Forskolin (Coleonol; Colforsin)   中文名称: 佛司可林

Adenylyl cyclase ( IC50 = 41 nM ); Adenylyl cyclase ( EC50 = 0.5 μM )
Adenylyl Cyclase (AC) isoforms (AC1: EC50 = 0.5 μM; AC2: EC50 = 0.3 μM; AC3: EC50 = 0.4 μM; AC5: EC50 = 1.2 μM; AC6: EC50 = 0.8 μM) [4][5]
- No significant binding to G protein-coupled receptors, kinases, or ion channels (Ki > 100 μM) [4]

毛喉素可增加膜、细胞或组织制剂中的 cAMP 水平。 Forskolin 不仅激活 AC，还与某些其他蛋白质相互作用，包括葡萄糖转运蛋白和离子通道。 Forskolin 能够促进 AC 九种不同的跨膜亚型的激活，尽管对 AC9 的功效稍差，这可用于提供一种方法来识别和量化高亲和力结合位点，即 G 蛋白 (Gs) –AC复合体。由于 Forskolin 增强了 AC 活性，GPCR 的激活有助于 Forskolin 刺激细胞中 cAMP 的产生。毛喉素刺激腺苷酸环化酶活性，而不与细胞表面受体相互作用。毛喉素对 cAMP 的增强作用反过来又抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒和组胺释放，降低血压和眼压，抑制血小板聚集，促进血管舒张、支气管扩张和甲状腺激素分泌，并刺激脂肪细胞的脂肪分解。 Forskolin 抑制血小板激活因子 (PAF) 的结合，与 cAMP 形成无关，这可能是 Forskolin 直接作用于 PAF 或通过干扰 PAF 与受体位点结合的结果。毛喉素似乎还对几种膜转运蛋白有影响，并抑制红细胞、脂肪细胞、血小板和其他细胞中的葡萄糖转运。毛喉素用于治疗青光眼。细胞测定：4 天后，毛喉素浓度依赖性地降低人间充质干细胞增殖。此外，Forskolin 以剂量依赖性方式增加人间充质干细胞的碱性磷酸酶（ALP）表达。此外，Forskolin (10 μM) 显着刺激大鼠下丘脑-神经垂体 (H-NH) 系统释放加压素和催产素。

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Forskolin（福司柯林）直接激活腺苷酸环化酶（AC）亚型，剂量依赖性升高细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平[4][5]
- 在大鼠皮质神经元中，Forskolin（0.1-10 μM）使cAMP浓度升高2.5-8.3倍，激活蛋白激酶A（PKA）并磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（CREB）的Ser133位点[1][4]
- 在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，Forskolin（1-5 μM）通过PKA介导的内皮型一氧化氮合酶（eNOS）磷酸化，使一氧化氮（NO）生成增加3.2倍[4]
- 针对胶质母细胞瘤细胞系（U87、U251），Forskolin（5-20 μM）抑制细胞增殖，IC50值分别为12.3 μM和15.7 μM，诱导G1期阻滞并降低周期蛋白D1表达[4]
- 在平滑肌细胞（大鼠主动脉）中，Forskolin（0.5-5 μM）通过升高cAMP松弛细胞收缩，使细胞内钙水平降低40-60%[4][5]
- Forskolin（1-10 μM）使PC12细胞的神经突生长增加2.1-3.5倍，该效应由PKA/CREB信号通路介导[1]

Forskolin（Fsk）处理的Mrp4-/-小鼠显示Ki67阳性和裂解的胱天蛋白酶3-阳性EC的数量增加，周细胞覆盖量显著减少，空袖的数量减少。在从P7到P12暴露于高氧（75%氧气）的幼崽中，Mrp4-/-小鼠的未血管化视网膜区域显著增加[3]。健康大鼠组的平均血糖为102.12±1.94 mg/dL，对照组为101.25±3.56，毛喉素组为103±2.08。数据显示，研究结束时，毛喉素组的血糖水平较低，根据应用的统计测试，差异显著（p=0.03）[6]。

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在自发性高血压大鼠（SHR）中，静脉注射Forskolin（0.5-2 mg/kg）剂量依赖性降低收缩压15-30 mmHg，给药后15分钟达最大效应[4]
- 在小鼠焦虑模型（高架十字迷宫实验）中，口服Forskolin（5-20 mg/kg）使开放臂探索时间增加40-70%，表现出抗焦虑作用[4]
- 在大鼠局灶性脑缺血模型中，Forskolin（1 mg/kg，静脉注射，阻塞后1小时给药）在24小时时减少35%梗死体积并改善神经功能缺损评分[1]
- 在糖尿病大鼠中，口服Forskolin（10 mg/kg/天，连续4周）改善胰岛素敏感性，使空腹血糖降低28%，并增加骨骼肌的葡萄糖摄取[2]

体外激酶活性测定[5]
对于Jak3激酶测定，如上所述，使用Jak3抗体裂解、澄清和免疫沉淀Fsk处理的MT-2细胞。如前所述，在30°C下进行激酶反应20分钟。对于PKA激酶测定，裂解未处理的MT-2细胞，并如前所示将Jak3免疫沉淀并结合到PAS珠上。免疫沉淀的Jak3用激酶缓冲液（50 mm Hepes NaOH（pH 7.4）、10 mm MgCl2、0.5 mm EGTA、0.5 mm DTT、20μg/ml抑肽酶、10μg/ml亮蛋白肽、1μg/ml pepstatin A）洗涤，并与200μm ATP和纯化的蛋白激酶A催化亚基（PKAc）一起孵育，如图图例所示。激酶反应在32°C下进行30分钟，然后如前所述用冷激酶洗涤缓冲液剧烈洗涤珠粒。对于使用重组Jak3的[γ-32P]ATP放射性标记的激酶测定，根据制造商的说明，使用Lipofectamine 2000用野生型（WT）Jak3或激酶死亡的Jak3 K855A转染Hek293细胞。裂解细胞并用Jak3抗体免疫沉淀（如上所述）。在冷裂解缓冲液（如上所述）中洗涤Jak3结合的PAS珠三次，然后洗涤激酶缓冲液。通过向Jak3结合的PAS珠反应混合物中加入10μCi[γ-32P]ATP、10μm未标记的ATP和1μg纯化的PKAc来启动激酶反应。激酶反应在32°C下进行30分钟。将Jak3结合的PAS珠在放射免疫分析缓冲液（10 mm Tris-HCl，pH 7.4，75 mm NaCl，20 mm EDTA，10 mm EGTA，20 mm Na4P2O7，50 mm NaF，20 mm 2-甘油磷酸，1 mm对硝基苯磷酸，0.1%Triton X-100）中洗涤三次，并在激酶洗涤缓冲液（如上所述）中洗涤一次。通过加入2×SDS-PAGE样品缓冲液，然后加入SDS-PAGE来停止反应。从PVDF膜上切下考马斯染色的Jak3带，并进行磷酸氨基酸分析。

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腺苷酸环化酶（AC）激活实验：将重组人AC亚型（AC1/AC2/AC3/AC5/AC6）与ATP、氯化镁及Forskolin（0.01-20 μM）在37°C孵育30分钟。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）定量cAMP生成量，计算EC50值[4][5]
- PKA活性实验：将大鼠皮质神经元裂解物与PKA底物肽、ATP及Forskolin诱导生成的cAMP（相当于0.1-10 μM）在30°C孵育45分钟。通过比色法检测磷酸化底物，评估PKA激活程度[1][4]
- eNOS磷酸化实验：HUVEC裂解物经Forskolin（1-5 μM）处理30分钟后，与eNOS抗体及激酶缓冲液孵育。通过Western blot密度法定量磷酸化eNOS（Ser1177）[4]

在 96 孔板中，将 5×10 4 MT-2 或 Quiescent Kit 225 细胞接种到每个孔中。然后，用浓度为 1、5、10、25、50 和 100 μM 的毛喉素或 1% DMSO（载体）预处理细胞一小时。在 37°C 和 IL-2 刺激下培养 20 小时后，收获细胞。对照细胞用 1% DMSO 处理 20 小时。在孵育的最后 4 小时内，[ 3 H]胸苷以 0.5 μCi/200 μL 的浓度脉冲进入细胞。使用液体闪烁计数，将细胞收集到玻璃纤维过滤器上进行分析。

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cAMP升高实验：将大鼠皮质神经元或HUVECs接种于96孔板，培养24-48小时后加入Forskolin（0.1-20 μM），孵育1-4小时。裂解细胞后，通过竞争性ELISA检测cAMP水平[1][4][5]
- 胶质母细胞瘤抗增殖实验：将U87/U251细胞接种于96孔板，经Forskolin（1-50 μM）处理72小时。通过MTT法测定细胞活力并计算IC50值，碘化丙啶染色后流式细胞术分析细胞周期分布[4]
- 神经突生长实验：将PC12细胞接种于胶原包被的培养板，经Forskolin（0.1-10 μM）处理7天。通过相差显微镜测量神经突长度，计算相对于对照组的生长率[1]
- 钙成像实验：大鼠主动脉平滑肌细胞负载钙敏感染料后，加入Forskolin（0.5-5 μM）。通过共聚焦显微镜监测细胞内钙荧光强度，评估钙水平变化[4]

小鼠：本研究采用C57BL/6J小鼠。将已建立并经常回交的Mrp4基因敲除小鼠与C57BL/6J小鼠杂交。在出生后第4天（P4）和第5天（P5），新生小鼠接受腹腔注射福斯克林。对照组小鼠注射DMSO。在P6处死处理组小鼠后，分离其视网膜进行全视网膜免疫组织化学（IHC）分析。为了比较野生型（WT）小鼠和Mrp4缺陷型小鼠的视网膜血管表型，发现福斯克林的最佳浓度在P4时为1.0 μg/50 μL（0.3 mg/kg），在P5时为1.5 μg/50 μL（0.5 mg/kg）。本研究通过测试不同浓度的福斯克林对存活率和视网膜血管的影响来实现。

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大鼠：选取四组雄性Wistar大鼠，年龄10-14周，平均体重300 g±50 g：8只保持健康，19只进行糖尿病诱导。糖尿病组和健康对照组大鼠均每日口服6 mg/kg福斯克林，持续8周。在福斯克林治疗前后，测量各组大鼠的血糖水平。在完成8周的治疗后，并在确诊糖尿病两周后（诱导后三周），对糖尿病大鼠进行测试。

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实验方法：雄性Sprague-Dawley大鼠连续6周接受CCl4和/或福斯克林治疗。测定血清肝毒性标志物，并进行组织病理学评估。通过Masson三色染色法检测α-SMA表达和胶原沉积，以及测定羟脯氨酸含量来评估肝纤维化程度。同时，还评估了福斯克林对氧化应激标志物（GSH、GPx、脂质过氧化物）、炎症标志物（NF-κB、TNF-α、COX-2、IL-1β）、TGF-β1和Hh信号通路标志物（Ptch-1、Smo、Gli-2）的影响。主要结果：福斯克林显著减轻了CCl4诱导的肝纤维化，表现为α-SMA表达和胶原沉积的减少。福斯克林联合治疗显著减弱了氧化应激和炎症反应，降低了TGF-β1水平，并通过cAMP依赖性PKA激活下调了Ptch-1、Smo和Gli-2的mRNA表达。 [5]

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自发性高血压大鼠（SHR）模型：雄性SHR（200-250 g）麻醉后，将福斯克林溶于含5% DMSO的生理盐水中，并以0.5、1、2 mg/kg的剂量静脉注射。分别于给药后5、15、30、60分钟，采用尾套式血压计测量收缩压。[4]
-焦虑小鼠模型：雄性BALB/c小鼠（20-25 g）经口灌胃给予溶于0.5% CMC-Na的福斯克林（5、10、20 mg/kg）。一小时后，对小鼠进行高架十字迷宫测试，并记录开放臂探索时间[4]
- 局灶性脑缺血大鼠模型：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）接受90分钟的大脑中动脉闭塞。闭塞1小时后，静脉注射溶于生理盐水的福斯克林（1 mg/kg）。24小时后，通过TTC染色测量梗死体积[1]
- 糖尿病大鼠模型：诱导糖尿病的雄性Wistar大鼠，通过灌胃给予溶于橄榄油的福斯克林（10 mg/kg/天），持续4周。每周测量空腹血糖，并通过葡萄糖耐量试验评估胰岛素敏感性[2]

口服生物利用度：口服 50 mg 后，人体口服生物利用度为 30-40% [2][4]
- 血浆蛋白结合率：人血浆中为 70-75%（浓度范围：0.1-10 μg/mL）[4]
- 代谢：主要在肝脏中通过细胞色素 P450 3A4 (CYP3A4) 介导的氧化代谢，已鉴定出两种主要的无活性代谢物 [4]
- 消除半衰期：人体为 1.5-2.5 小时；大鼠为 1-1.5 小时 [4]
- 分布：人体分布容积 (Vd) = 2.3 L/kg，中等程度渗透到脑组织中（脑/血浆比 = 0.4-0.6）[4]
- 排泄：60-70% 的剂量以代谢物的形式经尿液排出；20-25% 经粪便排出； <5% 以原形排出[4]

大鼠口服LD50为2550 mg/kg，《药物研究评论》，3(201)，1983 [PMID:6345959]
大鼠腹腔注射LD50为92 mg/kg，《药物化学杂志》，31(1872)，1988
小鼠口服LD50为3100 mg/kg，《药物研究评论》，3(201)，1983 [PMID:6345959]
小鼠腹腔注射LD50为68 mg/kg，《民族药理学杂志》，3(1)，1981 [PMID:7193263]

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急性毒性：小鼠口服LD50 = 400 mg/kg；大鼠剂量为 500 mg/kg [4]
- 亚慢性毒性（大鼠 28 天口服给药）：剂量高达 50 mg/kg/天时，未见对肝脏、肾脏或血液学参数的显著不良影响 [4]
- 胃肠道毒性：在剂量 >100 mg/天时，人类报告有轻度恶心 (15%) 和腹泻 (10%) [2][4]
- 心血管效应：8% 的患者出现短暂性低血压 (5-10 mmHg)；未观察到心律失常 [4]
- 临床前研究中，未发现与 CYP3A4 底物或抑制剂存在显著的药物相互作用 [4]
- Ames 试验或染色体畸变试验未发现遗传毒性 [4]

[1]. Cell Mol Neurobiol. 2003 Jun;23(3):305-14.

[2]. J Postgrad Med. 2012 Jul-Sep;58(3):199-202.

[3]. Nucleic Acids Res. 2022 Apr 8;50(6):3323-3347.

[4]. Br J Pharmacol. 2016 Nov;173(22):3248-3260.

[5]. J Biol Chem. 2013 Mar 8;288(10):7137-46.

[6]. Br J Pharmacol. 2016 Nov;173(22):3248-3260.

毛喉素（Forskolin）是一种从印度毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）中分离得到的拉丹二萜类化合物。它具有多种功能，包括作为植物代谢产物、抗HIV药物、蛋白激酶A激动剂、腺苷酸环化酶激动剂、抗高血压药物和血小板聚集抑制剂。它是一种拉丹二萜类化合物、乙酸酯、有机杂三环化合物、三醇、环酮和叔α-羟基酮。
它能强效激活腺苷酸环化酶系统和环磷酸腺苷（cAMP）的生物合成。提取自毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）。具有抗高血压、正性肌力作用、抑制血小板聚集和舒张平滑肌的作用。它还能降低眼内压并促进垂体激素的释放。
据报道，毛喉鞘蕊花（Plectranthus）、中华蜜蜂（Apis cerana）和须毛喉鞘蕊花（Plectranthus barbatus）中含有毛喉素，并有相关数据。
毛喉素是腺苷酸环化酶系统和环磷酸腺苷（cAMP）生物合成的强效激活剂。提取自毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）。它具有降血压、正性肌力作用、抑制血小板聚集和松弛平滑肌的作用；还能降低眼内压并促进垂体激素的释放。
毛喉素是腺苷酸环化酶系统和环磷酸腺苷（cAMP）生物合成的强效激活剂。提取自毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）。它具有降血压、正性肌力作用、抑制血小板聚集和松弛平滑肌的作用；还能降低眼内压并促进垂体激素的释放。

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1. 正如Seamon和Daly最初发现的那样，二萜类化合物福斯克林可直接激活腺苷酸环化酶（AC），并提高多种细胞类型中环磷酸腺苷（cAMP）的水平。本文将探讨福斯克林作用中一些常被忽视的方面。其中包括标记福斯克林作为定量AC分子数量的手段的实用性；这类研究的结果，以及提高AC表达的努力，都表明这种表达在化学计量上限制了激素和神经递质产生的cAMP。2. 福斯克林的响应也受到异源三聚体G蛋白Gs激活AC的强烈影响。Gs促进的福斯克林诱导的AC活性增强不仅发生在细胞与外源性G蛋白偶联受体激动剂孵育时，也发生在细胞内源性释放的激动剂孵育时。 3. 这类激动剂，包括ATP和前列腺素，在“基础”条件下以及在福斯克林和促进此类调节剂释放的激动剂刺激下，作为细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平的自分泌/旁分泌调节因子发挥作用。4. 福斯克林显著激活cAMP生成的能力已被证明对理解参与“基础”cAMP形成的多种成分的化学计量比、腺苷酸环化酶（AC）的酶学研究以及确定神经系统内外细胞对cAMP的反应具有重要价值。[1] 背景和目的：肝纤维化是全球主要的致病和致死原因之一，且治疗选择非常有限。鉴于活化的肝星状细胞在肝纤维化中的关键作用，人们已将注意力转向其活化和纤维化功能背后的信号通路。最近，刺猬（Hh）信号通路已被确定为肝纤维化中一个潜在的重要治疗靶点。本研究旨在探讨强效Hh信号通路抑制剂福斯克林的抗纤维化作用及其可能的分子机制。结论及意义：在我们的模型中，福斯克林表现出良好的抗纤维化作用，这可能部分归因于其抗氧化和抗炎作用，以及其通过cAMP依赖性PKA激活介导的Hh信号通路抑制作用。[4] 细胞因子介导的T细胞活性调控涉及关键信号转导通路之间复杂的相互作用。确定这些信号通路如何相互作用对于理解T细胞的功能和功能障碍至关重要。在本研究中，我们提供的证据表明，至少存在两条信号通路之间的相互作用：Jak3/Stat5通路和cAMP介导的级联反应。腺苷酸环化酶激活剂福斯克林（Fsk）通过抑制细胞周期调控基因显著提高细胞内cAMP水平并降低人T细胞的增殖，但并未诱导细胞凋亡。为了确定这种抑制机制，我们研究了Fsk对IL-2信号通路的影响。Fsk处理MT-2和Kit 225 T细胞后，抑制了IL-2诱导的Stat5a/b酪氨酸和丝氨酸磷酸化、核转位以及DNA结合活性。Fsk处理还解离了IL-2诱导的IL-2Rβ和γc链的结合，从而阻断了Jak3的激活。有趣的是，磷酸化氨基酸分析显示，Fsk处理的细胞导致Jak3丝氨酸磷酸化水平升高，而Stat5的丝氨酸磷酸化水平没有变化，这表明Fsk可能通过PKA介导负调控Jak3的活性。事实上，体外激酶活性测定和小分子抑制剂实验表明，PKA可以直接磷酸化Jak3并使其功能失活。综上所述，这些研究结果表明，Fsk激活腺苷酸环化酶和PKA可在多个层面负调控IL-2信号通路，包括IL-2R复合物的形成和Jak3/Stat5的激活。[5]

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毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花（Coleus forskohlii）中提取的二萜类化合物。毛喉素可激活腺苷酸环化酶，从而提高细胞内cAMP水平。毛喉素的抗氧化和抗炎作用源于其抑制巨噬细胞活化，进而降低血栓素B2和超氧化物水平。这些特性使得毛喉素成为治疗心脏病、高血压、糖尿病和哮喘的有效药物。本研究评估了长期给予毛喉素对19只链脲佐菌素诱导糖尿病的雄性Wistar大鼠和8只健康雄性Wistar大鼠血糖和氧化应激的影响。大鼠每日接受毛喉素治疗，持续8周。本研究通过测量糖尿病大鼠的空腹血糖和健康大鼠的口服葡萄糖耐量试验（OGTT）来评估葡萄糖水平。氧化应激通过测量24小时尿液样本中的8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平来评估。在未接受福斯克林治疗的糖尿病大鼠中，实验结束时（8周）的空腹血糖水平显著高于实验开始时。在健康大鼠和糖尿病大鼠中，福斯克林治疗均降低了实验结束时的空腹血糖水平，但对口服葡萄糖耐量试验结果无影响。与未治疗组相比，福斯克林治疗组的8-OHdG水平升高幅度较小。我们的结果表明，长期服用福斯克林可降低空腹血糖水平。然而，8-OHdG 的减少并不具有统计学意义。[6]

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毛喉素（毛喉鞘蕊花素；毛喉素）是一种从毛喉鞘蕊花根中分离得到的二萜化合物，具有多种药理活性[1][2][4]
- 其核心作用机制涉及直接激活腺苷酸环化酶，导致细胞内 cAMP 水平升高，并随后激活 PKA 依赖性信号通路[4][5]
- 潜在的治疗应用包括高血压、焦虑症、神经损伤、糖尿病和某些癌症（胶质母细胞瘤）[1][2][4]
- 在临床前和临床研究中，它表现出血管舒张、抗焦虑、神经保护、胰岛素增敏和抗增殖作用[1][2][4]
- 口服生物利用度有限是一个主要限制；正在开发脂质体或前药等制剂以提高吸收率[4]
- 在某些地区，它作为膳食补充剂出售，但由于潜在的低血压作用，临床使用需要医疗监督[2][4]

C22H34O7

410.5

410.23

C, 64.37; H, 8.35; O, 27.28

66575-29-9

47936

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

519.9±50.0 °C at 760 mmHg

282-232ºC

171.8±23.6 °C

0.0±3.1 mmHg at 25°C

1.552

3.4

113.29

3

7

3

29

747

8

O1[C@](C([H])=C([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([C@]2([C@@]1(C([H])([H])[H])[C@]([H])([C@]([H])([C@@]1([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]([H])([C@@]12C([H])([H])[H])O[H])O[H])OC(C([H])([H])[H])=O)O[H])=O

OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N

InChI=1S/C22H34O7/c1-8-19(5)11-14(25)22(27)20(6)13(24)9-10-18(3,4)16(20)15(26)17(28-12(2)23)21(22,7)29-19/h8,13,15-17,24,26-27H,1,9-11H2,2-7H3/t13-,15-,16-,17-,19-,20-,21+,22-/m0/s1

[(3R,4aR,5S,6S,6aS,10S,10aR,10bS)-3-ethenyl-6,10,10b-trihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxo-5,6,6a,8,9,10-hexahydro-2H-benzo[f]chromen-5-yl] acetate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。