FLAG peptide

别名: DYKDDDY多肽;FLAG Peptide
目录号: V28592 纯度: ≥98%
FLAG 肽是一种八氨基酸 (AA) 多肽 (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),具有肠激酶切割位点。
FLAG peptide CAS号: 98849-88-8
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
100mg
250mg
500mg
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产品描述
FLAG肽是一种由八个氨基酸(AA)组成的多肽(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),含有肠激酶切割位点。FLAG肽可用于抗体介导的重组蛋白鉴定和纯化。
FLAG肽(CAS号:98849-88-8)是一种合成的八氨基酸肽,序列为Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DYKDDDDK)。其分子量为1012.97,分子式为C41H60N10O20。该肽是一种用途广泛的融合标签,可用于重组蛋白的纯化和检测。它包含一个肠激酶切割位点。FLAG肽是多种抗体的靶标,使其成为免疫亲和层析的有力工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
The FLAG peptide does not have a biological target in a pharmacological sense. Instead, it serves as an epitope tag that is recognized by specific antibodies (e.g., M1, M2, M5). The M1 antibody binds to the peptide in the presence of divalent metal cations, preferably Ca2+. This antibody-peptide interaction is the basis for its use in protein purification and detection. The peptide also contains an enterokinase cleavage site, allowing for the removal of the tag after purification.
体外研究 (In Vitro)
融合蛋白技术已成为解决重组蛋白生产相关各种问题的关键工具。其附加标签的特性使得融合蛋白的鉴定更加便捷,并可通过将细胞提取物或上清液通过合适的基质柱进行一步纯化。FLAG 肽可在非变性条件下洗脱。FLAG 肽是多种已研制抗体的靶标。当存在二价金属阳离子(尤其是 Ca2+)时,该肽与一种抗体 M1 结合。螯合剂可促进洗脱。在竞争性洗脱过程中使用过量的游离 FLAG 肽是另一种策略。在此过程中,使用了抗体 M2 和 M5 [1]。钙依赖性单克隆抗体表位是最早被鉴定为 FLAG 标签的。它是一种高酸性的八肽,其 N 端可与靶蛋白融合。由于 FLAG 标签是一种高度亲水的肽,因此具有很高的表面结合概率。当存在Ca2+时,可以使用免疫亲和柱收集FLAG融合蛋白;在低浓度、中性pH值和接近生理值的条件下,可以使用EDTA洗脱蛋白[2]。
在体外,FLAG肽用于洗脱与抗FLAG抗体亲和柱结合的蛋白。它与标记蛋白竞争结合抗体,从而实现纯化蛋白的温和、非变性洗脱。它也被用作免疫测定的标准品。其与抗FLAG抗体的强特异性相互作用使其成为Western印迹、免疫沉淀和免疫荧光中蛋白检测的可靠工具。
体内研究 (In Vivo)
FLAG肽不用于体内治疗,其应用仅限于体外和离体实验室操作,不用于动物药理学研究,仅用于蛋白质生物化学和分子生物学研究。
酶活实验
对于体外结合实验,可以使用表面等离子共振(SPR)或酶联免疫吸附试验(ELISA)研究FLAG肽与抗FLAG抗体之间的相互作用。将肽固定在表面上,然后测量抗体的结合情况。利用肽的竞争性结合实验可以确定抗体的特异性和亲和力。
细胞实验
在体外细胞实验中,FLAG肽本身并不用作处理剂。而是通过基因工程改造细胞,使其表达与FLAG标签融合的重组蛋白。然后,可以使用抗FLAG抗体,通过免疫荧光显微镜或流式细胞术等技术来研究融合蛋白的表达和定位。在这些研究中,无需将FLAG肽本身添加到细胞培养基中。
动物实验
FLAG肽在动物实验中不用作治疗剂,而是用于构建表达FLAG标签蛋白的转基因动物。该肽本身并不直接用于动物实验。
药代性质 (ADME/PK)
FLAG肽是一种分子量为1012.97的小肽,可溶于DMSO(浓度为10 mg/mL),以粉末形式储存于-20°C。它并非药物,也不具有药代动力学特性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
FLAG肽被认为无毒,用作实验室试剂,不可用于人体。处理该肽时应遵守标准的实验室安全操作规程。
参考文献

[1]. The FLAG peptide, a versatile fusion tag for the purification of recombinant proteins. J Biochem Biophys Methods. 2001 Oct 30;49(1-3):455-65.

[2]. Protein expression in yeast; comparison of two expression strategies regarding proteinmaturation. J Biotechnol. 2000 Dec 28;84(3):237-48.

其他信息
FLAG肽是由八个氨基酸组成的肽,包括L-天冬氨酸、L-酪氨酸、L-赖氨酸、四个L-天冬氨酸残基和一个L-赖氨酸残基,这些氨基酸通过肽键连接。它们被广泛用作融合标签,用于纯化和检测各种重组蛋白。
FLAG肽是分子生物学和蛋白质生物化学中广泛使用的研究工具。它是FLAG标签系统的基础,该系统是目前最常用的重组蛋白表位标记系统之一。FLAG肽可从多家供应商处购买,但仅供研究用途。它尚未获得任何治疗批准。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C41H60N10O20
分子量
1012.97011089325
精确质量
1012.4
CAS号
98849-88-8
PubChem CID
9854670
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
-12.9
tPSA
525.79
氢键供体(HBD)数目
17
氢键受体(HBA)数目
23
可旋转键数目(RBC)
35
重原子数目
71
分子复杂度/Complexity
1910
定义原子立体中心数目
8
SMILES
C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O
InChi Key
XZWYTXMRWQJBGX-VXBMVYAYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C41H60N10O20/c42-11-3-1-5-22(45-36(65)24(13-19-7-9-20(52)10-8-19)47-34(63)21(44)14-29(53)54)35(64)48-26(16-31(57)58)38(67)50-28(18-33(61)62)40(69)51-27(17-32(59)60)39(68)49-25(15-30(55)56)37(66)46-23(41(70)71)6-2-4-12-43/h7-10,21-28,52H,1-6,11-18,42-44H2,(H,45,65)(H,46,66)(H,47,63)(H,48,64)(H,49,68)(H,50,67)(H,51,69)(H,53,54)(H,55,56)(H,57,58)(H,59,60)(H,61,62)(H,70,71)/t21-,22-,23-,24-,25-,26-,27-,28-/m0/s1
化学名
(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]hexanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~100 mg/mL (~98.72 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (98.72 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9872 mL 4.9360 mL 9.8720 mL
5 mM 0.1974 mL 0.9872 mL 1.9744 mL
10 mM 0.0987 mL 0.4936 mL 0.9872 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们