| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MAT2A (Methionine S-adenosyltransferase 2A) (IC50 = 2.1 μM)
FIDAS-5 specifically targets methionine adenosyltransferase 2A (MAT2A), a key enzyme in the methionine metabolism pathway. It functions as a competitive inhibitor of MAT2A, effectively competing with the natural substrate S-adenosylmethionine (SAM) for binding to the enzyme's active site. FIDAS-5 demonstrates potent inhibition of MAT2A with an IC50 of 2.1 microM. MAT2A is frequently upregulated in various cancers, including liver, colon, and lung cancers, to support elevated SAM demand for transmethylation reactions needed for rapid cell proliferation. By inhibiting MAT2A, FIDAS-5 disrupts SAM-dependent methylation of DNA, RNA, proteins, and lipids, thereby interfering with cancer cell growth and survival. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
用 FIDAS-5 (3 μM; 7 天) 处理 LS174T 细胞可显著降低其增殖能力 [1]。FIDAS-5 (3 μM) 可抑制 c-LS174T CRC 细胞中的 Myc 和细胞周期蛋白 D1。FIDAS-5 (3 μM; 36 小时) 处理可降低 S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 和 S-腺苷高半胱氨酸刺激的 LS174T 细胞中 p21WAF1/CIP1 的细胞周期表达 [1]。
体外研究表明，FIDAS-5 能有效与 SAM 竞争 MAT2A 的结合位点，从而降低酶活性。该化合物在多种癌细胞系中表现出抗癌作用，其机制可能涉及关键调控分子甲基化状态的改变。FIDAS-5 通过降低 SAM 的可用性，破坏正常的甲基化模式，从而导致 MAT2A 过表达的癌细胞生长停滞和细胞死亡。该化合物对癌细胞的选择性高于 MAT2A 表达较低的正常细胞，但现有数据表中并未提供不同细胞系的 IC50 值。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
使用 FIDAS-5（20 mg/kg；灌胃；每日一次；持续两周；无胸腺裸鼠）治疗可显著抑制异种移植瘤的生长，且对体重影响甚微[1]。小鼠接受 FIDAS-5（20 mg/kg）治疗一周后，肝脏 SAM 水平显著降低[1]。
FIDAS-5 HCl 是一种口服生物活性化合物，在临床前模型中已证实具有抗癌作用。口服给药后，该化合物可达到足够的全身暴露量，从而发挥其 MAT2A 抑制活性。FIDAS-5 的体内疗效归因于其能减少肿瘤内的 SAM 池，进而破坏对癌细胞增殖和存活至关重要的甲基化反应。现有数据表中未提供详细的体内疗效数据，包括特定异种移植模型中的肿瘤生长抑制率。 |
| 酶活实验 |
亲和力结合实验[1]
a) LS174T 细胞裂解液：为纯化 FIDAS 靶标，将 LS174T 细胞裂解液与链霉亲和素磁珠和生物素标记的 FIDAS-8 在 4°C 下孵育过夜。磁珠用细胞裂解缓冲液洗涤三次。结合蛋白用 2.5 mM D-生物素洗脱。纯化的样品经 4.12% 梯度 SDS-PAGE 电泳分离，并用银染或 Sypro Ruby 荧光染色进行分析。切取 FIDAS-8 样品中特异性存在的蛋白条带，并按先前所述方法进行 MALDI-TOF/TOF 和 LC-MS/MS 分析。 b) 重组 MAT2A：将 MAT2A 和 MAT2B 克隆到 pGEX-6P-3 载体中。将构建体转染到大肠杆菌 BL21 中。 GST融合蛋白用IPTG诱导表达，并按先前所述方法用谷胱甘肽磁珠纯化。结合实验中，将纯化的蛋白与链霉亲和素磁珠和上述生物素标记的FIDAS-8化合物孵育。洗脱的蛋白用抗GST、MAT2A或MAT2B抗体进行Western印迹分析。His标签的MAT2A由pETDuet载体表达，用于SAM合成和诱变研究。根据制造商说明，使用HIS-Select树脂纯化蛋白，并用含300 mM咪唑的缓冲液洗脱。 各向异性分析[1] 在96孔板中，将FIDAS-3 (2.5 μM)与DMSO或MAT2A在100 μL PBS缓冲液中混合。竞争实验中，向混合物中加入SAM或L-蛋氨酸。在 23 °C 下，使用 SpectraMax M5 荧光分光光度计测量荧光各向异性，激发波长为 358 nm，发射波长为 454 nm，发射滤光片波长为 420 nm。样品在 96 孔彩色板中进行测量，总体积为 100 μL。[1] 孔雀石绿磷酸盐 (Pi) 测定[1] 将 L-蛋氨酸 (1 mM) 和 ATP (1 mM) 与纯化的 His 标签 MAT2A (5 μg) 在 0.5 mL 反应缓冲液（50 mM Tris pH 8.0、50 mM KCl、10 mL MgCl2）中孵育 30 分钟。使用 SensoLyte MG 磷酸盐测定试剂盒测定反应中释放的无机磷酸盐。在微孔板读数仪上于 620 nm 处测量吸光度。在抑制试验中，将MAT2A与FIDAS试剂在室温下孵育20分钟，然后加入L-蛋氨酸和ATP，溶于0.5 mL反应缓冲液中。加入2 mL冷去离子水终止反应并稀释样品。 对于非细胞MAT2A酶抑制实验，首先表达并纯化重组人MAT2A酶。将MAT2A（0.1-0.5 ug/反应）与不同浓度的FIDAS-5或FIDAS-5 HCl在反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，100 mM KCl，10 mM MgCl2和1 mM DTT）中孵育，测定酶活性。加入底物L-蛋氨酸和ATP（均为饱和浓度，例如分别为100 uM和200 uM）启动反应。在37℃下孵育30-60分钟后，通过加热或加入终止液终止反应。使用高效液相色谱-紫外检测、液相色谱-串联质谱或偶联酶法（例如，使用SAM依赖性甲基转移酶和荧光检测）定量SAM的生成。 IC50 值由剂量反应曲线计算得出。已知 MAT2A 抑制剂（例如，高浓度的 SAM 本身）或溶剂对照作为参考。可通过改变 SAM 浓度，同时在 FIDAS-5 存在下测量酶活性，并绘制 Lineweaver-Burk 图，来评估抑制的竞争性。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： LS174T 结直肠癌 (CRC) 细胞 测试浓度： 3 μM 孵育时间： 7 天 实验结果： 显著抑制 LS174T 细胞的增殖。(SAH) 水平[1]。 对于体外细胞实验，将高表达MAT2A的人类癌细胞系，例如HCT-116（结肠癌）、HepG2（肝细胞癌）或A549（肺癌），培养于添加10%胎牛血清（FBS）和抗生素的适宜培养基（例如DMEM或RPMI-1640）中。将细胞接种于96孔板中，并使其过夜贴壁。向细胞中加入FIDAS-5 HCl的系列稀释液（通常为0.1-100 μM），并继续孵育48-72小时。使用MTT比色法（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）或CellTiter-Glo发光法评估细胞活力。根据剂量反应曲线计算半数抑制浓度（IC50）。为了评估对细胞内SAM水平的影响，将用FIDAS-5处理24-48小时的细胞收集、裂解，并使用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）或酶联免疫吸附试验（ELISA）测定SAM浓度。为了评估整体DNA甲基化状态，提取基因组DNA，水解后通过LC-MS/MS分析，以定量5-甲基胞嘧啶（5-mC）与胞嘧啶的比值。也可以使用针对对称或不对称甲基化组蛋白残基（例如H3K4me3、H3K9me3、H4R3me2、H3R8me2）的特异性抗体，通过Western blotting分析蛋白裂解物。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 16只无胸腺裸鼠注射HT29结直肠癌细胞[1]。
剂量： 20 mg/kg。 给药途径： 口服（灌胃）；kg）。肝脏SAM水平显著升高。显著降低[1]。常规；两周。 实验结果： 异种移植瘤生长受到显著抑制。 在体内药理学研究中，将人癌细胞（例如HCT-116，3-5 × 10⁶ 个细胞溶于100 μL PBS）皮下植入6-8周龄雌性BALB/c裸鼠的右侧腹部。待肿瘤平均体积达到约100-150 mm³（通常在植入后7-14天）后，将小鼠随机分为治疗组和对照组（每组n = 6-8）。将FIDAS-5 HCl配制成合适的溶剂，例如0.5%羧甲基纤维素（CMC）或10% Cremophor EL的生理盐水，并以25-100 mg/kg的剂量每日一次灌胃给药。对照组仅给予溶剂。每2-3天使用数字游标卡尺测量肿瘤尺寸，并使用公式：长 × 宽² × 0.5计算肿瘤体积。监测体重作为毒性的一般指标。治疗3-4周后，或当对照组肿瘤达到伦理终点大小（通常为1500-2000 mm³）时，对小鼠实施安乐死。切除肿瘤，称重，并进行后续分析：（1）采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定SAM水平；（2）采用蛋白质印迹法（Western blotting）评估组蛋白甲基化模式；（3）分析整体DNA甲基化；（4）对肿瘤切片进行苏木精-伊红（H&E）染色以进行组织病理学检查，用Ki67抗体染色以检测增殖指数，并进行TUNEL检测以检测细胞凋亡。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
FIDAS-5 HCl 是一种口服生物利用度高的 MAT2A 抑制剂，具有类似药物的理化性质。该化合物的盐酸盐分子量约为 261.7。它可溶于 DMSO，并可配制成适合口服给药的载体。现有数据表中未提供详细的药代动力学参数，例如半衰期 (t½)、最大血浆浓度 (Cmax)、达峰时间 (Tmax)、浓度-时间曲线下面积 (AUC)、分布容积 (Vd) 和口服生物利用度 (%F)。作为一种蛋氨酸代谢抑制剂，其药代动力学特征可能包括良好的吸收，随后分布至 MAT2A 高表达的组织，包括肝脏和肿瘤。该化合物可能经肝脏代谢并通过胆汁排泄。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
针对FIDAS-5 HCl的专项毒理学研究尚未在标准研究化合物数据表中发表。然而，作为一种MAT2A抑制剂，FIDAS-5 HCl能够降低细胞内SAM池的含量，其潜在毒性可能源于对细胞功能至关重要的正常甲基化反应的干扰。快速分裂的细胞（例如胃肠道上皮细胞、骨髓细胞、毛囊细胞）可能对该化合物特别敏感，这与其他抗代谢类抗癌药物类似。在迄今为止报道的临床前动物研究中，FIDAS-5 HCl在有效剂量（例如每日口服25-50 mg/kg）下耐受性良好，未观察到明显的急性毒性或显著的体重下降。由于该化合物仍处于早期发现研究阶段，因此尚未开展正式的良好实验室规范（GLP）毒理学研究，包括两种动物的单次给药和重复给药毒性、遗传毒性以及安全性药理学评估。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FIDAS-5 HCl（CAS号：1391934-98-7）是一种研究级MAT2A抑制剂，仅供实验室使用，尚未获批用于治疗。该化合物的分子量约为261.7（游离碱），分子式为C1₅H13FN2（游离碱）。它通过与SAM结合位点结合，作为MAT2A的竞争性抑制剂发挥作用。FIDAS-5通过靶向蛋氨酸代谢途径，阻断SAM依赖的甲基化反应，而这些反应对于癌细胞增殖至关重要。该化合物尚未进入临床试验阶段，仍处于临床前发现阶段。其主要研究应用包括：研究MAT2A和SAM代谢在癌症生物学中的作用；探索靶向蛋氨酸循环的治疗潜力；以及作为先导化合物，用于优化开发更有效、更具选择性的MAT2A抑制剂，以用于抗癌药物的研发。
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| 分子式 |
C15H13CLFN
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|---|---|
| 分子量 |
261.721826314926
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| CAS号 |
1391934-98-7
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| PubChem CID |
57521314
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
274
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C=CC=C(C=1/C=C/C1C=CC(=CC=1)NC)F
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| 别名 |
FIDAS5; FIDAS 5
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~477.61 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.8209 mL | 19.1044 mL | 38.2088 mL | |
| 5 mM | 0.7642 mL | 3.8209 mL | 7.6418 mL | |
| 10 mM | 0.3821 mL | 1.9104 mL | 3.8209 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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