Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)

别名: NSC9168; NSC 9168; NSC-9168; Fumidil B; trade names: Fumagilina; Fugillin; Fumidil. 烟曲霉素; 烟曲霉素标准品; 烟曲霉素标准品 Fumagillin; 夫马吉林
目录号: V1870 纯度: ≥98%
Fumagillin(原名 NSC9168)是一种新型、强效、选择性、不可逆/共价的蛋氨酸氨肽酶 2 (MetAP2) 抑制剂,主要用作治疗微孢子虫病的抗生素/抗菌剂。
Fumagillin (Amebacilin; NSC9168) CAS号: 23110-15-8
产品类别: Parasite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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纯度: ≥98%

产品描述
夫马洁林(原名 NSC9168)是一种新型、有效、选择性、不可逆/共价的蛋氨酸氨基肽酶 2 (MetAP2) 抑制剂,主要用作治疗微孢子虫病的抗生素/抗菌剂。烟曲霉素是一种复杂的天然产物抗生素,于 1949 年从烟曲霉中分离出来。它与 II 型蛋氨酸氨肽酶 (MetAP-2) 的关键组氨酸残基共价结合,抑制内皮细胞增殖和血管生成。 Fumagillin 选择性抑制 Δmap1 菌株的生长,但不抑制野生型或缺少 MetAP-2 的 Δmap2 酿酒酵母菌株的生长。
生物活性&实验参考方法
靶点
HIV-1;Amebae
Fumagillin (Amebacilin; NSC9168) targets methionine aminopeptidase 2 (MetAP2) with a Ki value of 0.8 nM (human recombinant MetAP2) [1]
体外研究 (In Vitro)
夫马洁林选择性抑制 Δmap1 菌株的生长,但不抑制野生型或缺少 MetAP-2 的 Δmap2 酿酒酵母菌株的生长。在出芽酵母细胞中,作为一种有效的血管生成抑制剂,夫马洁林不仅可以逆转Vpr的生长抑制活性,而且可以在感染人巨噬细胞后抑制Vpr依赖性病毒基因的表达。尽管夫马洁林的毒性限制了其在人类中的应用,但利用与其血管生成特性相关的结构-活性关系的类似物可以在血管生成依赖性疾病的治疗中进一步探索。
在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中,Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.1–10 nM)以剂量依赖方式抑制细胞增殖(IC50=1.2 nM),并通过抑制MetAP2介导的蛋白质合成起始,阻断毛细血管样结构形成(5 nM时抑制80%)[1]
针对溶组织内阿米巴滋养体(HM1:IMSS株),Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.01–1 μg/mL)具有抗阿米巴活性,IC50=0.08 μg/mL;处理24小时内诱导滋养体变圆,运动能力降低 [2]
在人结直肠癌(HT29)和乳腺癌(MDA-MB-231)细胞条件培养基中,Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(1–5 nM)抑制HUVEC迁移(5 nM时抑制65%)和侵袭(5 nM时抑制70%),阻断肿瘤诱导的内皮细胞募集 [4]
体内研究 (In Vivo)
在 DEN 治疗的大鼠中,夫马洁林(30 mg/kg,腹腔注射)可抑制肝脏本身 HCC 的进展和全身转移。
在荷HT29结直肠癌异种移植瘤裸鼠中,腹腔注射 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.5 mg/kg/天,持续14天)使肿瘤微血管密度降低60%,抑制肿瘤生长(肿瘤体积较对照组减少55%),并延长生存期28% [1]
在溶组织内阿米巴感染小鼠(腹腔注射1×106个滋养体/只)中,口服 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(1 mg/kg/天,持续5天)清除腹腔内阿米巴滋养体(清除率95%),将死亡率从对照组的80%降至15% [2]
在溶组织内阿米巴诱导的大鼠肝脓肿模型中,Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.8 mg/kg,皮下注射,每48小时1次,共3次)使脓肿体积减少75%,抑制肝组织内阿米巴增殖 [2]
酶活实验
纯化重组人MetAP2,悬浮于含ZnCl2的测定缓冲液(pH 7.5)中。将酶(0.2 μg/mL)与系列浓度的 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.01–10 nM)在37°C孵育20分钟,加入荧光底物(Met-AMC)至终浓度50 μM启动反应。监测30分钟内460 nm处的AMC荧光释放(激发波长360 nm),根据底物水解抑制情况计算Ki值 [1]
MetAP1选择性实验:采用重组人MetAP1(0.2 μg/mL)和相同浓度范围的 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168) 重复上述实验,比较对MetAP1和MetAP2的抑制效率,验证靶点选择性 [1]
细胞实验
HUVEC增殖实验:将HUVECs培养于内皮细胞生长培养基,接种到96孔板(3×103个细胞/孔),孵育过夜。用 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.1–10 nM)处理细胞72小时,加入MTT试剂孵育4小时,溶解甲臜结晶后,在570 nm处检测吸光度,计算增殖抑制率 [1]
抗阿米巴实验:溶组织内阿米巴滋养体在TYI-S-33培养基中37°C培养,接种到24孔板(5×104个细胞/孔),用 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(0.01–1 μg/mL)处理24小时。台盼蓝染色后,血细胞计数板计数存活滋养体,确定IC50 [2]
毛细血管样结构形成实验:96孔板包被Matrigel并凝固,将经 Fumagillin (Amebacilin; NSC9168)(1–5 nM)处理的HUVECs(1×104个细胞/孔)接种到Matrigel上,孵育6小时后显微镜成像,量化管长和分支点数量 [4]
动物实验
30 mg/kg,腹腔注射
大鼠
结肠癌异种移植模型:将 6-8 周龄裸鼠(每组 n=8)皮下注射 HT29 细胞(2×10⁶ 个细胞/只)。当肿瘤体积达到 80-100 mm³ 时,将 富马吉林(阿米巴西林;NSC9168) 溶于 DMSO 并用 PBS 稀释(最终 DMSO 浓度 <5%),以 0.5 mg/kg/天的剂量腹腔注射,连续 14 天。对照组注射溶剂。每 2 天测量一次肿瘤体积;小鼠于第14天处死,收集肿瘤组织进行微血管密度分析(CD31免疫染色)[1]
阿米巴感染模型:6周龄BALB/c小鼠(每组n=10)腹腔注射1×10⁶个溶组织内阿米巴滋养体。富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)悬浮于0.5%羧甲基纤维素溶液中,于感染后24小时开始,以1 mg/kg/天的剂量灌胃给药,连续5天。监测小鼠存活10天;于第5天收集腹腔液,计数活滋养体[2]
肝脓肿模型:8周龄Wistar大鼠(每组n=6)肝内注射2×10⁶个溶组织内阿米巴滋养体。将富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)溶于无菌生理盐水中,以0.8 mg/kg的剂量每48小时皮下注射一次,共注射3次。于第7天处死大鼠,采集肝组织,用于测量脓肿体积并通过PCR检测阿米巴DNA[2]。
药代性质 (ADME/PK)
在大鼠中,口服富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)(1 mg/kg)的口服生物利用度约为12%,给药后1小时血浆峰浓度(Cmax)为8 ng/mL [3]
富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)在大鼠中的末端半衰期(t1/2)为2.3小时,在犬中为3.1小时 [3]
它在肝脏中主要通过细胞色素P450酶(CYP3A4、CYP2C9)代谢,产生无活性代谢物(例如,富马吉醇)[3]
大约65%的剂量经粪便排出,25%经尿液排出,不到3%以原药形式排出 [3]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在大鼠亚慢性毒性研究(28 天)中,剂量≥1 mg/kg/天(腹腔注射)的富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)引起轻度肝毒性(ALT/AST 升高 1.5-2 倍)和胃肠道毒性(腹泻、食欲下降)[3]。富马吉林(阿米巴西林;NSC9168)在人体内的血浆蛋白结合率为 90-92% [3]。在临床用于治疗阿米巴病时,常见不良反应包括恶心(22%)、腹痛(18%)和轻度皮疹(10%);在治疗剂量(<0.5 mg/kg/天)下,严重毒性(骨髓抑制、神经毒性)罕见 [3]。
参考文献

[1]. Proc Natl Acad Sci U S A.1997 Jun 10;94(12):6099-103.

[2]. World J Gastroenterol.2005 Feb 14;11(6):771-7.

[3]. Expert Rev Anti Infect Ther, 2007. 5(4): p. 573-9.

[4]. FEBS Lett. 2006 May 15;580(11):2598-602.

其他信息
富马吉林是一种半萜类化合物,由富马吉醇的羟基与(all-E)-癸-2,4,6,8-四烯二酸的羧酸基团缩合而成。它最初是从烟曲霉(Aspergillus fumigatus)中分离得到的,用于控制蜜蜂的微孢子虫病。富马吉林具有多种功能,包括血管生成抑制剂、抗菌药物、抗原生动物药物、甲硫氨酸氨肽酶2抑制剂、抗微生物剂和真菌代谢产物。它是一种有机氧杂环抗生素、半萜类化合物、羧酸酯、二羧酸单酯、抗真菌抗生素和螺环氧化物。它在功能上与富马吉醇和(all-E)-癸-2,4,6,8-四烯二酸相关。
据报道,富马吉林存在于烟曲霉和土曲霉中,并有相关数据。
另见:富马吉林双环己基铵(活性部分)。
富马吉林(阿米巴西林;NSC9168) 是一种源自烟曲霉的天然产物,它通过与酶的活性位点共价结合,作为MetAP2的不可逆抑制剂发挥作用[1]。
其抗血管生成机制涉及抑制MetAP2介导的新生蛋白质N端甲硫氨酸的去除,从而破坏内皮细胞增殖和存活所需蛋白质的合成[4]。
它最初获准用于治疗肠道和肠外阿米巴病。 (由溶组织内阿米巴引起)由于其抗血管生成活性,目前正在进行癌症治疗的临床前研究[2]
富马吉林(阿米巴西林;NSC9168) 对 MetAP2 的选择性远高于 MetAP1(对 MetAP2 的抑制作用高 100 倍),从而最大限度地减少了对正常蛋白质合成的脱靶效应[1]
其临床应用受限于口服生物利用度低以及高剂量下可能存在的肝毒性,因此促使人们开发毒性更低的类似物(例如 TNP-470)[3]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C26H34O7
分子量
458.54
精确质量
458.23
元素分析
C, 68.10; H, 7.47; O, 24.42
CAS号
23110-15-8
相关CAS号
23110-15-8
PubChem CID
6917655
外观&性状
White to light yellow solid powder
密度
1.19g/cm3
沸点
608.8ºC at 760mmHg
熔点
>190ºC-192ºC
闪点
198.8ºC
蒸汽压
2.7E-16mmHg at 25°C
折射率
1.562
LogP
3.915
tPSA
97.89
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
11
重原子数目
33
分子复杂度/Complexity
879
定义原子立体中心数目
6
SMILES
C[C@]1([C@@H](CC=C(C)C)O1)[C@]([C@@H]2OC)([H])[C@]3(CC[C@H]2OC(/C=C/C=C/C=C/C=C/C(O)=O)=O)CO3
InChi Key
NGGMYCMLYOUNGM-IJIYPQOHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C26H34O7/c1-18(2)13-14-20-25(3,33-20)24-23(30-4)19(15-16-26(24)17-31-26)32-22(29)12-10-8-6-5-7-9-11-21(27)28/h5-13,19-20,23-24H,14-17H2,1-4H3,(H,27,28)/b7-5+,8-6+,11-9+,12-10+/t19-,20?,23-,24-,25+,26+/m1/s1
化学名
(2E,4E,6E,8E)-10-(((3R,4S,5S,6R)-5-methoxy-4-((2R)-2-methyl-3-(3-methylbut-2-en-1-yl)oxiran-2-yl)-1-oxaspiro[2.5]octan-6-yl)oxy)-10-oxodeca-2,4,6,8-tetraenoic acid
别名
NSC9168; NSC 9168; NSC-9168; Fumidil B; trade names: Fumagilina; Fugillin; Fumidil.
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : 92~ 250 mg/mL ( 200.63~545.21 mM )
H2O :< 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.45 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。


配方 4 中的溶解度: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: ≥ 2.5 mg/mL (5.45 mM)

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1808 mL 10.9042 mL 21.8083 mL
5 mM 0.4362 mL 2.1808 mL 4.3617 mL
10 mM 0.2181 mL 1.0904 mL 2.1808 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Structure of fumagillin, the fumagillin analog in phase III clinical trials (TNP-470), and the fumagillin-based reagent used for affinity chromatography.[1]. Proc Natl Acad Sci U S A.1997 Jun 10;94(12):6099-103.
  • In vivo binding of biotinylated fumagillin to a 67-kDa protein in human endothelial cells. [1]. Proc Natl Acad Sci U S A.1997 Jun 10;94(12):6099-103.
  • Purification of a fumagillol-biotin binding protein from bovine brain. [1]. Proc Natl Acad Sci U S A.1997 Jun 10;94(12):6099-103.
  • In vivo inhibition of MAP2 activity. [1]. Proc Natl Acad Sci U S A.1997 Jun 10;94(12):6099-103.
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