的证据。[2]

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结果：与5/6 Nx+V+P相比，5/6 Nx+OA+P大鼠出现了高尿酸血症、肾血管收缩和肾小球高血压，与传入动脉病变的进一步加重有关。Fx预防了5/6 Nx+OA+Fx大鼠的高尿酸血症，改善了5/6 Nx+V+Fx和5/6 Nx+OA+Fx组的蛋白尿，保护了肾功能，预防了肾小球高血压。功能改善伴随着传入小动脉形态的保留和肾小管间质纤维化的减少。 结论：Fx可预防5/6 Nx大鼠合并和不合并高尿酸血症的肾损伤。由于Fx有助于保持肾小球前血管形态，即使在存在全身性高血压的情况下，正常的肾小球压力也得以维持。[3]

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动脉粥样硬化是一种由动脉壁脂质沉积引起的慢性炎症性疾病。多种机制参与炎症过程，包括氧化应激。黄嘌呤氧化酶（XO）是活性氧（ROS）的主要来源，与动脉粥样硬化的发病机制有关，但其潜在机制尚不清楚。在这里，我们发现ApoE（-/-）小鼠动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞和主动脉内皮细胞中的XO表达增强，并且强效XO抑制剂非布索坦抑制了ApoE（//-）小鼠的斑块形成，降低了动脉ROS水平，改善了内皮功能障碍，而不影响血浆胆固醇水平。在体外，非布索坦抑制了胆固醇晶体诱导的小鼠巨噬细胞中ROS的形成和炎性细胞因子的释放。这些结果表明，在动脉粥样硬化斑块中，XO介导的ROS形成是促炎的，非布司他对XO的抑制是动脉粥样硬化的一种潜在治疗方法。[4]

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别嘌呤醇和非布索坦表现出显著的抗抑郁样作用，与对照组相比，FST小鼠的不动期缩短。别嘌呤醇和非布索坦的疗效与氟西汀相当。 结论：别嘌呤醇和非布索坦具有明显的抗抑郁作用。[5]

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西地那非和非布索坦可预防阿霉素诱导的肾毒性；然而，确切的机制仍有待阐明。研究了西地那非和非布索坦对阿霉素诱导的大鼠肾毒性的影响。雄性大鼠被分为九组。第一组作为正常对照组，第二组接受50%二甲亚砜（DMSO）治疗，第三组接受阿霉素（3.5mg/kg，i.p.）治疗，每周两次，持续3周。接下来的3组分别每天服用西地那非（5mg/kg；口服）、非布索坦（10mg/kg；口服）及其组合，持续21天。最后3组接受阿霉素与西地那非、非布索坦或其组合的联合治疗。通过光学显微镜进行组织病理学评估，并通过测量以下参数进行生化评估：肾功能生物标志物[血清尿素、肌酐和尿酸水平]，氧化应激生物标志物[GSH和MDA的肾脏含量]，凋亡标志物即；肾组织中的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3和炎症介质肿瘤坏死因子α（TNF-α）。阿霉素诱导肾毒性标志物、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达显著升高，并诱导炎症和氧化应激。肾脏的组织学变化为肾小管坏死。西地那非和/或非布索坦与阿霉素联合给药后，肾毒性标志物和炎症介质显著降低，氧化应激生物标志物恢复正常值，并阻碍肾脏半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达。它们还改善了阿霉素诱导的组织学变化。西地那非和非布索坦通过改善阿霉素诱导的生化、炎症、组织病理学和免疫组织化学改变，是对抗阿霉素肾毒性的有前景的保护剂[6]。

酶活性测定[1]
所有酶活性测定均使用日立分光光度计（型号U-3200）进行，该分光光度仪带有6细胞定位器，细胞温度保持在25°C。对于所有测定，在具有1.0-cm光路的3-mL池中，反应混合物的最终体积为2.5mL。

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XO检测[1]
该测定如前所述进行（Osada等人，1993）。反应混合物含有0.1 M磷酸钠缓冲液（pH 7.4）、黄嘌呤（2.5-20μM）和XO（1.1μg蛋白质）。通过加入酶开始反应，在292 nm处形成尿酸（黄嘌呤→尿酸）。酶活性计算为反应初始线性部分每分钟每毫克蛋白质形成的μmol尿酸。计算中使用的尿酸的摩尔消光系数（Δɛ292）为10923 M−1cm−1。当研究非布索坦对XO活性的抑制作用时，黄嘌呤的浓度在2.5至20μM之间变化，非布索他汀的浓度在0至1.5 nM之间。抑制机制由Lineweaver-Burk图确定，Ki和Ki'值分别由Dixon图和1/V轴截距重样计算。

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鸟嘌呤脱氨酶测定[1]
该测定程序基于Lewis和Glantz（1974）的工作。反应混合物含有0.2 M磷酸钠缓冲液（pH 7.0）、15μM鸟嘌呤[底物浓度接近12.5μM的米氏常数（Glantz和Lewis，1978）]和鸟嘌呤脱氨酶（0.4μg蛋白质）。充分混合后，在246 nm处监测鸟嘌呤（鸟嘌呤→黄嘌呤）的消耗。在反应的初始线性部分，酶活性以每分钟每毫克蛋白质形成的nmol黄嘌呤计算。计算中使用的黄嘌呤的摩尔消光系数（Δɛ246）为5662 M−1cm−1。

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HGPRT测定[1]
HGPRT活性的测定方法是对Giacomello和Salerno（1978）方法的改进。反应混合物含有50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）、2 mM MgCl2、0.5 mM PRPP、1 mM DTT、10μM次黄嘌呤[接近7.7μM米氏常数的底物浓度（Giacomello和Salerno，1978）]和HGPRT（7.1μg蛋白质）。充分混合后，监测肌苷-5′-单磷酸（IMP）（次黄嘌呤→IMP）形成导致的245 nm处吸光度的增加。在反应的初始线性部分，使用IMP的摩尔消光系数（Δɛ245）1657 M−1cm−1，以每分钟每毫克蛋白质形成的nmol IMP计算酶活性。

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PNP测定[1]
该测定采用Stoeckler和Parks（1985）描述的方法进行。反应混合物含有0.5 M磷酸钾缓冲液（pH 7.5）、50μM鸟苷[接近32μM米氏常数的底物浓度（Stoeckler和Parks，1985）]、1 mM DTT和PNP（0.8 mg蛋白质）。充分混合后，监测了由于鸟苷的消耗而导致的258 nm处吸光度的降低（鸟苷→鸟嘌呤）。酶活性计算为反应初始线性部分每分钟每毫克蛋白质形成的μmol鸟嘌呤。本次计算中使用的鸟嘌呤的摩尔消光系数（Δɛ258）为5911 M−1cm−1。

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OPRT检测[1]
利用Lieberman等人（1955）的方法的改进来测定OPRT活性。反应混合物含有50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、2 mM MgCl2、1 mM DTT、15μM OA[接近15.4μM米氏常数的底物浓度（Shostak等人，1990）]、0.5 mM PRPP和OPRT（4.7μg蛋白质）。充分混合后，监测295 nm处光密度的降低，反映OA的消耗（OA→OMP）。在反应的初始线性部分，酶活性以每分钟每毫克蛋白质形成的OMP nmol计算。OMP（2997 M−1 cm−1）的摩尔消光系数（Δɛ295）用于计算酶活性。

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OMPDC测定[1]
OMPDC活性测定采用Lieberman等人（1955）方法的改进进行。反应混合物含有50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、1 mM DTT、10μM OMP[接近6μM米氏常数的底物浓度（Shostak等人，1990）]和OMPDC（10μg蛋白质）。充分混合后，监测285nm处吸光度的降低，反映了OMP的消耗[OMP→尿苷-5′-单磷酸盐（UMP）]。在反应的初始线性部分，酶活性以每分钟每毫克蛋白质形成的nmol UMP计算。UMP（2285M-1cm-1）的摩尔消光系数Δɛ285用于计算酶活性。

对四组雄性Sprague-Dawley大鼠（每组n = 10；290–350 g）进行了为期8周的研究。两组（正常组）饲喂常规饲料，另外两组（果糖组）饲喂60%果糖饲料以诱导代谢综合征的发生。饮食组成详情见表1。4周后，在正常饮食组（normal+Fx）和果糖饮食组（frusesose+Fx）中，分别于饮用水中添加非布司他（Fx）（50 mg/L；约5–6 mg·kg⁻¹·day⁻¹），持续4周。相应的安慰剂（P）对照组（normal+P和fruses+P）未接受任何治疗，仅在饮用水中添加额外量的氯化钠（5.84 mg/L，以维持与含Fx组相同的盐浓度），持续4周。[2]

5–6 mg/kg/天

大鼠

吸收
口服后，约85%的非布司他被迅速吸收。达峰时间（Tmax）为1至1.5小时。每日一次口服给药后，40 mg非布司他剂量下的血药峰浓度（Cmax）约为1.6 ± 0.6 mcg/mL，80 mg非布司他剂量下的血药峰浓度约为2.6 ± 1.7 mcg/mL。高脂饮食使Cmax降低49%，曲线下面积（AUC）降低18%，但非布司他降低血清尿酸浓度的能力无临床意义上的显著变化。
消除途径
非布司他主要通过肝脏和肾脏途径消除。口服80 mg放射性标记的非布司他后，约49%的剂量从尿液中排出。在尿液中，回收的药物剂量中约 3% 为原形非布司他，30% 为酰基葡萄糖醛酸苷代谢物，13% 为氧化代谢物及其结合物，3% 为未鉴定的代谢物。粪便中回收的药物剂量约占总剂量的 45%，其中 12% 为原形药物，约 1% 为酰基葡萄糖醛酸苷代谢物，25% 为氧化代谢物及其结合物，7% 为未鉴定的代谢物。
分布容积
非布司他的表观稳态分布容积 (Vss/F) 为 29 至 75 L，表明其分布容积为低至中等。
清除率
单次口服10至240 mg后，平均表观总清除率范围为10至12 L/h。

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代谢/代谢物
非布司他主要在肝脏中通过UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGT）和细胞色素P450（CYP）酶代谢，但每种酶同工酶在非布司他代谢中的相对贡献尚未完全阐明。UGT1A1、UGT1A3、UGT1A9和UGT2B7介导非布司他的结合，生成酰基葡萄糖醛酸苷代谢物，约占总给药剂量的22%至44%。 CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9 和非 P450 酶负责氧化反应，该反应占药物剂量代谢的 2-8%。氧化反应生成 67M-1、67M-2 和 67M-4，它们是具有药理活性的代谢物。67M-1、67M-2 和 67M-4 可进一步发生葡萄糖醛酸化和硫酸化。羟基代谢物在人血浆中的浓度远低于母体药物。

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生物半衰期
表观平均末端消除半衰期约为 5 至 8 小时。

肝毒性
据报道，接受非布司他治疗的患者中，2%至13%（平均约3.5%）出现肝功能异常，但通常程度较轻至中度，且具有自限性。这些异常的程度、性质和出现时间尚未明确。然而，尽管未报告黄疸或急性肝炎病例，肝功能异常升高仍是临床试验中因不良事件而停用非布司他的主要原因（约2%）。自非布司他获批并广泛应用以来，已有数例肝损伤个案报道。大多数病例的特征是血清转氨酶升高，但无黄疸，且在开始服用非布司他后数日内出现，包括DRESS综合征背景下的酶升高。至少有一例混合性胆汁淤积性肝炎，无免疫过敏特征，在治疗数月后出现。非布司他产品说明书列出了肝脂肪变性、肝炎和肝肿大等潜在副作用。此外，药物警戒数据库已报告了数例非布司他治疗期间发生的急性肝衰竭病例。另一种不相关的非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂（苯溴马隆）因其潜在的肝毒性而未获准在美国使用。

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妊娠和哺乳期用药
◉哺乳期用药概述
目前尚无关于哺乳期使用非布司他的信息。由于非布司他与血浆蛋白的结合率超过99%，因此其在乳汁中的含量可能很低。此外，口服生物利用度仅约为50%，因此预计婴儿全身吸收的药物量非常少。如果母亲需要使用非布司他，则无需停止哺乳；但是，在获得更多数据之前，可能更倾向于选择其他药物。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合 非布司他与血浆蛋白的结合率约为 99.2%，主要与白蛋白结合。在 40 mg 和 80 mg 剂量下达到的浓度范围内，血浆蛋白结合率保持恒定。

[1]. Selectivity of febuxostat, a novel non-purine inhibitor of xanthine oxidase/xanthine dehydrogenase. Life Sci, 2005, 76(16), 1835-1847.

[2]. Effects of febuxostat on metabolic and renal alterations in rats with fructose-induced metabolic syndrome. Am J Physiol Renal Physiol, 2008, 294(4), F710-F718.

[3]. Effect of febuxostat on the progression of renal disease in 5/6 nephrectomy rats with and without hyperuricemia. Nephron Physiol, 2008, 108(4), p69-p78.

[4]. Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice. Sci Rep. 2014 Apr 1;4:4554.

[5]. Evaluation of effect of allopurinol and febuxostat in behavioral model of depression in mice. Indian J Pharmacol. 2013 May-Jun;45(3):244-7.

[6]. Ameliorative effects of sildenafil and/or febuxostat on doxorubicin-induced nephrotoxicity in rats. Eur J Pharmacol. 2017 Jun 15;805:118-124.

药效学
非布司他是一种新型的选择性黄嘌呤氧化酶/脱氢酶抑制剂，其作用机制是通过剂量依赖性地降低血清尿酸水平。在健康受试者中，非布司他可降低平均血清尿酸和血清黄嘌呤浓度，以及总尿尿酸排泄量。每日服用 40-80 mg 非布司他可使 24 小时平均血清尿酸浓度降低 40% 至 55%。非布司他与痛风发作密切相关，这与药物引起的血清尿酸水平降低和组织沉积物中尿酸盐晶体的动员密切相关。与别嘌醇和氧嘌呤醇不同，非布司他不会抑制嘌呤和嘧啶合成及代谢过程中其他酶的活性，因为它在结构上与嘌呤或嘧啶不相似。

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作用机制
痛风是一种急性关节炎，其特征是尿酸钠和尿酸盐晶体在关节内或周围积聚，导致炎症，并在骨骼、关节、组织和其他器官中持续沉积尿酸盐晶体，随着时间的推移病情可能会加重。高尿酸血症与痛风密切相关，在首次痛风临床发作前可能已存在多年；因此，血清尿酸水平异常和高尿酸血症被认为是痛风发病机制中涉及的生化异常。黄嘌呤氧化还原酶 (XOR) 可作为黄嘌呤氧化酶或黄嘌呤脱氢酶发挥作用。在人体内，它是尿酸生成的关键酶，因为它催化嘌呤代谢途径中次黄嘌呤氧化为黄嘌呤以及黄嘌呤氧化为尿酸的反应步骤。非布司他能强效抑制黄嘌呤氧化酶（XOR），阻断其氧化酶和脱氢酶活性。非布司他与XOR分子通道中的钼蝶呤活性位点结合，具有高亲和力，而别嘌呤醇对该位点的竞争性抑制作用相对较弱。在正常生理条件下，XOR主要以脱氢酶形式存在；然而，在炎症条件下，XOR可转化为黄嘌呤氧化酶形式，催化产生活性氧（ROS）的反应，例如过氧亚硝酸盐。ROS会导致血管炎症和血管功能改变。由于非布司他能抑制XOR的两种形式，因此可以抑制ROS的生成、氧化应激和炎症。在大鼠模型中，非布司他通过减轻氧化应激抑制肾脏缺血再灌注损伤。

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非布司他是一种1,3-噻唑单羧酸，其化学名称为4-甲基-1,3-噻唑-5-羧酸，在2位被3-氰基-4-(2-甲基丙氧基)苯基取代。它是一种口服有效的强效选择性黄嘌呤氧化酶抑制剂，用于治疗痛风患者的慢性高尿酸血症。它是一种EC 1.17.3.2（黄嘌呤氧化酶）抑制剂。它是一种芳香醚、腈和1,3-噻唑单羧酸。
非布司他是一种非嘌呤类黄嘌呤氧化酶（XO）抑制剂。2008年初，非布司他获得欧盟委员会批准上市，用于治疗慢性高尿酸血症和痛风。次年，FDA批准非布司他用于治疗对别嘌醇反应不足或不耐受的成人痛风患者的慢性高尿酸血症。痛风是一种关节炎，由尿酸晶体在关节内或周围积聚引起，长期会导致炎症，并进一步在骨骼、关节、组织和其他器官中沉积尿酸晶体。痛风与高尿酸血症密切相关。非布司他的作用机制是抑制一种负责尿酸合成的酶的活性，从而降低血清尿酸水平。2019年2月，FDA对非布司他添加了黑框警告，原因是上市后临床研究（CARES试验）的结果显示，与接受别嘌醇治疗的患者相比，接受非布司他治疗的痛风合并已知心血管疾病患者发生心血管致命事件的风险增加。生产商和FDA建议医疗专业人员将非布司他用于别嘌醇疗效不佳或不耐受患者的二线治疗，并避免在心血管疾病患者中使用非布司他。
非布司他是一种黄嘌呤氧化酶抑制剂。非布司他的作用机制是作为黄嘌呤氧化酶抑制剂。
非布司他是一种新上市的非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂，用于治疗痛风。长期使用非布司他与轻微的血清转氨酶升高有关，但尚未发现与临床上明显的急性肝损伤病例相关。
非布司他是一种口服的非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂，具有降低尿酸的作用。口服非布司他可选择性地、非竞争性地抑制黄嘌呤氧化酶的活性。黄嘌呤氧化酶是一种将氧嘌呤（包括次黄嘌呤和黄嘌呤）转化为尿酸的酶。通过抑制黄嘌呤氧化酶，尿酸生成减少，血清尿酸水平降低。非布司他可能有助于预防因治疗某些恶性肿瘤导致大量肿瘤细胞溶解而引起的尿酸过度释放所致的急性肾功能衰竭。
非布司他是一种小分子药物，目前已完成IV期临床试验（涵盖所有适应症），于2009年首次获批，用于治疗痛风和高尿酸血症，并有7项在研适应症。该药物已被美国食品药品监督管理局（FDA）列入黑框警告。
非布司他是一种噻唑衍生物，也是黄嘌呤氧化酶抑制剂，用于治疗慢性痛风患者的高尿酸血症。

C16H16N2O3S

316.37

316.088

C, 60.74; H, 5.10; N, 8.85; O, 15.17; S, 10.13

144060-53-7

Febuxostat-d9;1246819-50-0;Febuxostat sodium;1140907-13-6;Febuxostat-d7;1285539-74-3

134018

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

536.6±60.0 °C at 760 mmHg

238-239ºC

278.3±32.9 °C

0.0±1.5 mmHg at 25°C

1.606

4.87

111.45

1

6

5

22

448

0

BQSJTQLCZDPROO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H16N2O3S/c1-9(2)8-21-13-5-4-11(6-12(13)7-17)15-18-10(3)14(22-15)16(19)20/h4-6,9H,8H2,1-3H3,(H,19,20)

2-[3-cyano-4-(2-methylpropoxy)phenyl]-4-methyl-1,3-thiazole-5-carboxylic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。