| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 5g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Apical membrane antigen 1 (AMA1) of Plasmodium falciparum. For the N-Me-Leu-8 peptide (synthesized using Fmoc-N-Me-Leu-OH):
- Binding affinity (KD) to 3D7 strain AMA1: 21.00 ± 1.73 nM (kinetic analysis) [1] - Binding affinity (KD) to W2mef strain AMA1: 16.8 ± 0.1 μM (steady-state analysis) [1] - Binding affinity (KD) to HB3 strain AMA1: 68.5 ± 0.5 μM (steady-state analysis) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
抑制寄生虫入侵：N-Me-Leu-8肽（含N-甲基亮氨酸）对3D7型恶性疟原虫入侵红细胞的抑制作用强于天然R1肽。在50 μg/mL浓度下，N-Me-Leu-8肽可完全抑制寄生虫入侵。滴定实验表明，N-Me-Leu-8肽的入侵抑制作用强于天然R1肽，这与其增强的AMA1亲和力相关。[1]
- AMA1结合（ELISA）：N-Me-Leu-8肽与R1噬菌体竞争结合固定化的3D7 AMA1。其IC50值（抑制R1噬菌体结合50%的浓度）低于天然R1肽，表明其结合能力更强。 [1] - 在小鼠血浆中的蛋白水解稳定性：N-Me-Leu-8肽与天然R1相比，稳定性显著提高。在37°C的小鼠血浆中孵育80分钟后，约50%的N-Me-Leu-8肽仍保持完整，而天然R1在10分钟内几乎完全降解。[1] |
| 酶活实验 |
表面等离子共振（SPR）结合分析：使用Biacore T100生物传感器在25°C下测定了N-Me-Leu-8肽与不同恶性疟原虫株（3D7、HB3、W2mef）AMA1蛋白的相互作用动力学。AMA1通过标准胺偶联法固定在CM5传感器芯片上。运行缓冲液为HBS-EP+（10 mM HEPES、150 mM NaCl、3.4 mM EDTA、0.05%表面活性剂P20，pH 7.4）。将浓度范围为 5 至 320 nM（针对 3D7）或 0.32 至 40.96 μM（针对 W2mef 和 HB3）的肽溶液以 60 μL/min 的流速注入固定化的 AMA1 上 1 分钟，随后进行 5 分钟的解离。使用 Scrubber 软件处理传感图。通过对包含质量传递项的 1:1 结合模型进行全局拟合来确定速率常数（ka 和 kd）。KD 计算为 kd/ka。对于快速解离的相互作用，采用稳态亲和力分析。对于N-Me-Leu-8与3D7 AMA1的结合：ka = (2.74 ± 0.54)×10^7 1/Ms，kd = (2.84 ± 0.15)×10^-2 1/s，KD = 21.00 ± 1.73 nM。[1]
- 基于ELISA的竞争性结合实验：将96孔板用2 μg/mL重组AMA1（3D7菌株）于4°C包被过夜。用10%脱脂奶粉PBS溶液封闭后，向孔中加入不同浓度的N-Me-Leu-8肽以及恒定浓度的R1展示噬菌体（~2×10^9 cfu/mL）。室温下振荡孵育 1 小时后，用 PBS/0.05% Tween 20 洗涤去除未结合的噬菌体。使用辣根过氧化物酶标记的抗 M13 抗体（1:5000）和四甲基联苯胺底物检测结合的噬菌体，并在 450 nm 处读取吸光度。测定使 R1-噬菌体结合减少 50% 所需的肽浓度（IC50）。[1] |
| 细胞实验 |
入侵抑制试验（寄生虫生长抑制）：将3D7寄生虫株培养并用山梨醇裂解法同步化至裂殖体期。将肽（包括N-Me-Leu-8）用PBS稀释，取50 μL加入无菌平底微孔板中，每个样品重复三次。然后加入50 μL完全培养基和100 μL同步化的裂殖体期寄生虫（4%红细胞比容，0.3%寄生虫血症）。将微孔板置于37℃、94% N₂、1% O₂、5% CO₂的湿润环境中培养40-42小时。用冰冷的PBS洗涤后，将寄生虫冻融，并通过测定寄生虫乳酸脱氢酶活性来确定相对寄生虫血症。在650 nm处读取吸光度值。抑制率计算公式为：100 − [(A650 肽样品 − A650 仅 RBC) / (A650 无肽对照 − A650 仅 RBC) × 100]。在滴定实验中，N-Me-Leu-8 的效力较天然 R1 有所提高（浓度-反应曲线见图 3C）。[1]
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| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠血浆中的蛋白水解稳定性：将N-Me-Leu-8肽（0.4 mg）溶解于含0.1%苯甲醇（作为内标）的PBS缓冲液（400 μL）中。将等体积的小鼠血浆溶液（由冻干血浆复溶）和肽溶液混合（总体积800 μL），并在37°C下孵育。分别于0、10、20、40和80分钟取样（50 μL），每个时间点重复三次，置于冰上，加入20 μL 0.5 M赖氨酸盐酸盐和65 μL乙腈，冷却后离心，取上清液进行反相高效液相色谱分析。肽峰面积与苯甲醇峰面积的比值以t=0时点为基准进行归一化。 N-Me-Leu-8表现出显著提高的稳定性：80分钟后，约50%的肽仍保持完整，而天然R1在10分钟内几乎完全降解（剩余<20%）。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
背景：R1肽是一种由20个氨基酸残基组成的疟原虫入侵抑制剂，可与AMA1结合。然而，它易被蛋白酶快速降解，且具有菌株特异性活性。研究人员探索了N-甲基化修饰，包括在Leu-8位使用Fmoc-N-Me-Leu-OH进行修饰，以提高其稳定性、亲和力和特异性广度。[1]
- 作用机制：N-Me-Leu-8肽保留了与AMA1结合并阻断寄生虫入侵的能力。亲和力的提高（解离速率减慢）表明N-甲基化修饰稳定了肽-AMA1复合物。该肽可能靶向AMA1上一个保守的疏水口袋，因为它能与抑制性单克隆抗体1F9和4G2dc1竞争结合位点。[1] - 结构影响：核磁共振研究表明，Leu-8位的N-甲基化修饰不会引起长程结构变化；骨架化学位移差异是局部的。N-Me-Leu-8的溶液结构与天然R1相似，具有两个转角区域。然而，N-甲基NOE的引入表明其具有一定的局部稳定性。[1] - 菌株特异性：天然R1仅与3D7和D10菌株结合，而N-Me-Leu-8与HB3和W2mef AMA1表现出微弱但可测量的结合（KD分别为~68.5 μM和~16.8 μM），表明其对不同菌株的识别能力有所提高。 |
| 分子式 |
C22H25NO4
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|---|---|
| 分子量 |
367.4382
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| 精确质量 |
367.178
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| CAS号 |
103478-62-2
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| PubChem CID |
7015835
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
537.3±29.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
113-116ºC
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| 闪点 |
278.7±24.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.581
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| LogP |
5.44
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| tPSA |
66.84
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
512
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC(C)C[C@@H](C(=O)O)N(C)C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C3=CC=CC=C13
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| InChi Key |
BUJQSIPFDWLNDC-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H25NO4/c1-14(2)12-20(21(24)25)23(3)22(26)27-13-19-17-10-6-4-8-15(17)16-9-5-7-11-18(16)19/h4-11,14,19-20H,12-13H2,1-3H3,(H,24,25)/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-[9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl(methyl)amino]-4-methylpentanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~272.15 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.80 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7215 mL | 13.6077 mL | 27.2153 mL | |
| 5 mM | 0.5443 mL | 2.7215 mL | 5.4431 mL | |
| 10 mM | 0.2722 mL | 1.3608 mL | 2.7215 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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