| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The targets of Genkwanin are associated with the miR-101/MKP-1/MAPK signaling pathway, including microRNA-101 (miR-101), mitogen-activated protein kinase phosphatase 1 (MKP-1), and mitogen-activated protein kinases (MAPKs, such as ERK, JNK, and p38). [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
细胞活力分析表明，剂量高达 50 μM 时，芫花素对细胞活力没有影响。 LPS 诱导的 NO 生成受到 genkwanin 的抑制，且呈浓度依赖性。 iNOS 的表达仅限于胎儿刺激。 iNOS 活性不受芫花素的显着影响。研究了芫花素对促炎细胞因子产生的影响。在 LPS 刺激的 RAW264.7 巨噬细胞中，genkwanin 以浓度依赖性方式减少 TNF-a、IL-1b 和 IL-6 的产生。虽然 genkwanin 对 NF-kB 信号传导的完整性没有影响，但它会强烈抑制缓冲液中的 AP-1 信号传导。这表明genkwanin对ERK1/2磷酸化具有倍数作用，但以浓度依赖性方式抑制p38和JNK磷酸化。在首次作为立即早期基因被发现后，MKP-1 被发现是一种双磷酸磷酸酶，可显着影响 p38 MAPK 活性、JNK 和 ERK1/2 活性。 genkwanin 可以显着增加 MKP-1 的表达，但不能显着增加 MKP-1 mRNA 的表达[1]。
1. 在脂多糖（LPS）激活的RAW264.7巨噬细胞中，Genkwanin呈剂量依赖性抑制促炎细胞因子的产生。浓度为10 μM、20 μM、40 μM时，与仅LPS处理组相比，其分别使肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA水平降低约30%、55%、75%；白细胞介素-6（IL-6）mRNA水平降低约25%、50%、70%；白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA水平降低约20%、45%、65% [1] 2. Genkwanin还可抑制LPS激活的RAW264.7细胞中一氧化氮（NO）的生成。20 μM和40 μM Genkwanin处理分别使NO水平降低约40%和65%，这与诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA及蛋白表达降低相关 [1] 3. 关于miR-101/MKP-1/MAPK通路：20 μM、40 μM Genkwanin分别使LPS诱导的miR-101表达下调约40%和60%；使MKP-1的mRNA及蛋白水平上调（40 μM时分别上调约50%和80%）；同时抑制ERK、JNK、p38 MAPK的磷酸化。Western blot结果显示，与仅LPS处理相比，40 μM Genkwanin使p-ERK、p-JNK、p-p38水平分别降低约60%、55%、50% [1] 4. MTT实验表明，Genkwanin浓度高达40 μM时，对RAW264.7细胞无显著细胞毒性，细胞活力保持在90%以上 [1] |
| 细胞实验 |
1. RAW264.7巨噬细胞培养与处理：将RAW264.7细胞置于含10%胎牛血清和1%抗生素的完全培养基中，在37°C、5% CO2培养箱中培养。当细胞融合度达70%-80%时，接种于6孔板（用于mRNA/蛋白检测）或96孔板（用于MTT/NO检测）。贴壁24小时后，用Genkwanin（10 μM、20 μM、40 μM）或二甲基亚砜（DMSO，对照）预处理细胞1小时，随后加入LPS（1 μg/mL）继续刺激24小时（用于细胞因子/NO检测）或15分钟（用于MAPK磷酸化检测） [1]
2. MTT细胞活力实验：处理结束后，向96孔板每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），37°C孵育4小时。弃去上清液，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，用酶标仪测定570 nm处吸光度，以对照组为基准计算细胞活力百分比 [1] 3. NO检测实验：收集处理后细胞的上清液，加入等体积的格里斯试剂（Griess reagent），室温孵育10分钟，测定540 nm处吸光度。利用亚硝酸钠标准曲线计算NO浓度 [1] 4. 细胞因子/miR-101/MKP-1 mRNA定量实时PCR（qPCR）检测：用RNA提取试剂盒提取细胞总RNA。检测mRNA时，通过逆转录合成cDNA，使用TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、MKP-1的特异性引物进行qPCR，以GAPDH为内参；检测miR-101时，使用特异性逆转录引物，以U6小核RNA（U6 snRNA）为内参。采用2^(-ΔΔCt)法计算相对表达量 [1] 5. MKP-1及磷酸化MAPK Western blot检测：提取细胞总蛋白，用蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。将等量蛋白通过SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭1小时。膜与抗MKP-1、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38、p-p38及GAPDH（内参）的一抗在4°C孵育过夜，再与二抗室温孵育1小时。用增强化学发光试剂盒显影条带，通过图像分析软件定量条带灰度值 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
金克瓦宁是一种单甲氧基黄酮，是芹菜素7位羟基甲基化的产物。它是一种代谢产物。它是一种二羟基黄酮和单甲氧基黄酮。其功能与芹菜素相关。它是金克瓦宁(1-)的共轭酸。
据报道，金克瓦宁存在于Vernonia fasciculata、Aquilegia oxysepala和其他有相关数据的生物体中。 1.金克瓦宁主要通过调节miR-101/MKP-1/MAPK通路发挥其抗炎作用。LPS通常会上调miR-101，从而抑制MKP-1的表达；MKP-1的减少会导致ERK、JNK和p38 MAPK的磷酸化增加，最终促进促炎介质的产生。 金克万宁通过下调miR-101、上调MKP-1和抑制MAPK磷酸化来逆转这一过程[1] 2. 金克万宁是一种黄酮类化合物，其在LPS激活的巨噬细胞中的抗炎活性表明其在炎症性疾病研究中具有潜在的应用价值[1] |
| 分子式 |
C16H12O5
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|---|---|
| 分子量 |
284.2635
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| 精确质量 |
284.068
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| CAS号 |
437-64-9
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| PubChem CID |
5281617
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
546.5±50.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
290-292°C
|
| 闪点 |
209.7±23.6 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.669
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| LogP |
2.36
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| tPSA |
79.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
424
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
JPMYFOBNRRGFNO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H12O5/c1-20-11-6-12(18)16-13(19)8-14(21-15(16)7-11)9-2-4-10(17)5-3-9/h2-8,17-18H,1H3
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| 化学名 |
5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-7-methoxychromen-4-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~31.25 mg/mL (~109.93 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 0.5 mg/mL (1.76 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5179 mL | 17.5895 mL | 35.1791 mL | |
| 5 mM | 0.7036 mL | 3.5179 mL | 7.0358 mL | |
| 10 mM | 0.3518 mL | 1.7590 mL | 3.5179 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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