| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Green fluorescent dye
FITC does not have a specific biological target; it is a chemical reagent used for fluorescent labeling. The isothiocyanate group reacts with primary amines (e.g., the N-terminus or lysine residues) of proteins under mild conditions to form a stable thiourea bond. This covalent attachment allows the fluorescent labeling of proteins, antibodies, and other amine-containing biomolecules. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
储备液的制备
1. 蛋白质制备： 制备浓度为 1 mg/mL 的蛋白质（抗体）溶液，以达到最佳标记效果。 1) 蛋白质溶液的 pH 值应为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0，请用 1 M NaHCO3 调节 pH 值。 2) 如果蛋白质浓度低于 1 mg/mL，标记效率将显著降低。建议最终蛋白质浓度范围为 1 至 10 mg/mL，以获得最高的标记效率。 3) 为确保最佳标记效果，蛋白质需要溶于含有伯胺（例如 Tris 或甘氨酸）和铵离子的澄清缓冲液中。 2. 染料的制备 将无水 DMSO 加入 FITC 小瓶中，摇匀，配制成 10 mM 的溶液。 注意：FITC 需要避光保存并新鲜配制。 3. 确定所需染料的量。 待标记蛋白质的量决定了标记反应所需的 FITC 量。FITC 与蛋白质的质量比约为 1:50。 例如，假设标记反应需要 1 mL 蛋白质、2 mg/mL IgG（分子量 = 150,000）和 1 mg FITC，并混合于 1 mL DMSO 中。在这种情况下，需要 40 μL FITC。 可以使用以下公式计算： 摩尔 F/P=(MW/389)*(A495/195)/{[A280-(0.35*A495)]/E0.1%}=(A495*C)/[A280-(0.35*A495 )] C=(MW*E0.1% 280)/(389*195) *注： C 代表蛋白质常数；MW 是蛋白质的分子量；195 是 pH=13 时 FITC 缀合物在 490 nm 处的吸光度值 E0.1%；(0.35×A495) 是基于 FITC A280 的校正因子；E0.1% 是蛋白质 (1.0 mg/mL) 在 280 nm 处的吸光度值。 使用指南。 1. 标记反应 1) 将 50 μL 新鲜配制的 FITC 加入 1 mL 蛋白质样品溶液中，轻轻摇晃混匀，然后短暂离心，收集反应管底部的样品。避免剧烈摇晃，以防止蛋白质样品变性失活。 2) 将反应管置于避光处，在室温下轻轻孵育 8 小时。每隔 30 分钟，轻轻颠倒反应管数次，以充分混合两种反应物，提高标记效率。 3) 加入 5 M NH4Cl 至终浓度为 50 mM，并在 4 ℃ 下终止反应 2 小时。 2. 蛋白质纯化和脱盐 以下方案以使用 Sephadex G-25 柱纯化染料-蛋白质偶联物为例。 1) 根据生产说明制备 Sephadex G-25 色谱柱。 2) 将反应混合物上样至 Sephadex G-25 色谱柱顶部。 3) 当样品到达顶部树脂表面以下时，立即加入 PBS 缓冲液（pH 7.2-7.4）。 4) 向所需样品中加入更多 PBS 缓冲液（pH 7.2-7.4）以完成柱纯化。该复合物包含染料-蛋白质复合物所需的组分。 安全注意事项： 1. FITC 对光和湿度敏感。请立即配制 FITC 溶液并丢弃剩余部分。 2. 低浓度叠氮化钠（≤ 3 mM 或 0.02%）或硫柳汞（≤ 0.02 mM 或 0.01%）不会显著干扰蛋白质标记；但 20-50% 的甘油会降低标记效率。 3. 避免使用含有伯胺（例如 Tris、甘氨酸）或铵离子的缓冲液，因为它们会与标记蛋白竞争结合位点。4. 本产品仅供专业人员进行科学研究，不得用于临床诊断或治疗，亦不得用于食品或药品。5. 为了您的安全和健康，操作时请穿戴实验服和一次性手套。FITC 具有高吸光度、优异的荧光量子产率和良好的水溶性。其激发波长和发射波长最大值分别约为 495 nm 和 520 nm。荧光强度与 pH 值相关，在碱性条件下荧光强度最高。FITC 可用作荧光显微镜、流式细胞术和其他荧光应用中的标准绿色荧光染料。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
FITC并非用作治疗药物，而是用作研究和诊断工具。它在体内用于荧光抗体技术，以快速鉴定病原体。它还可用作各种生物学检测中的示踪剂，包括免疫荧光染色、细胞标记和蛋白质检测。
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| 酶活实验 |
对于非细胞检测，FITC 用于标记无细胞体系中的蛋白质和其他生物分子。异硫氰酸酯基团在弱碱性条件（pH 8-9）下与伯胺反应。该反应通常在黑暗中进行，以防止光漂白。标记产物通过凝胶过滤或透析纯化以去除未反应的 FITC，并通过测量 495 nm 处的吸光度来确定标记程度。
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| 细胞实验 |
示例 1：FITC 可用作绿色荧光纳米复合材料的荧光探针。
方法：用于纳米复合材料的连接。 1. 将纳米复合材料加入 EDC 和 NHS（摩尔比：1:5:5）中，调节 pH 值以活化羧基。 2. 将 FITC 溶解于二甲基亚砜中，加入上述混合物中，并在黑暗中振荡过夜。 3. 通过冻干得到最终的 FITC 标记纳米复合材料。 4. 使用基于探针的共聚焦激光内窥镜（Cellvizio，Mauna Kea Technologies，法国）进行测定。 示例 2：FITC 可用作绿色荧光纳米复合材料的荧光探针。 方法：用于纳米复合材料的连接。 1. 将纳米复合材料（20 mg）悬浮于 PBS 缓冲液（20 mL）中，加入 FITC（1 mg），并在黑暗中搅拌过夜。 2. 用 PBS 缓冲液洗涤纳米复合材料五次，以去除过量的 FITC。 3. 将待测细胞以 10⁵ 个/孔的密度接种于 6 孔微孔板中，并在 37°C、5% CO₂ 的条件下培养过夜。 4. 将培养基更换为含有纳米复合材料-FITC 的预制培养基。分别孵育 1、2、4 和 8 小时后，用 PBS 缓冲液洗涤待测细胞三次。 5. 使用共聚焦激光扫描显微镜进行成像。 示例 3：FITC 可用作荧光探针，与具有绿色荧光的分子胶连接。 示例 4：FITC 可用作荧光探针，以绿色荧光标记亲脂性植物毒素。 示例 5：FITC 可用作荧光探针，以绿色荧光标记漆酶。 方法：漆酶标记。 1. 用二甲基亚砜配制 FITC (1 mg/mL) 溶液。 2. 将 FITC 溶液逐滴加入漆酶溶液 (5 mg/mL) 中，并在 4°C 下搅拌混合溶液 4 小时。 3. 向混合溶液中加入 NH4Cl 水溶液 (2 mL, 50 mM) 以终止反应。 4. 将溶液在磷酸盐缓冲液 (50 mM, pH 7) 中于 4°C 下透析 48 小时，以去除过量的 FITC。 5. 使用共聚焦激光扫描显微镜（Leica SP8 STED 3X）进行成像。体外细胞实验中，FITC标记抗体或其他蛋白质，用于荧光显微镜或流式细胞术对细胞进行染色。将细胞与FITC偶联的抗体孵育，这些抗体可结合特定的细胞表面或细胞内抗原。使用合适的激发和发射滤光片检测荧光信号。FITC也可用于直接标记细胞以进行追踪。 |
| 动物实验 |
FITC通常不作为治疗剂用于动物实验。它是一种研究试剂，可用于动物成像或示踪研究。例如，可将FITC标记的化合物或细胞注射到动物体内，以追踪其分布或可视化特定组织。该化合物的荧光特性使其能够对活体动物进行实时成像。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
代谢/代谢物
氰化物可通过口服、吸入和皮肤接触迅速被吸收并分布于全身。氰化物主要经硫氰酸氧化酶或3-巯基丙酮酸硫转移酶代谢为硫氰酸。氰化物代谢物经尿液排出。(L96) FITC的分子量为389.38，分子式为C₂₁H₁₁NO₅S。它在室温下为固体，通常储存在-20°C避光保存。它可溶于DMSO和其他有机溶剂。纯度通常≥90%。该化合物对水分敏感，应储存在干燥环境中。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性概述
氰化物是第四电子传递链（位于真核细胞线粒体膜上）中细胞色素c氧化酶的抑制剂。它与该酶中的三价铁原子形成复合物。氰化物与该细胞色素的结合阻止了电子从细胞色素c氧化酶传递到氧气。结果，电子传递链被破坏，细胞无法进行有氧呼吸以产生ATP供能。主要依赖有氧呼吸的组织，例如中枢神经系统和心脏，尤其容易受到这种影响。已知氰化物还会通过与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、高铁血红蛋白、羟钴胺素、磷酸酶、酪氨酸酶、抗坏血酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、琥珀酸脱氢酶和铜/锌超氧化物歧化酶结合而产生一些毒性作用。氰化物与高铁血红蛋白中的铁离子结合，形成无活性的氰基高铁血红蛋白。(L97) FITC在标记浓度下通常被认为毒性较低。然而，该化合物对光敏感，应在弱光下操作以防止光漂白。它可能引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激。操作该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
5-异硫氰酸荧光素（FITC）是异硫氰酸荧光素的5-异构体。它是一种荧光探针，可与组织和蛋白质偶联，用作荧光抗体染色和蛋白质-氨基酸结合技术中的标记物。5-异硫氰酸荧光素是一种含氰化合物，由荧光素衍生而来，用于流式细胞术。(L552) FITC是一种可与组织和蛋白质偶联的荧光探针，用作荧光抗体染色和蛋白质-氨基酸结合技术中的标记物。
FITC是生物学研究中最广泛使用的荧光染料之一。它常用于标记蛋白质、抗体和其他生物分子，以便进行可视化和检测。异硫氰酸酯基团与伯胺反应。FITC用于病原体鉴定的荧光抗体技术。许多商业供应商均有FITC产品。 |
| 分子式 |
C21H11NO5S
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|---|---|
| 分子量 |
389.38
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| 精确质量 |
389.035
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| 元素分析 |
C, 64.78; H, 2.85; N, 3.60; O, 20.54; S, 8.23
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| CAS号 |
3326-32-7
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| 相关CAS号 |
63469-13-6 (hydrochloride)
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| PubChem CID |
18730
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
708.6±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
>360 °C(lit.)
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| 闪点 |
382.4±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.754
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| LogP |
4
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| tPSA |
120.44
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
668
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1OC2(C3=C(OC4=C2C=CC(O)=C4)C=C(O)C=C3)C5=C1C=C(N=C=S)C=C5
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| InChi Key |
MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H11NO5S/c23-12-2-5-16-18(8-12)26-19-9-13(24)3-6-17(19)21(16)15-4-1-11(22-10-28)7-14(15)20(25)27-21/h1-9,23-24H
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| 化学名 |
3',6'-dihydroxy-5-isothiocyanato-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthen]-3-one
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| 别名 |
Fluorescein isothiocyanate isomer I Fluorescein 5-isothiocyanate FITC
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| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~128.41 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.34 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5682 mL | 12.8409 mL | 25.6819 mL | |
| 5 mM | 0.5136 mL | 2.5682 mL | 5.1364 mL | |
| 10 mM | 0.2568 mL | 1.2841 mL | 2.5682 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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