| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
KRAS G12C (IC50 <0.01 μM)
KRAS G12C mutant. Divarasib specifically targets the mutant KRAS protein with a glycine-to-cysteine substitution at position 12 (G12C). The compound covalently binds to the switch II (SW-II) pocket of KRAS G12C, forming an irreversible bond with the mutant cysteine residue (Cys12). This binding locks KRAS in the inactive GDP-bound conformation, preventing its activation to the GTP-bound state and thereby blocking downstream signaling pathways including MAPK (RAF-MEK-ERK) and PI3K-AKT, which are essential for cancer cell proliferation and survival. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
divarasib（化合物 17a）在 K-Ras G12C 烷基化的 HCC1171 细胞中的 EC50 为 2 nM [2]。
在无细胞生化分析中，Divarasib 可直接结合并抑制 KRAS G12C。其对 KRAS G12C 的抑制 IC50 值小于 0.01 uM (10 nM)。在均相时间分辨荧光 (HTRF) 分析中，Divarasib 的 IC50 值为 2.9 pM。该化合物与 KRAS G12C 的开关 II 口袋共价结合。其结合特异性针对 GDP 结合形式的 KRAS，不与野生型 KRAS 或其他 KRAS 突变体结合。该结合机制不可逆，其特征在于与 Cys12 形成共价加合物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Divarasib（10-100 mg/kg/天；口服，持续 7 天）可降低游离 KRAS G12C 的含量 [1]。
Divarasib在体外能有效抑制KRAS G12C突变型癌细胞的增殖。在NCI-H358肺癌细胞（KRAS G12C突变型）中，Divarasib通过抑制ERK磷酸化（p-ERK）来抑制KRAS依赖性信号通路，其IC50值在低纳摩尔范围内。该化合物对NCI-HCC1171细胞（KRAS G12C突变型）烷基化的IC50值为0.32 nM。Divarasib能有效阻断KRAS突变型癌细胞中MAPK通路的激活，并诱导G1期细胞周期阻滞和细胞凋亡。相反，在KRAS野生型细胞或其他KRAS突变细胞中未观察到明显的生长抑制。 |
| 酶活实验 |
GDC-6036结合的KRAS G12C的制备[1]
通过烷基化反应制备GDC-6036结合的KRAS G12C蛋白。简而言之，将5 μM的未标记和同位素标记（Arg/Lys 13C15N）的KRAS G12C蛋白与20 μM的GDC-6036在20 mM HEPE（pH 8）、150 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM EDTA、1 mM TCEP和5 mM GDP的缓冲液中反应。室温孵育过夜后，将未标记和标记的KRAS G12C转移至Amicon 3 kDa超滤离心管中进行缓冲液交换，最终得到10 mM HEPES、150 mM NaCl、pH 7.4的缓冲液。取10 μL样品，使用Q Exactive Plus质谱仪，采用高分辨率精确质量质谱法评估GDC-6036烷基化的程度，具体方法如前所述。[1] 外源蛋白添加实验[1] 将游离的和GDC-6036结合的KRAS G12C蛋白以两倍系列稀释的方式加入到20 μg总蛋白（足以进行5次重复实验）的空白肿瘤组织裂解液中。对于异种移植瘤样本分析，空白组织裂解液取自携带非G12C突变型KRAS（KRAS G12S）的A549小鼠异种移植瘤模型。对于人肿瘤样本分析，空白组织裂解液取自不携带KRAS G12C突变的切除人肿瘤样本。质量控制 (QC) 样品制备方法如下：将游离态和 GDC-6036 结合的 KRAS G12C 标准品按 4:1、1:1 和 1:4 的比例混合于空白组织裂解液中，使 KRAS G12C 总蛋白浓度恒定为 5 fmol/μg。在每个样品中加入固定量的同位素标记（Arg/Lys 13C15N）的游离态和 GDC-6036 结合的 KRAS G12C，总量为 125 fmol。 采用生化烷基化试验评估 Divarasib 对 KRAS G12C 的抑制作用。将纯化的 KRAS G12C 蛋白（GDP 结合型）与不同浓度的 Divarasib（0.001-1000 nM）孵育 1-4 小时。终止反应并使蛋白变性。通过质谱联用（LC-MS）检测 Cys12 的烷基化情况，以定量抑制剂修饰的蛋白百分比。或者，使用标记的抗 KRAS 抗体和抑制剂的 HTRF 试验可以定量结合情况。烷基化的 IC50 定义为 50% KRAS G12C 发生共价修饰时的浓度。 |
| 细胞实验 |
核心针穿刺活检的采集和保存[1]
在最后一次给予GDC-6036后2、8或24小时，使用18号活检针采集肿瘤活检样本。样本要么在冷冻管中速冻，要么包埋在最佳切割温度（OCT）化合物中，并在−80 °C下保存，直至进一步分析。[1] 人非小细胞肺癌（NSCLC）肿瘤样本[1] 从BioIVT公司获得了三个新鲜冷冻的人NSCLC肿瘤样本，包括两个KRAS G12C阳性样本和一个KRAS G12C阴性样本。所有样本均储存于−80 °C直至进一步分析。[1] 冷冻肿瘤活检样本制备[1] 将冷冻肿瘤活检样本转移至预先装有1.4 mm陶瓷珠和200 μL冰冷Pierce裂解缓冲液（含cOmplete无EDTA蛋白酶抑制剂混合片剂）的0.5 mL聚丙烯管中，然后使用Bead Ruptor 24低温冷却装置进行匀浆。将组织裂解液转移至1.5 mL Protein LoBind管中，并在4 °C下以17,000 g离心5分钟。使用Pierce BCA蛋白测定试剂盒测定上清液的蛋白浓度。 基于细胞的检测采用NCI-H358或其他KRAS G12C突变型癌细胞系。将细胞接种于96孔板中，并用浓度为0.001-100 uM的Divarasib处理48-96小时。使用CellTiter-Glo（ATP定量）或MTT法检测细胞活力。根据剂量反应曲线计算生长抑制的EC50值。对于p-ERK抑制，将细胞用Divarasib处理2-6小时后裂解，并通过Western blotting、AlphaLISA或HTRF检测p-ERK水平。确定通路抑制的IC50值。通过流式细胞术检测cleaved caspase-3或Annexin V来检测细胞凋亡。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性 CB-17 SCID（近交系）小鼠（20-21 周龄；24.1 克）人 NSCLC NCI-H2030.X1.1 细胞 [1]
剂量：10、25 或 100 mg/kg 给药途径：每日一次 (QD) 灌胃给药，持续 7 天（载体：0.5% 甲基纤维素） 实验结果：游离 KRAS G12C 与内标的比值降低。在所有时间点（末次给药后 2、8 和 24 小时）均观察到剂量依赖性靶点结合，在最高评估剂量 100 mg/kg 下，KRAS G12C 结合率 >90%。 雌性 CB-17 SCID（近交系）小鼠，20-21 周龄，平均体重 24.1 g，购自 Charles River 实验室。人非小细胞肺癌 (NSCLC) NCI-H2030.X1.1 细胞在体外培养，于对数生长期收获，并以 1:1 的比例重悬于含 Matrigel（BD Biosciences）的 Hank's 平衡盐溶液中。然后将细胞皮下注射到 CB-17 SCID（近交系）小鼠的右侧胸腔。每只小鼠注射 10 × 10⁶ 个细胞，注射体积为 100 μL。对肿瘤进行监测，直至其平均体积达到 238–524 mm³。根据肿瘤体积，将小鼠分为 10 组，每组 4 只小鼠。在开始给予 GDC-6036 时，所有 10 组小鼠的平均肿瘤体积为 363 mm³。小鼠分别接受赋形剂（100 μL 0.5% 甲基纤维素）、10、25 或 100 mg/kg 的 GDC-6036。赋形剂和 GDC-6036 均通过灌胃法（PO）给药，每日一次，连续 7 天，每次灌胃体积为 100 μL。在分组结束时（第 0 天）和给药 1 周后（第 7 天）测量肿瘤体积，并使用 GraphPad Prism 软件绘制肿瘤体积的百分比变化图。在第 7 天采集肿瘤组织样本。 Divarasib 的体内疗效已在小鼠异种移植模型中得到评估。在 PaCa-2 胰腺癌小鼠异种移植模型（KRAS G12C 突变型）中，Divarasib 每日口服一次，剂量范围为 1 至 100 mg/kg。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积。观察到显著的肿瘤生长抑制（TGI），且在高剂量下肿瘤消退。对切除肿瘤的生物标志物分析显示 p-ERK 水平呈剂量依赖性降低。在其他 KRAS G12C 突变模型（例如，NCI-H358 肺癌、MIA PaCa-2 胰腺癌、SW837 结直肠癌）中，Divarasib 每日口服一次也表现出强大的抗肿瘤活性。该化合物在有效剂量下具有良好的耐受性。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Divarasib 具有良好的口服生物利用度，在人体和临床前动物模型中均能被有效吸收。在人体中，其末端消除半衰期约为 17.6 ± 2.7 小时，支持每日一次给药。该化合物代谢广泛，给药后 840 小时内，约 98% 的放射性标记剂量可通过粪便（95%）和尿液（3%）排出。在临床剂量范围（50-400 mg）内，Cmax 和 AUC 均呈剂量比例增加。在 I 期临床研究中，该药物的药代动力学特征表现为中等至高的口服生物利用度、低至中等的血浆蛋白结合率以及极低的药物相互作用风险。给药后 2-4 小时内即可达到血浆峰浓度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Divarasib 已在 I 期临床试验 (NCT04449874) 中针对携带 KRAS G12C 突变的晚期或转移性实体瘤患者进行了评估。最常见的不良事件（所有级别）包括恶心、腹泻、呕吐、疲乏和丙氨酸氨基转移酶升高。部分患者会出现 ≥3 级的治疗相关不良事件，主要表现为胃肠道毒性和肝毒性。总体安全性可通过支持治疗进行控制。动物临床前毒性研究显示，Divarasib 可引起可逆的、剂量依赖性的胃肠道和肝脏毒性。目前尚未发现其他意外毒性。与其他 KRAS G12C 抑制剂一样，Divarasib 也可能引起皮疹和其他皮肤反应。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Divarasib是一种口服的KRAS致癌突变G12C抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，Divarasib选择性地靶向KRAS G12C突变体，并抑制KRAS G12C突变体依赖的信号传导。KRAS是RAS癌基因家族的成员，在细胞信号传导、分裂和分化中发挥着关键作用。KRAS突变可诱导组成型信号转导，导致肿瘤细胞生长、增殖、侵袭和转移。
Divarasib (GDC-6036) 由基因泰克/罗氏公司开发。截至 2025 年，该化合物正处于针对 KRAS G12C 突变型实体瘤（包括非小细胞肺癌 (NSCLC)、结直肠癌 (CRC) 和其他实体瘤）的临床试验（I/II 期）。I 期研究的初步临床活性数据显示，该化合物在 NSCLC 和 CRC 患者中具有客观缓解率 (ORR)。该化合物尚未获得任何监管机构的批准。临床前研究表明，与前几代 KRAS G12C 抑制剂相比，Divarasib 具有更高的效力和选择性。其化学结构属于喹唑啉类化合物。化合物名称“Divarasib”是其国际非专利名称 (INN)。 |
| 分子式 |
C29H32CLF4N7O2
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|---|---|
| 分子量 |
622.06
|
| 精确质量 |
621.22
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| 元素分析 |
C, 55.99; H, 5.19; Cl, 5.70; F, 12.22; N, 15.76; O, 5.14
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| CAS号 |
2417987-45-0
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| 相关CAS号 |
2762240-36-6 (adipate); 2417987-45-0 (active atropisomer);2417917-17-8 (atropisomers)
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| PubChem CID |
146624881
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid
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| LogP |
5.4
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| tPSA |
101Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
43
|
| 分子复杂度/Complexity |
997
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
C[C@H]1CN(CCN1C2=NC(=NC3=C(C(=C(C=C32)Cl)C4=C(C(=CC(=N4)N)C)C(F)(F)F)F)OC[C@@H]5CCCN5C)C(=O)C=C
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| InChi Key |
ZRBPIAWWRPFDPY-IRXDYDNUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H32ClF4N7O2/c1-5-21(42)40-9-10-41(16(3)13-40)27-18-12-19(30)22(26-23(29(32,33)34)15(2)11-20(35)36-26)24(31)25(18)37-28(38-27)43-14-17-7-6-8-39(17)4/h5,11-12,16-17H,1,6-10,13-14H2,2-4H3,(H2,35,36)/t16-,17-/m0/s1
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| 化学名 |
1-((S)-4-(7-((R)-6-amino-4-methyl-3-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)-6-chloro-8-fluoro-2-(((S)-1-methylpyrrolidin-2-yl)methoxy)quinazolin-4-yl)-3-methylpiperazin-1-yl)prop-2-en-1-one
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| 别名 |
GDC-6036; RG6330; GDC 6036; RG-6330; GDC6036; RG 6330
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~160.76 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (4.02 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6076 mL | 8.0378 mL | 16.0756 mL | |
| 5 mM | 0.3215 mL | 1.6076 mL | 3.2151 mL | |
| 10 mM | 0.1608 mL | 0.8038 mL | 1.6076 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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