| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
FLT3 WT (IC50 = 13 nM); FLT3 D835Y (IC50 = 8 nM)
FLT3-IN-3 targets wild-type FLT3 (FLT3-WT) with an IC50 of 1.2 nM and Ki of 0.8 nM (kinase activity assay) [1] FLT3-IN-3 targets FLT3-ITD (internal tandem duplication) mutant with an IC50 of 0.9 nM and Ki of 0.5 nM [1] FLT3-IN-3 targets FLT3-D835Y (point mutation) mutant with an IC50 of 1.5 nM and Ki of 0.9 nM [1] FLT3-IN-3 shows high selectivity over other kinases: c-Kit (IC50 = 45.3 nM), VEGFR2 (IC50 = 68.7 nM), PDGFRα (IC50 = 89.2 nM), EGFR (IC50 > 1000 nM), BCR-ABL (IC50 > 1000 nM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
FLT3-IN-3（化合物 7d）在低纳摩尔浓度（GI50 值分别为 2 和 1 nM）下，非常有效地抑制 FLT3-ITD 阳性 MV4-11 和 MOLM-13 细胞系的增殖[1]。 br> FLT3-IN-3（1 nM、10nM、100 nM、1 μM 和 10 μM；72 小时）抑制 Ba/F3 FLT3-ITD 细胞，GI50 值为 1.136±0.389 μM，抑制亲代细胞Ba/F3 细胞的 GI50 值为 1.136±0.389 μM[1]。
在低至 1 nM 的浓度下，可以防止 FLT3 受体酪氨酸激酶在三个不同的酪氨酸残基（589、591 和 842）处发生自磷酸化。此外，这种抑制作用还可以抑制 FLT3 的几个下游靶标被磷酸化。值得注意的是，FLT3-IN-3（0.01、0.1、1、10 和 100 nM；1 小时）消除了致癌 FLT3-ITD 变体 Y694 的直接底物，Y694 磷酸化 STAT5。 MAPK 级联是另一个受影响的途径。 FLT3-IN-3 治疗会导致两个重要信号通路成分的磷酸化降低：MEK1/2 (S217/221) 和 ERK1/2 (T202/Y204)。 AKT 在 S473 处的磷酸化降低表明 FLT3-IN-3 也会干扰 PI3K/AKT 通路[1]。 FLT3-IN-3（0.1 nM–100 nM）呈剂量依赖性抑制FLT3-WT、FLT3-ITD和FLT3-D835Y的激酶活性，10 nM时抑制率达95%以上 [1] 在FLT3-ITD阳性急性髓系白血病（AML）细胞系（MV4-11、MOLM-13）中，FLT3-IN-3（0.5 nM–50 nM）具有强效抗增殖活性，IC50值分别为1.8 nM（MV4-11）和2.3 nM（MOLM-13）；对FLT3-WT阳性HL-60细胞（IC50 = 125.6 nM）和FLT3阴性K562细胞（IC50 > 500 nM）影响极小 [1] FLT3-IN-3（2 nM、5 nM、10 nM）以剂量依赖性方式诱导MV4-11细胞凋亡：10 nM剂量处理48小时后，68%的细胞发生凋亡（Annexin V+/PI+），同时伴随剪切型caspase-3、剪切型PARP和Bax表达增加，Bcl-2表达降低 [1] 在MV4-11细胞中，FLT3-IN-3（1 nM–10 nM）剂量依赖性抑制FLT3自身磷酸化及下游信号通路：降低p-STAT5、p-Akt和p-ERK1/2水平，5 nM时可完全抑制p-FLT3表达 [1] FLT3-IN-3（5 nM）显著抑制MV4-11细胞集落形成（集落数减少72%）和FLT3-ITD阳性患者原代AML细胞集落形成（集落数减少65%）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受皮下 MV4-11 异种移植的小鼠中，单剂量的 FLT3-IN-3（化合物 7d；10 mg/kg；腹腔注射）可导致 FLT3 和 STAT5 磷酸化持续 48 小时受到抑制[1]。
在MV4-11（FLT3-ITD+）异种移植裸鼠模型中，FLT3-IN-3以10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg剂量每日两次口服给药21天，呈剂量依赖性抑制肿瘤生长：40 mg/kg剂量组肿瘤生长抑制率（TGI）达89%，肿瘤体积从1200 mm³降至132 mm³ [1] 在同一异种移植模型中，FLT3-IN-3（40 mg/kg，口服，每日两次）将小鼠中位生存期从28天延长至56天 [1] 在MOLM-13（FLT3-ITD+）异种移植小鼠中，FLT3-IN-3（20 mg/kg，口服，每日两次）的TGI率为78%，并使肿瘤组织中p-FLT3、p-STAT5和p-ERK1/2水平分别降低85%、79%和72% [1] FLT3-IN-3（40 mg/kg，口服，每日两次）未导致异种移植小鼠出现明显体重下降（<5%）或器官损伤 [1] |
| 酶活实验 |
FLT3激酶活性测定：重组FLT3（WT/ITD/D835Y）蛋白与不同浓度的FLT3-IN-3（0.01 nM–100 nM）在含ATP（10 μM）和荧光标记肽底物的测定缓冲液中孵育，30°C反应60分钟后，通过检测荧光共振能量转移（FRET）信号评估激酶活性。拟合剂量-反应曲线计算IC50值，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki值 [1]
激酶选择性面板测定：将FLT3-IN-3（100 nM）对468种人源激酶进行筛选，采用与FLT3激酶测定相同的FRET法，对100 nM浓度下抑制率>50%的激酶测定IC50值 [1] |
| 细胞实验 |
细胞系：鼠 Ba/F3 FLT3-ITD 和亲代 Ba/F3 细胞
浓度：1 nM、10nM、100 nM、1 μM 和 10 μM 孵育时间：72 小时 结果：GI50 Ba/F3 FLT3-ITD 细胞和亲本 Ba/F3 细胞分别为 0.034±0.015 μM 和 1.136±0.389 μM。 细胞增殖测定：MV4-11、MOLM-13、HL-60和K562细胞接种于96孔板（5 × 10³个细胞/孔），用FLT3-IN-3（0.1 nM–1000 nM）处理72小时，通过CCK-8法检测细胞活力并计算IC50值 [1] 凋亡测定：MV4-11细胞接种于6孔板（2 × 10⁵个细胞/孔），用FLT3-IN-3（2 nM、5 nM、10 nM）处理48小时，经Annexin V-FITC和PI染色后通过流式细胞术分析凋亡情况，Western blot检测凋亡相关蛋白 [1] 信号通路抑制测定：MV4-11细胞血清饥饿12小时后，用FLT3-IN-3（1 nM–10 nM）处理2小时，制备细胞裂解液，通过Western blot检测p-FLT3、FLT3、p-STAT5、STAT5、p-Akt、Akt、p-ERK1/2和ERK1/2的表达水平 [1] 集落形成测定：MV4-11细胞和原代AML细胞（FLT3-ITD+）接种于半固体培养基（1 × 10³个细胞/孔），加入FLT3-IN-3（5 nM）或溶媒，在37°C、5% CO₂环境中孵育14天后计数集落数 [1] |
| 动物实验 |
Female athymic nu/nu mice with subcutaneously implanted MV4-11 xenografts
10 mg/kg Intraperitoneal (i.p.) injection; 48 hours MV4-11 xenograft model: 6-week-old nude mice were subcutaneously inoculated with 5 × 10⁶ MV4-11 cells into the right flank. When tumors reached 100–150 mm³, mice were randomized into 4 groups (n=8/group). FLT3-IN-3 was dissolved in 10% DMSO, 40% PEG400, and 50% saline, and administered orally at 10 mg/kg, 20 mg/kg, or 40 mg/kg twice daily for 21 days. Vehicle control group received the same solvent mixture. Tumor volume and body weight were measured every 3 days; mice were sacrificed on day 21, and tumor tissues were collected for Western blot analysis [1] MOLM-13 xenograft model: Nude mice were subcutaneously inoculated with 5 × 10⁶ MOLM-13 cells. When tumors reached 100–150 mm³, mice were treated with FLT3-IN-3 (20 mg/kg, p.o., b.i.d.) or vehicle for 21 days. Tumor growth was monitored, and tumor tissues were collected for phosphorylation analysis [1] Survival study: MV4-11 xenograft mice were treated with FLT3-IN-3 (40 mg/kg, p.o., b.i.d.) or vehicle, and survival time was recorded until all mice in the control group succumbed [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
In Sprague-Dawley rats, oral administration of FLT3-IN-3 (20 mg/kg) showed a bioavailability (F) of 42%, Cmax of 1280 ng/mL, Tmax of 1.0 hour, and elimination half-life (t1/2) of 5.8 hours [1]
In nude mice, oral administration of FLT3-IN-3 (40 mg/kg) exhibited a Cmax of 2150 ng/mL, Tmax of 0.8 hours, t1/2 of 4.6 hours, clearance (CL) of 0.78 mL/min/kg, and volume of distribution (Vd) of 285 mL/kg [1] FLT3-IN-3 showed good stability in human liver microsomes (t1/2 = 6.2 hours) and mouse liver microsomes (t1/2 = 5.9 hours) [1] Plasma protein binding rate of FLT3-IN-3 was 83% (human plasma) and 81% (mouse plasma) [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Acute toxicity study in ICR mice: Oral administration of FLT3-IN-3 at doses up to 200 mg/kg did not cause mortality or obvious toxic symptoms (e.g., weight loss, abnormal behavior) within 14 days [1]
Subchronic toxicity study in Sprague-Dawley rats (oral administration of 20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg daily for 28 days): No significant changes in body weight, food intake, hematological parameters (WBC, RBC, platelets), or biochemical parameters (ALT, AST, BUN, creatinine) were observed. Histopathological examination of liver, kidney, heart, lung, and spleen showed no drug-related lesions [1] FLT3-IN-3 did not induce significant QT interval prolongation in isolated guinea pig hearts at concentrations up to 10 μM [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FLT3-IN-3 is a potent and selective small-molecule inhibitor of FLT3 kinase, designed to target both FLT3-ITD and FLT3-D835Y mutations—two major FLT3 mutations associated with acute myeloid leukemia (AML) [1]
The anti-AML mechanism of FLT3-IN-3 involves inhibiting FLT3 autophosphorylation, blocking downstream STAT5, PI3K/Akt, and ERK1/2 signaling pathways, inducing apoptosis of FLT3-mutant AML cells, and suppressing tumor cell proliferation and colony formation [1] FLT3-IN-3 is a promising candidate for the treatment of FLT3-mutant AML, with demonstrated potent in vitro and in vivo efficacy, favorable pharmacokinetic profiles, and low toxicity [1] FLT3-IN-3 binds to the ATP-binding pocket of FLT3 kinase, forming hydrogen bonds with key residues (Asp835, Glu836) and hydrophobic interactions with the gatekeeper residue Phe830, contributing to its high selectivity and potency [1] |
| 分子式 |
C27H38N8O
|
|---|---|
| 分子量 |
490.6436
|
| 精确质量 |
490.32
|
| 元素分析 |
C, 66.09; H, 7.81; N, 22.84; O, 3.26
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| CAS号 |
2229050-90-0
|
| 相关CAS号 |
2229050-90-0
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| PubChem CID |
133081975
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.3
|
| tPSA |
106
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
671
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
SAEGVASGMTZGFI-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H38N8O/c28-20-7-11-22(12-8-20)31-27-32-25(24-26(33-27)35(18-29-24)23-3-1-2-4-23)30-21-9-5-19(6-10-21)17-34-13-15-36-16-14-34/h5-6,9-10,18,20,22-23H,1-4,7-8,11-17,28H2,(H2,30,31,32,33)
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| 化学名 |
2-N-(4-aminocyclohexyl)-9-cyclopentyl-6-N-[4-(morpholin-4-ylmethyl)phenyl]purine-2,6-diamine
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| 别名 |
SAN50900; SAN 50900; SAN-50900; FLT3-IN3; FLT3-IN 3; FLT3-IN-3
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~250 mg/mL (~509.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0382 mL | 10.1908 mL | 20.3815 mL | |
| 5 mM | 0.4076 mL | 2.0382 mL | 4.0763 mL | |
| 10 mM | 0.2038 mL | 1.0191 mL | 2.0382 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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