| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Gli(IC50= 5 μM)
GLI-mediated transcription (downstream of Smoothened and Sufu in the Hedgehog signaling pathway). IC₅₀ ≈ 5 µM in cellular assays using SAG-treated Shh-L2 cells.[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Hh 信号传导被 GANT58 抑制下游。事实上，GANT58 通过阻断 Smo 和 Sufu 来抑制 Hh 信号传导。由于核输出信号突变的 GLI1 诱导的转录仍被阻断，因此 GANT58 主要在核水平发挥作用。 GANT58 在体外以依赖于 GLI 的方式成功抑制肿瘤细胞的生长。这是通过使用下游激活 Hh 通路来阻断细胞生长的人类前列腺癌细胞来实现的[1]。
已证明 GANT58 (NSC75503) 可阻止 GLI1（以及其他 GLI 物种）激活转录。已证明 GANT58 抑制 GLI 反式激活[2]。 GANT58 通过基于细胞的筛选被鉴定为GLI介导转录的小分子拮抗剂。在转染的HEK293细胞中，它能以剂量依赖的方式抑制GLI1和组成型活性ΔN-GLI2 (GLI2β)介导的转录。[1] 在使用小鼠NIH 3T3 Shh-L2细胞系（稳定整合了Gli报告基因）的更生理性系统中，GANT58 抑制SAG诱导的Hh信号传导，IC₅₀约为5 µM，与Smo抑制剂环巴胺相当。该化合物不直接抑制报告酶。[1] 在Ptch1⁻/⁻小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs，表现出组成型Hh通路激活）中，用10 µM GANT58 处理显著降低了内源性Hh靶基因Gli1的mRNA水平，表明强烈的通路抑制。在测量内源性Ptch1表达和C3H10T1/2细胞中SAG诱导的碱性磷酸酶表达的实验中也观察到类似的抑制。[1] 在Sufu⁻/⁻ MEFs（通路激活发生在Smo下游）中，用10 µM GANT58 处理显著降低了Hh靶基因Gli1和Hip1的高表达水平（包括mRNA和蛋白水平）。正如预期，环巴胺在此模型中无效，证实了GANT58 作用于Smo下游。[1] GANT58 对Hh/Gli通路表现出高选择性，因为用高达10 µM的浓度处理不影响无关的信号通路，如TNF/NF-κB、糖皮质激素受体反式激活或Ras-Raf-MEK-MAPK级联。它在其他报道的针对HGF/Met、C/EBPα或HIF-1抑制剂的筛选中也显示无活性。[1] GANT58 抑制了用SHH表达质粒转染的NIH 3T3细胞中的细胞转化，减少了软琼脂中的集落形成。[1] 在具有高水平GLI1的人肿瘤细胞系（PANC1胰腺腺癌和22Rv1前列腺癌）中，用5 µM GANT58 处理48小时降低了GLI1和PTCH的mRNA表达，与GLI抑制一致。相比之下，环巴胺效果甚微，表明这些细胞中存在下游通路激活。通过BrdU掺入测量的增殖在这些GLI1高表达的细胞系中被抑制了约40-50%，但在低GLI1细胞系（HepG2, Jurkat）中仅被轻微抑制（0-10%）。环巴胺对增殖的影响很小。[1] 在作用机制上，GANT58 在细胞核内发挥作用以阻断GLI功能。它能抑制核积累的GLI突变体以及野生型GLI。它不影响初级纤毛的形态/频率（对上游Hh信号传导重要的结构）。它不诱导Creb磷酸化，表明其抑制作用不是通过蛋白激酶A激活介导的。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
通过将 GLI1 阳性 22Rv1 前列腺癌细胞皮下注射到裸鼠体内来产生肿瘤（中位大小约 250 mm3）。每天，给裸鼠注射 4-5 次单独的溶剂、GANT61、GANT58 或环巴明，剂量为 50 mg/kg。但三天后，接受环巴明的动物在注射部位出现严重溃疡的迹象。因此，治疗计划被修改为包括每两天注射一次。GANT 也引入了该方案，以便可以比较所有化合物，即使用这些化合物治疗的小鼠没有表现出任何毒性。每次注射距离肿瘤两到三厘米。对于所有化合物，在 18 天的治疗期间都会抑制肿瘤细胞的生长。 GANT58 或环巴明的给药可抑制额外异种移植物的生长并限制肿瘤的生长[1]。
在使用GLI1阳性22Rv1细胞的人前列腺癌异种移植模型中，对裸鼠中已建立的肿瘤（中位大小~250 mm³）用GANT58 以50 mg/kg的剂量通过皮下注射，每隔一天给药一次，持续18天。治疗抑制了异种移植物的进一步生长并限制了肿瘤大小的增加，但未诱导肿瘤完全消退（与GANT61不同）。在治疗期间未观察到不良反应，如体重减轻、溃疡或不适迹象。[1] 治疗后分析显示，与溶剂对照相比，细胞增殖（BrdU掺入）受到明显抑制。Cleaved caspase-3染色表明，与溶剂或环巴胺处理的肿瘤相比，GANT58 处理的样本中细胞凋亡增加。定量PCR分析证实，GANT58 强烈降低了异种移植细胞中Hh靶基因PTCH的表达。[1] |
| 细胞实验 |
对于初始化合物筛选，将HEK293细胞瞬时转染GLI1表达质粒和GLI依赖的萤火虫荧光素酶报告质粒（12xGliB-Luc）。将细胞接种于96孔板中，并用终浓度为10 µM的测试化合物处理24小时。使用双荧光素酶检测试剂盒测量荧光素酶活性并进行归一化。[1]
对于内源性Hh信号传导实验，用Smo激动剂SAG与测试化合物一起处理Shh-L2细胞（稳定整合Gli报告基因的NIH 3T3细胞）48小时。测量报告基因活性（萤火虫荧光素酶）并相对于对照海肾荧光素酶进行归一化。[1] 对于内源性靶基因的定量PCR分析，将细胞（如Ptch1⁻/⁻ MEFs, Sufu⁻/⁻ MEFs, PANC1, 22Rv1）培养至汇合，并用化合物（如10 µM）处理2-4天。提取RNA，进行逆转录，并通过实时荧光定量PCR定量Gli1、Hip1或PTCH等基因的mRNA水平，并相对于Gapdh或总蛋白进行归一化。[1] 对于BrdU掺入增殖实验，将亚汇合的细胞在含有5 µM测试化合物或DMSO的低血清培养基（2.5% FBS）中于96孔板内培养48小时。然后用BrdU标记细胞2小时，固定，并使用化学发光细胞增殖ELISA试剂盒定量BrdU掺入。[1] |
| 动物实验 |
将 5 × 10⁶ 个 22Rv1 人前列腺癌细胞悬浮于 RPMI 1640 培养基和 Matrigel 的 1:1 混合物中，皮下注射到雌性 BALB/c 裸鼠的后侧腹部。待肿瘤生长至中位体积约为 250 mm³（5-6 天）后，将动物随机分为治疗组（每组 n=4-5）。
GANT58 溶解于玉米油和乙醇（4:1 比例）的混合溶剂中。治疗方案为每隔一天皮下注射 50 mg/kg 的 GANT58（或溶剂对照），共 18 天。注射点距离肿瘤部位数厘米。测量肿瘤体积，并使用以下公式计算：长度 × 宽度 × 0.5 ×（长度 + 宽度）。治疗期结束后，在处死动物前 30 分钟给予 BrdU 脉冲（50 mg/kg），并切除肿瘤进行进一步分析（组织学、qPCR）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在体内异种移植研究中，小鼠每隔一天接受 50 mg/kg 的 GANT58 治疗，持续 18 天，未出现体重减轻、注射部位溃疡或全身不适等不良反应。这与环巴胺治疗形成鲜明对比，后者每日给药时最初会导致严重的溃疡。[1]
在体外，用足以抑制 GLI 的浓度（例如 5-10 µM）处理几种细胞系，未观察到明显的毒性或细胞活力下降，因此不会干扰检测结果。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4-(2,4,5-三吡啶-4-基-3-噻吩基)吡啶属于吡啶类化合物。
GANT58 (NSC 75503) 是一种小分子化合物，它是通过高通量筛选GLI介导的转录抑制剂而发现的，而GLI介导的转录是Hedgehog (Hh)信号通路的最后一步。从化学结构上看，它具有一个噻吩核心和四个吡啶环。[1] 它的主要意义在于能够抑制跨膜蛋白Smoothened (Smo)和负调控因子Suppressor of Fused (Sufu)下游的Hh信号通路，直接靶向GLI转录因子。这使其成为治疗Hh通路下游激活相关癌症的潜在工具，这类癌症通常对环巴胺等上游Smo抑制剂具有耐药性。[1] 该化合物对Hh/Gli通路具有高度选择性，并在体外和体内对GLI依赖性肿瘤细胞表现出细胞抑制性抗增殖作用，且有证据表明其可在体内肿瘤微环境中诱导细胞凋亡。[1] |
| 分子式 |
C24H16N4S
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|---|---|
| 分子量 |
392.47564
|
| 精确质量 |
392.109
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| 元素分析 |
C, 73.45; H, 4.11; N, 14.28; S, 8.17
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| CAS号 |
64048-12-0
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| PubChem CID |
253078
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
414.1±40.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
169.0±17.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
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| LogP |
3.12
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| tPSA |
79.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
449
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1(C2=C(C(C3=CC=NC=C3)=C(S2)C4=CC=NC=C4)C5=CC=NC=C5)=CC=NC=C1
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| InChi Key |
USWLOKMMUTWFMD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H16N4S/c1-9-25-10-2-17(1)21-22(18-3-11-26-12-4-18)24(20-7-15-28-16-8-20)29-23(21)19-5-13-27-14-6-19/h1-16H
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| 化学名 |
2,3,4,5-Tetra(4-pyridyl)thiophene
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| 别名 |
NSC75503; NSC-75503; NSC 75503; GANT 58; GANT-58.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Ethanol : ~20 mg/mL (~50.96 mM)
DMSO : ~9.09 mg/mL (~23.16 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清EtOH储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 9.1mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 0.91 mg/mL (2.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 9.1 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 6 中的溶解度: 10% EtOH+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: 2 mg/mL (5.10 mM) 配方 7 中的溶解度: 5 mg/mL (12.74 mM) in 45% PEG300 5% Tween-80 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5479 mL | 12.7395 mL | 25.4790 mL | |
| 5 mM | 0.5096 mL | 2.5479 mL | 5.0958 mL | |
| 10 mM | 0.2548 mL | 1.2740 mL | 2.5479 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Glabrescione B
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
