| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Gli(IC50= 5 μM)
GLI-mediated transcription (downstream of Smoothened and Sufu in the Hedgehog signaling pathway). IC₅₀ ≈ 5 µM in cellular assays using SAG-treated Shh-L2 cells.[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Hh 信号传导被 GANT58 抑制下游。事实上，GANT58 通过阻断 Smo 和 Sufu 来抑制 Hh 信号传导。由于核输出信号突变的 GLI1 诱导的转录仍被阻断，因此 GANT58 主要在核水平发挥作用。 GANT58 在体外以依赖于 GLI 的方式成功抑制肿瘤细胞的生长。这是通过使用下游激活 Hh 通路来阻断细胞生长的人类前列腺癌细胞来实现的[1]。
已证明 GANT58 (NSC75503) 可阻止 GLI1（以及其他 GLI 物种）激活转录。已证明 GANT58 抑制 GLI 反式激活[2]。 GANT58 通过基于细胞的筛选被鉴定为GLI介导转录的小分子拮抗剂。在转染的HEK293细胞中，它能以剂量依赖的方式抑制GLI1和组成型活性ΔN-GLI2 (GLI2β)介导的转录。[1] 在使用小鼠NIH 3T3 Shh-L2细胞系（稳定整合了Gli报告基因）的更生理性系统中，GANT58 抑制SAG诱导的Hh信号传导，IC₅₀约为5 µM，与Smo抑制剂环巴胺相当。该化合物不直接抑制报告酶。[1] 在Ptch1⁻/⁻小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs，表现出组成型Hh通路激活）中，用10 µM GANT58 处理显著降低了内源性Hh靶基因Gli1的mRNA水平，表明强烈的通路抑制。在测量内源性Ptch1表达和C3H10T1/2细胞中SAG诱导的碱性磷酸酶表达的实验中也观察到类似的抑制。[1] 在Sufu⁻/⁻ MEFs（通路激活发生在Smo下游）中，用10 µM GANT58 处理显著降低了Hh靶基因Gli1和Hip1的高表达水平（包括mRNA和蛋白水平）。正如预期，环巴胺在此模型中无效，证实了GANT58 作用于Smo下游。[1] GANT58 对Hh/Gli通路表现出高选择性，因为用高达10 µM的浓度处理不影响无关的信号通路，如TNF/NF-κB、糖皮质激素受体反式激活或Ras-Raf-MEK-MAPK级联。它在其他报道的针对HGF/Met、C/EBPα或HIF-1抑制剂的筛选中也显示无活性。[1] GANT58 抑制了用SHH表达质粒转染的NIH 3T3细胞中的细胞转化，减少了软琼脂中的集落形成。[1] 在具有高水平GLI1的人肿瘤细胞系（PANC1胰腺腺癌和22Rv1前列腺癌）中，用5 µM GANT58 处理48小时降低了GLI1和PTCH的mRNA表达，与GLI抑制一致。相比之下，环巴胺效果甚微，表明这些细胞中存在下游通路激活。通过BrdU掺入测量的增殖在这些GLI1高表达的细胞系中被抑制了约40-50%，但在低GLI1细胞系（HepG2, Jurkat）中仅被轻微抑制（0-10%）。环巴胺对增殖的影响很小。[1] 在作用机制上，GANT58 在细胞核内发挥作用以阻断GLI功能。它能抑制核积累的GLI突变体以及野生型GLI。它不影响初级纤毛的形态/频率（对上游Hh信号传导重要的结构）。它不诱导Creb磷酸化，表明其抑制作用不是通过蛋白激酶A激活介导的。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
通过将 GLI1 阳性 22Rv1 前列腺癌细胞皮下注射到裸鼠体内来产生肿瘤（中位大小约 250 mm3）。每天，给裸鼠注射 4-5 次单独的溶剂、GANT61、GANT58 或环巴明，剂量为 50 mg/kg。但三天后，接受环巴明的动物在注射部位出现严重溃疡的迹象。因此，治疗计划被修改为包括每两天注射一次。GANT 也引入了该方案，以便可以比较所有化合物，即使用这些化合物治疗的小鼠没有表现出任何毒性。每次注射距离肿瘤两到三厘米。对于所有化合物，在 18 天的治疗期间都会抑制肿瘤细胞的生长。 GANT58 或环巴明的给药可抑制额外异种移植物的生长并限制肿瘤的生长[1]。
在使用GLI1阳性22Rv1细胞的人前列腺癌异种移植模型中，对裸鼠中已建立的肿瘤（中位大小~250 mm³）用GANT58 以50 mg/kg的剂量通过皮下注射，每隔一天给药一次，持续18天。治疗抑制了异种移植物的进一步生长并限制了肿瘤大小的增加，但未诱导肿瘤完全消退（与GANT61不同）。在治疗期间未观察到不良反应，如体重减轻、溃疡或不适迹象。[1] 治疗后分析显示，与溶剂对照相比，细胞增殖（BrdU掺入）受到明显抑制。Cleaved caspase-3染色表明，与溶剂或环巴胺处理的肿瘤相比，GANT58 处理的样本中细胞凋亡增加。定量PCR分析证实，GANT58 强烈降低了异种移植细胞中Hh靶基因PTCH的表达。[1] |
| 细胞实验 |
对于初始化合物筛选，将HEK293细胞瞬时转染GLI1表达质粒和GLI依赖的萤火虫荧光素酶报告质粒（12xGliB-Luc）。将细胞接种于96孔板中，并用终浓度为10 µM的测试化合物处理24小时。使用双荧光素酶检测试剂盒测量荧光素酶活性并进行归一化。[1]
对于内源性Hh信号传导实验，用Smo激动剂SAG与测试化合物一起处理Shh-L2细胞（稳定整合Gli报告基因的NIH 3T3细胞）48小时。测量报告基因活性（萤火虫荧光素酶）并相对于对照海肾荧光素酶进行归一化。[1] 对于内源性靶基因的定量PCR分析，将细胞（如Ptch1⁻/⁻ MEFs, Sufu⁻/⁻ MEFs, PANC1, 22Rv1）培养至汇合，并用化合物（如10 µM）处理2-4天。提取RNA，进行逆转录，并通过实时荧光定量PCR定量Gli1、Hip1或PTCH等基因的mRNA水平，并相对于Gapdh或总蛋白进行归一化。[1] 对于BrdU掺入增殖实验，将亚汇合的细胞在含有5 µM测试化合物或DMSO的低血清培养基（2.5% FBS）中于96孔板内培养48小时。然后用BrdU标记细胞2小时，固定，并使用化学发光细胞增殖ELISA试剂盒定量BrdU掺入。[1] |
| 动物实验 |
Female BALB/c nude mice were injected subcutaneously at the posterior flank with 5 x 10⁶ 22Rv1 human prostate cancer cells suspended in a 1:1 mixture of RPMI 1640 medium and Matrigel. Tumors were allowed to grow until they reached a median size of approximately 250 mm³ (5-6 days). Animals were then randomly divided into treatment groups (n=4-5 per group).
GANT58 was dissolved in a solvent consisting of corn oil and ethanol (4:1 ratio). The treatment regimen consisted of subcutaneous injections of 50 mg/kg GANT58 (or solvent control) every second day for a total of 18 days. Injections were administered several centimeters away from the tumor site. Tumor volumes were measured and calculated using the formula: length × width × 0.5 × (length + width). At the end of the treatment period, animals were given a BrdU pulse (50 mg/kg) 30 minutes before sacrifice, and tumors were excised for further analysis (histology, qPCR).[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In the in vivo xenograft study, mice treated with GANT58 at 50 mg/kg every second day for 18 days showed no signs of adverse side effects such as weight loss, ulcerations at the injection site, or general ill-being. This was in contrast to cyclopamine treatment, which initially caused severe ulcerations when administered daily.[1]
In vitro, treatment of several cell lines with concentrations sufficient for GLI inhibition (e.g., 5-10 µM) did not cause observable toxicity or reduction in cell viability that could confound the assays.[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4-(2,4,5-tripyridin-4-yl-3-thiophenyl)pyridine is a member of pyridines.
GANT58 (NSC 75503) is a small-molecule compound identified from a high-throughput screen for inhibitors of GLI-mediated transcription, which is the final step in the Hedgehog (Hh) signaling pathway. Chemically, it possesses a thiophene core with four pyridine rings.[1] Its primary significance lies in its ability to inhibit Hh signaling downstream of the transmembrane protein Smoothened (Smo) and the negative regulator Suppressor of Fused (Sufu), directly targeting the GLI transcription factors. This makes it a potential therapeutic tool for cancers with downstream activation of the Hh pathway, which are often resistant to upstream Smo inhibitors like cyclopamine.[1] The compound demonstrates high selectivity for the Hh/Gli pathway and exhibits cytostatic antiproliferative effects on GLI-dependent tumor cells in vitro and in vivo, with evidence of inducing apoptosis in the in vivo tumor microenvironment.[1] |
| 分子式 |
C24H16N4S
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|---|---|
| 分子量 |
392.47564
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| 精确质量 |
392.109
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| 元素分析 |
C, 73.45; H, 4.11; N, 14.28; S, 8.17
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| CAS号 |
64048-12-0
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| PubChem CID |
253078
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
414.1±40.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
169.0±17.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
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| LogP |
3.12
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| tPSA |
79.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
449
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1(C2=C(C(C3=CC=NC=C3)=C(S2)C4=CC=NC=C4)C5=CC=NC=C5)=CC=NC=C1
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| InChi Key |
USWLOKMMUTWFMD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H16N4S/c1-9-25-10-2-17(1)21-22(18-3-11-26-12-4-18)24(20-7-15-28-16-8-20)29-23(21)19-5-13-27-14-6-19/h1-16H
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| 化学名 |
2,3,4,5-Tetra(4-pyridyl)thiophene
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| 别名 |
NSC75503; NSC-75503; NSC 75503; GANT 58; GANT-58.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Ethanol : ~20 mg/mL (~50.96 mM)
DMSO : ~9.09 mg/mL (~23.16 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清EtOH储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 9.1mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 9.1 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 6 中的溶解度: 10% EtOH+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: 2 mg/mL (5.10 mM) 配方 7 中的溶解度: 5 mg/mL (12.74 mM) in 45% PEG300 5% Tween-80 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5479 mL | 12.7395 mL | 25.4790 mL | |
| 5 mM | 0.5096 mL | 2.5479 mL | 5.0958 mL | |
| 10 mM | 0.2548 mL | 1.2740 mL | 2.5479 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Glabrescione B
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
