| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Survivin; Op18
Survivin and Op18 expression are both potently and specifically inhibited by GDP366. Survivin and Op18 have lower mRNA and protein levels as a result of GDP366. Despite the fact that GDP366 significantly raises the levels of p53 and p21, this inhibitory effect is not reliant on their health. In vitro and in vivo (using a nude mouse model), GDP366 significantly slows the growth of tumor cells without quickly inducing apoptosis. Multiple kinds of cancer cell lines are induced to become polyploid by GDP366. By decreasing telomerase activity, GDP366 causes chromosomal instability to increase and accelerates cellular senescence[1]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
GDP366 可以有效且特异性地抑制 Survivin 和 Op18 的表达。由于 GDP366，Survivin 和 Op18 的 mRNA 和蛋白质水平较低。尽管 GDP366 显着提高了 p53 和 p21 的水平，但这种抑制作用并不依赖于它们的健康状况。在体外和体内（使用裸鼠模型），GDP366 显着减缓肿瘤细胞的生长，但不会快速诱导细胞凋亡。 GDP366可诱导多种癌细胞系形成多倍体。 GDP366 通过降低端粒酶活性，导致染色体不稳定性增加并加速细胞衰老[1]。
Western blot 显示，在 HCT116 结肠癌细胞中，GDP366 剂量和时间依赖性地降低 survivin 和 Op18 蛋白水平，同时增加 p53 和 p21 水平。[1] 半定量 RT-PCR 显示，在 HCT116 和 HeLa 细胞中，GDP366 剂量和时间依赖性地降低 survivin 和 Op18 的 mRNA 水平，而不影响 HSP70 或 HSP90 mRNA 水平。[1] 在 HCT116 p53-/- 和 p21-/- 细胞中证实，GDP366 对 survivin 和 Op18 表达的抑制效应不依赖于 p53 和 p21 的状态。[1] 克隆形成实验表明，GDP366 抑制 HCT116 细胞克隆存活，IC50 约为 1.0 µM。[1] 磺酰罗丹明B蛋白质量测定显示，处理72小时后，GDP366 剂量依赖性地抑制 HCT116 p53+/+ 细胞 (IC50 = 2.57 µM)、HCT116 p53-/- 细胞 (IC50 = 4.05 µM)、HCT116 p21+/+ 细胞 (IC50 = 0.95 µM) 和 HCT116 p21-/- 细胞 (IC50 = 1.02 µM) 的生长。[1] 通过相差显微镜、荧光显微镜 (DAPI染色) 和电子显微镜观察，GDP366 (2 µM) 在 KBM5 和 HCT116 细胞中诱导多核化、中心体扩增和微核形成，表明发生了有丝分裂灾难。[1] 流式细胞术分析显示，用 GDP366 (1-2 µM) 处理 HCT116 细胞 24-72 小时，可剂量和时间依赖性地增加多倍体 (>4N DNA 含量) 细胞比例 (高达40-50%)，并在更长时间处理 (72-96 小时) 后最终增加亚G1期细胞比例。这种多倍体诱导也不依赖于 p53 和 p21 的状态。[1] GDP366 (2 µM) 处理不同时间可诱导 HCT116 细胞染色体不稳定性，表现为具有染色体畸变 (间隙和断裂) 的细胞比例增加。[1] Western blot 分析显示，GDP366 处理以剂量和时间依赖性的方式诱导 HCT116 细胞中组蛋白 H2AX (γH2AX)、Chk1 (Ser345) 和 Chk2 (Thr68) 的磷酸化。[1] GDP366 (2 µM) 处理 48-72 小时后，通过衰老相关的 β-半乳糖苷酶 (SA-β-gal) 活性增加，诱导 HCT116 细胞出现衰老样表型。[1] 端粒重复序列扩增法 (TRAP) 实验表明，GDP366 (2 µM) 处理 72 小时显著抑制 HCT116 细胞中的端粒酶活性。[1] GDP366 (2 µM) 处理 48 小时降低了 HCT116 细胞中可溶性 (解聚) 与聚合微管蛋白的比例，效果类似于微管稳定剂紫杉醇，表明其抑制了微管蛋白聚合。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 HCT116 异种移植裸鼠模型中，从肿瘤细胞接种后第5天开始，每天腹腔注射 50 mg/kg 的 GDP366，连续16天，与溶剂对照组相比，显著抑制了肿瘤生长。研究结束时 (第21天)，治疗组的肿瘤重量也显著降低。[1]
该剂量下治疗耐受性良好。与对照组小鼠相比，在体重、运动活动、进食行为或死亡率方面未观察到显著差异。[1] |
| 细胞实验 |
Western blot 分析蛋白水平：用指定浓度和时间的 GDP366 处理 HCT116 或其他细胞。使用补充了蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 缓冲液制备全细胞裂解物。等量蛋白通过SDS-PAGE分离，转膜，用针对 survivin、Op18、p53、p21、γH2AX、磷酸化Chk1、磷酸化Chk2 等的特异性一抗孵育，然后使用 HRP 偶联的二抗进行检测。[1]
半定量 RT-PCR：使用 Trizol 试剂从 GDP366 处理的细胞中提取总 RNA。使用随机引物和逆转录试剂盒从 1 µg 总 RNA 合成 cDNA。使用 survivin、Op18、HSP70 和 GAPDH (作为内参) 的基因特异性引物进行 PCR 扩增。产物在琼脂糖凝胶上分离并用溴化乙锭显色。[1] 克隆形成实验：将细胞接种于六孔板中，用 GDP366 处理 48 小时，然后胰蛋白酶消化并重铺于新鲜无药培养基中生长 10-14 天。菌落用乙醇固定，结晶紫染色，在光学显微镜下计数含有 ≥50 个细胞的克隆。[1] 磺酰罗丹明B (SRB) 蛋白质量测定：在 96 孔板中用 GDP366 处理细胞 72 小时，用冷的三氯乙酸固定，洗涤，并用 0.4% SRB 溶液染色。未结合的染料用 1% 乙酸洗去，结合的染料用 Tris 碱 (pH 10.5) 溶解。在 560 nm 波长下测量吸光度以评估细胞质量。[1] 流式细胞术细胞周期分析：收集经 GDP366 处理的细胞，用冷乙醇固定，洗涤，并用碘化丙啶 (PI) 溶液染色。使用流式细胞仪和相应软件分析 DNA 含量。[1] 免疫荧光染色：将生长在盖玻片上的细胞用 GDP366 处理，多聚甲醛固定，Triton X-100/NP-40 透化，血清封闭，并与一抗 (如抗 lamin A/B、抗 α-微管蛋白、抗 γ-微管蛋白) 孵育。洗涤后，与荧光标记的二抗孵育，用 DAPI 复染细胞核，封片，并通过荧光或共聚焦显微镜观察。[1] 衰老相关的 β-半乳糖苷酶 (SA-β-gal) 染色：用 GDP366 处理的细胞固定后，根据制造商说明书，在 37°C 下与 SA-β-gal 染色液孵育过夜。在显微镜下计数蓝染的衰老细胞。[1] TRAP 端粒酶检测实验：从 GDP366 处理的细胞中提取端粒酶。进行端粒酶延伸反应，然后用特异性引物进行 PCR 扩增。产物在非变性聚丙烯酰胺凝胶上分离并通过银染显色。[1] 可溶性与聚合微管蛋白的测定：用 GDP366 或对照药物 (紫杉醇、长春新碱) 处理的细胞用微管稳定缓冲液裂解。裂解液离心分离上清 (可溶性微管蛋白) 和沉淀 (聚合微管蛋白)。沉淀用 SDS 缓冲液进一步溶解。两组分均使用抗微管蛋白抗体进行 Western blot 分析。[1] |
| 动物实验 |
Tumor Xenograft Model: Male nu/nu BALB/c mice (4-6 weeks old) were subcutaneously inoculated on the flank with 5 x 10^6 HCT116 cells. [1]
Treatment: Five days after inoculation, when tumors reached approximately 50 mm³, mice were randomized into control and treatment groups. GDP366 was dissolved in tissue-culture-grade DMSO and then diluted in tissue-culture medium (final DMSO concentration < 0.1% v/v). The treatment group received GDP366 at a dose of 50 mg/kg daily via intraperitoneal (i.p.) injection for 16 consecutive days. The control group received an equivalent volume of vehicle (DMSO in medium). [1] Monitoring: Tumor dimensions were measured every other day with calipers, and tumor volume was calculated using the formula: (smallest diameter)² x (perpendicular diameter) x 0.4. Body weight, feeding behavior, and motor activity were monitored. Mice were euthanized on day 21 post-inoculation, tumors were excised and weighed. [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In the HCT116 xenograft study, daily i.p. administration of GDP366 at 50 mg/kg for 16 days was well-tolerated. No significant toxicity was observed based on stable body weights, normal feeding behavior and motor activity, and the absence of mortality. [1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GDP366 is a novel small molecule identified from a library screen as a dual inhibitor of survivin and Op18. [1]
Its mechanism involves the selective downregulation of survivin and Op18 at both mRNA and protein levels, leading to inhibition of tubulin polymerization, induction of polyploidy, chromosomal instability, mitotic catastrophe, and cellular senescence. [1] The study proposes GDP366 as a promising lead compound warranting further translational evaluation for cancer therapy. [1] |
| 分子式 |
C20H17N5OS
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|---|---|
| 分子量 |
375.44688
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| 精确质量 |
375.115
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| 元素分析 |
C, 63.98; H, 4.56; N, 18.65; O, 4.26; S, 8.54
|
| CAS号 |
501698-03-9
|
| 相关CAS号 |
501698-03-9
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| PubChem CID |
6539985
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| LogP |
3.8
|
| tPSA |
121
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
513
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
DZSUJUOJJJCWGG-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H17N5OS/c1-12-3-2-4-15(9-12)25-20(26)24-14-7-5-13(6-8-14)16-10-27-19-17(16)18(21)22-11-23-19/h2-11H,1H3,(H2,21,22,23)(H2,24,25,26)
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| 化学名 |
1-[4-(4-aminothieno[2,3-d]pyrimidin-5-yl)phenyl]-3-(3-methylphenyl)urea
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| 别名 |
GDP 366; GDP366; GDP-366
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~62.5 mg/mL (~166.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6635 mL | 13.3174 mL | 26.6347 mL | |
| 5 mM | 0.5327 mL | 2.6635 mL | 5.3269 mL | |
| 10 mM | 0.2663 mL | 1.3317 mL | 2.6635 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
sepantronium溴化物
LQZ 7I
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粤公网安备 44011102003439号
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