| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
1. Galactose 1-phosphate uridylyltransferase (GALT, the enzyme for which Galactose 1-phosphate Potassium salt acts as a natural substrate, as it is a substrate rather than an inhibitor of GALT) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. GALT酶催化反应的底物:Galactose 1-phosphate Potassium salt是体外重组野生型人源GALT酶的关键底物。在尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-葡萄糖,辅酶)存在下,野生型GALT可催化Galactose 1-phosphate Potassium salt转化为尿苷二磷酸半乳糖(UDP-半乳糖),其对该底物的米氏常数Km为0.18 mM(底物亲和力),催化周转数kcat为25 s⁻¹(催化效率)[1]
2. GALT缺陷细胞模型中的代谢堆积:在I型半乳糖血症患者来源的成纤维细胞(携带GALT基因突变,如Q188R突变)中,用Galactose 1-phosphate Potassium salt(0.5–5 mM)孵育24 h可导致细胞内半乳糖1-磷酸剂量依赖性堆积。2 mM浓度下,突变型成纤维细胞内的堆积水平是野生型细胞的7.2倍,而野生型细胞可快速代谢该底物,堆积量仅为突变型细胞的≤10%[1] 3. GALT突变体对底物的处理能力变化:携带I型半乳糖血症常见突变(Q188R、K285N、N314D)的重组GALT酶,对Galactose 1-phosphate Potassium salt的催化效率显著降低。其中Q188R突变体的Km为1.2 mM(是野生型的6.7倍,提示底物亲和力下降),kcat为1.8 s⁻¹(是野生型的1/13.9,提示催化周转能力受损),相较于野生型GALT,其催化效率(kcat/Km)下降92%[1] |
| 酶活实验 |
1. 以Galactose 1-phosphate Potassium salt为底物的野生型及突变型GALT催化活性检测实验:在含MgCl₂(GALT的辅因子)、UDP-葡萄糖(第二底物)、系列浓度Galactose 1-phosphate Potassium salt(0.05–5 mM)及纯化的重组野生型/突变型GALT酶的pH 7.4缓冲体系中构建反应。加入GALT启动反应,37℃孵育10–30 min(控制时间以保证反应线性动力学)。通过偶联含UDP-半乳糖脱氢酶和NAD⁺的次级反应体系,将反应产物UDP-半乳糖的生成量转化为可检测的NADH(340 nm处有特征吸收),用分光光度计每2 min检测一次340 nm处吸光度,计算初始反应速率以确定GALT对该底物的Km(底物亲和力)和kcat(催化周转数)[1]
2. GALT底物特异性验证实验:修改反应体系,将Galactose 1-phosphate Potassium salt替换为等浓度(1 mM)的其他磷酸化糖类似物(如葡萄糖1-磷酸、甘露糖1-磷酸),测定GALT对这些类似物的残余催化活性(以对目标底物的活性为参照)。结果证实GALT对半乳糖1-磷酸的底物特异性>95%,对其他类似物的活性仅为目标底物的<5%[1] |
| 细胞实验 |
1. GALT缺陷成纤维细胞内半乳糖1-磷酸堆积检测实验:将I型半乳糖血症患者(Q188R突变)和正常对照来源的成纤维细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板,培养至80%汇合度后,用含Galactose 1-phosphate Potassium salt(0.5–5 mM)的无血清培养基37℃、5% CO₂条件下孵育24 h。孵育结束后收集细胞,冷PBS洗涤,高氯酸裂解提取细胞内代谢物,氢氧化钾中和后,采用高效液相色谱(HPLC)结合紫外检测(磷酸化糖特征波长)定量细胞内半乳糖1-磷酸浓度,以细胞总蛋白含量归一化堆积水平,消除细胞数量差异的影响[1]
2. Galactose 1-phosphate Potassium salt处理对GALT缺陷细胞活力的影响实验:将上述突变型和野生型成纤维细胞以5×10⁴个/孔接种于96孔板,用Galactose 1-phosphate Potassium salt(0–10 mM)处理48 h。加入细胞活力检测试剂37℃孵育2 h,检测对应波长吸光度。野生型成纤维细胞即使在10 mM浓度下仍维持>90%的活力,而突变型细胞活力呈剂量依赖性下降(10 mM时活力降至58%,细胞毒性EC50为7.5 mM)[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 半乳糖-1-磷酸钾盐是半乳糖代谢途径中的一种天然磷酸化糖代谢物,并非治疗药物。它是在半乳糖分解代谢的第一步中,经半乳糖激酶 (GALK) 的作用由半乳糖生成的[1]。2. 病理生理作用:在 I 型半乳糖血症(由常染色体隐性遗传的 GALT 缺乏引起)中,半乳糖-1-磷酸钾盐无法被 GALT 有效转化为 UDP-半乳糖,导致其在多种组织(肝脏、肾脏、大脑、红细胞)中积累。这种积累是I型半乳糖血症临床表现的主要原因,包括肝功能障碍、认知障碍和肾小管损伤[1]
3. 研究应用:半乳糖-1-磷酸钾盐广泛用作体外和细胞实验的底物,用于评估GALT酶活性、筛选GALT缺陷样本以及研究与I型半乳糖血症相关的GALT基因突变的功能影响[1] |
| 分子式 |
C6H11O9P.2K
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|---|---|
| 分子量 |
336.32
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| 精确质量 |
335.941
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| CAS号 |
19046-60-7
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| PubChem CID |
87916
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
172.38
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
266
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| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
C([C@@H]1[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@H](O1)OP(=O)([O-])[O-])O)O)O)O.[K+].[K+]
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| InChi Key |
KCIDZIIHRGYJAE-YGFYJFDDSA-L
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| InChi Code |
InChI=1S/C6H13O9P.2K/c7-1-2-3(8)4(9)5(10)6(14-2)15-16(11,12)13;;/h2-10H,1H2,(H2,11,12,13);;/q;2*+1/p-2/t2-,3+,4+,5-,6-;;/m1../s1
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| 化学名 |
dipotassium;[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] phosphate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~125 mg/mL (~371.67 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (297.34 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9734 mL | 14.8668 mL | 29.7336 mL | |
| 5 mM | 0.5947 mL | 2.9734 mL | 5.9467 mL | |
| 10 mM | 0.2973 mL | 1.4867 mL | 2.9734 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。