Glecaprevir   中文名称: 格来普韦

HCV NS3/4A protease(IC50: 3.5~11.3 nM)
Hepatitis C virus (HCV) NS3/4A protease (IC₅₀ = 3.5 to 11.3 nM; EC₅₀ = 0.21 to 4.6 nM for HCV replicons of genotypes 1-6; median EC₅₀ = 0.30 nM for replicons from 40 patient samples of genotypes 1-5) [1]
Hepatitis C virus (HCV) NS3/4A protease (formerly ABT-493) [2]

体外活性：Glecaprevir（以前称为 ABT-493）是一种新型丙型肝炎病毒（HCV）NS3/4A 蛋白酶抑制剂（PI），具有全基因型活性。它在体外抑制 HCV 基因型 1 至 6 的纯化 NS3/4A 蛋白酶的酶活性（半最大 [50%] 抑制浓度 = 3.5 至 11.3 nM）以及含有基因型 1 至 6 蛋白酶的稳定 HCV 亚基因组复制子的复制（50% 有效浓度 [EC50] = 0.21 至 4.6 nM）。对于含有来自感染 HCV 基因型 1 至 5 的患者的 40 个样本的蛋白酶的 HCV 复制子，Glecaprevir 的中位 EC50 为 0.30 nM（范围为 0.05 至 3.8 nM）。重要的是，glecaprevir 对基因型 3 的蛋白酶具有活性，基因型 3 是最困难的蛋白酶。 - 治疗 HCV 基因型，在酶促和复制子测定中均显示出与其他 HCV 基因型相当的活性。在耐药菌落选择研究中，glecaprevir通常选择含有基因型1a、1b、2a、2b、3a和4a的蛋白酶的复制子中NS3氨基酸位置A156的替换以及含有基因型3a的蛋白酶的复制子中D/Q168位置的替换、5a和6a。尽管基因型 1 NS3 中的 A156T 和 A156V 取代降低了对 glecaprevir 的敏感性，但具有这些取代的复制子在体外表现出较低的复制效率。已批准的 HCV PI，包括 155 和 168 位的 PI。 glecaprevir 与具有其他作用机制的 HCV 抑制剂的组合可产生相加或协同的抗病毒活性。总之，glecaprevir 是一种下一代 HCV PI，具有强大的全基因型活性和对耐药性发展的高度屏障。激酶测定：Glecaprevir 抑制 HCV 基因型 1 至 6 NS3/4A 蛋白酶的酶活性，生化测定中的半最大 (50%) 抑制浓度 (IC50) 值范围为 3.5 至 11.3 nM。当 glecaprevir 针对六种人丝氨酸蛋白酶（糜蛋白酶、II 型糜蛋白酶、VII 型糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶和尿激酶）和一种人半胱氨酸蛋白酶（组织蛋白酶 B）进行测试时，在浓度高达 200,000 nM 时未观察到抑制作用。这些结果表明，与所测试的人类蛋白酶相比，glecaprevir 对 HCV NS3/4A 蛋白酶表现出高水平的选择性。细胞测定：含有基因型 1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a 或 6a 蛋白酶的 HCV 亚基因组复制子细胞在 glecaprevir 存在下传代，浓度为各复制子细胞 EC50 的 10 倍或 100 倍品系来选择具有对 glecaprevir 具有抗性的取代的菌落。 Glecaprevir 通常在不同 HCV 基因型的复制子细胞中选择少量含有赋予抗性的取代的集落。无论选择浓度如何，使用具有基因型 2a JFH-1 主链的复制子（即本研究中的基因型 2a 和 2b 复制子）进行选择时观察到较高的集落计数。这可能是由于具有该主干的复制子具有异常高的复制率。

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格卡瑞韦对基因型1-6的纯化HCV NS3/4A蛋白酶的酶活性具有抑制作用，IC₅₀值为3.5-11.3 nM。它还能抑制含基因型1-6蛋白酶的稳定HCV亚基因组复制子的复制，EC₅₀值为0.21-4.6 nM。对于40份感染HCV基因型1-5的患者样本来源的复制子，中位EC₅₀为0.30 nM（范围：0.05-3.8 nM），对难治性基因型3的活性与其他基因型相当。在耐药菌落筛选研究中，它在基因型1a、1b、2a、2b、3a和4a的复制子中筛选出NS3位点A156的突变体，在基因型3a、5a和6a的复制子中筛选出D/Q168位点的突变体。基因型1中的A156T和A156V突变会降低对药物的敏感性，但会损害复制子的复制效率。它对携带常见NS3突变（如155和168位点）且对其他HCV蛋白酶抑制剂产生耐药性的HCV仍具有活性。与其他HCV抑制剂联合使用时，表现出相加或协同抗病毒活性 [1]

在一项开放标签剂量递增试验中，未接受过治疗的HCV基因型1感染成人（有或无代偿性肝硬化）接受了3天的格卡瑞韦单药治疗（剂量：100 mg、200 mg、300 mg、400 mg、700 mg）。所有剂量组的HCV RNA水平较基线的平均最大降幅约为4 log₁₀ IU/ml。有和无代偿性肝硬化患者的病毒载量下降情况相似。50%的基线样本存在NS3/4A蛋白酶抑制剂耐药相关变异体（RAVs），但这些患者的病毒载量下降仍保持一致 [2]

Glecaprevir 抑制 HCV 基因型 1 至 6 NS3/4A 蛋白酶的酶活性，生化测定中的半最大 (50%) 抑制浓度 (IC50) 值范围为 3.5 至 11.3 nM。当 glecaprevir 针对六种人丝氨酸蛋白酶（糜蛋白酶、II 型糜蛋白酶、VII 型糜蛋白酶、弹性蛋白酶、激肽释放酶和尿激酶）和一种人半胱氨酸蛋白酶（组织蛋白酶 B）进行测试时，在浓度高达 200,000 nM 时未观察到抑制作用。这些结果表明，与所测试的人类蛋白酶相比，glecaprevir 对 HCV NS3/4A 蛋白酶表现出高水平的选择性。

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制备基因型1-6的纯化HCV NS3/4A蛋白酶，检测格卡瑞韦对该酶的抑制活性。通过评估药物阻断蛋白酶活性的能力来确定半数抑制浓度（IC₅₀），不同基因型的检测结果范围为3.5-11.3 nM [1]

含有基因型 1a、1b、2a、2b、3a、4a、5a 或 6a 蛋白酶的 HCV 亚基因组复制子细胞在 glecaprevir 存在下传代，浓度为其 EC50 的 10 倍或 100 倍，以选择相应的复制子细胞系用于具有对 glecaprevir 具有抗性的取代的菌落。 Glecaprevir 通常在不同 HCV 基因型的复制子细胞中选择少量含有赋予抗性的取代的集落。无论选择浓度如何，使用具有基因型 2a JFH-1 主链的复制子（即本研究中的基因型 2a 和 2b 复制子）进行选择时观察到较高的集落计数。这可能是由于具有该主干的复制子具有异常高的复制率。

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建立含基因型1-6蛋白酶的稳定HCV亚基因组复制子细胞系。用不同浓度的格卡瑞韦处理这些细胞，测定抑制病毒复制的半数有效浓度（EC₅₀），数值范围为0.21-4.6 nM。此外，使用40份患者样本（基因型1-5）来源的复制子细胞评估药物活性，得出中位EC₅₀为0.30 nM。通过用格卡瑞韦（10倍EC₅₀）联合G418（400 μg/ml）处理基因型1a和1b复制子细胞约3周，进行耐药菌落筛选；存活的菌落经固定、结晶紫染色后计数 [1]

吸收、分布和排泄
在健康受试者中，达到血浆峰浓度的时间（Tmax）约为5小时。非肝硬化HCV感染者的平均血浆峰浓度（Cmax）为597ng/mL。与空腹状态相比，进食可使格卡瑞韦的吸收增加83-163%。
该药物的主要排泄途径是胆汁-粪便途径，其中92.1%的给药药物经粪便排泄，0.7%的药物经尿液排泄。

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代谢/代谢物
格卡瑞韦在体外主要通过CYP3A进行有限的二级代谢。

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生物半衰期
消除半衰期（t1/2）约为6小时。

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概要
格卡瑞韦尚未在接受丙型肝炎治疗的哺乳期妇女中进行研究。由于其与母体血浆蛋白的结合率高达97.5%，因此母乳中的含量可能非常低。
丙型肝炎不会通过母乳传播，并且母乳已被证明可以灭活丙型肝炎病毒 (HCV)。然而，美国疾病控制与预防中心建议，如果乳头皲裂或出血，感染丙型肝炎病毒的母亲应考虑停止母乳喂养。目前尚不清楚此警告是否适用于正在接受丙型肝炎治疗的母亲。
感染丙型肝炎病毒的母亲所生的婴儿应接受丙型肝炎病毒检测；由于母体抗体在婴儿出生后的前18个月以及婴儿产生免疫反应之前一直存在，因此建议进行核酸检测。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
哌仑他韦与人血浆蛋白的结合率为97.5%。血血浆比约为0.57。

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在为期3天的单药治疗临床试验中，接受剂量范围为100 mg至700 mg的格卡瑞韦治疗的患者未观察到严重或3级（重度）不良事件。未报告具有临床意义的实验室异常[2]。

[1]. Antimicrob Agents Chemother.2017;62(1). pii: e01620-17.

[2]. Antimicrob Agents Chemother.2015;60(3):1546-55.

[3]. Signal Transduct Target Ther. 2021 May 29;6(1):212.

格卡瑞韦是一种直接作用的抗病毒药物，也是丙型肝炎病毒 (HCV) NS3/4A 蛋白酶抑制剂，其靶向病毒 RNA 复制。与 [DB13878] 联合使用时，格卡瑞韦可有效治疗其他 NS3/4A 蛋白酶抑制剂治疗失败的患者。它对病毒耐药突变具有很高的遗传屏障。在细胞培养中，HCV 基因型 1a、2a 或 3a 复制子中 NS3 耐药相关位点 A156 或 D/Q168 的氨基酸替换导致对格卡瑞韦的敏感性降低。NS3 位点 Y65H 和 D/Q168 的氨基酸替换组合也会导致格卡瑞韦敏感性进一步降低，基因型 3a 患者的 NS3 Q80R 突变也会导致格卡瑞韦耐药。格卡瑞韦（Glecaprevir）与[DB13878]以商品名Mavyret作为口服复方制剂上市。该固定剂量复方制剂于2017年8月获得FDA批准，用于治疗无肝硬化（肝病）或轻度肝硬化的慢性丙型肝炎病毒（HCV）1-6型感染成人患者，包括中重度肾病患者和正在接受透析治疗的患者。Mavyret也适用于既往接受过含NS5A抑制剂或NS3/4A蛋白酶抑制剂（但未同时接受过两种抑制剂）方案治疗的HCV 1型感染患者。丙型肝炎病毒感染常导致肝功能下降，进而发展为肝衰竭，严重影响患者的生活质量。该复方制剂的最终目标是实现持续病毒学应答（SVR），治愈患者的丙型肝炎病毒感染。在临床试验中，该联合疗法在基因型 1a、2a、3a、4、5 和 6 中均实现了 ≥93% 的 SVR12 率，即治疗结束后 12 周或更长时间内检测不到丙型肝炎病毒。
格卡瑞韦是一种丙型肝炎病毒 NS3/4A 蛋白酶抑制剂。 glecaprevir 的作用机制是作为 HCV NS3/4A 蛋白酶抑制剂、P-糖蛋白抑制剂、乳腺癌耐药蛋白抑制剂、有机阴离子转运多肽 1B1 抑制剂、有机阴离子转运多肽 1B3 抑制剂、细胞色素 P450 3A 抑制剂、细胞色素 P450 1A2 抑制剂和 UGT1A1 抑制剂。

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药物适应症
适用于治疗患有慢性丙型肝炎病毒 (HCV) 基因型 1、2、3、4、5 或 6 的成年患者，这些患者无肝硬化或有代偿性肝硬化（Child-Pugh A 级）。 MAVYRET 也适用于治疗既往接受过含 HCV NS5A 抑制剂或 NS3/4A 蛋白酶抑制剂 (PI) 的治疗方案（但未同时接受过这两种抑制剂）的 HCV 基因 1 型感染成人患者。
FDA 标签
Maviret 适用于治疗 3 岁及以上成人和儿童的慢性丙型肝炎病毒 (HCV) 感染。Maviret 包衣颗粒适用于治疗 3 岁及以上儿童的慢性丙型肝炎病毒 (HCV) 感染。

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作用机制
格卡瑞韦是 HCV NS3/4A 蛋白酶的抑制剂，该蛋白酶是一种病毒酶，负责将 HCV 编码的多聚蛋白水解为成熟的 NS3、NS4A、NS4B、NS5A 和 NS5B 蛋白。这些多功能蛋白（包括 NS3）对病毒复制至关重要。 NS3蛋白的N端赋予其丝氨酸蛋白酶活性，而其C端编码一种DExH/D-box RNA解旋酶，该酶水解NTP作为能量来源，在病毒基因组RNA复制过程中沿3′至5′方向解开双链RNA。NS4A是NS3的辅助因子，它指导NS3的定位并调节其酶活性。格卡瑞韦通过抑制NS3/4A蛋白酶活性，阻断HCV多肽下游连接点的切割以及成熟结构蛋白的蛋白水解加工，从而干扰病毒生命周期的细胞内过程。

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格卡瑞韦（曾用名ABT-493）是一种具有泛基因型抗病毒活性的新一代HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂[1][2]
由于其对常见耐药相关变异株的活性以及对耐药HCV复制子复制效率的抑制，格卡瑞韦具有很高的耐药屏障[1]
该药物已在II期临床试验中与其他直接抗病毒药物联合用于治疗伴或不伴代偿性肝硬化的慢性HCV感染患者[2]

C38H46F4N6O9S

838.87

838.298

C, 54.41; H, 5.53; F, 9.06; N, 10.02; O, 17.16; S, 3.82

1365970-03-1

1365970-03-1 (free);1838572-01-2 (hydrate);

66828839

White to off-white solid powder

1.5±0.1 g/cm3

1.610

1.71

204

3

15

7

58

1760

7

S(C1(C)CC1)(NC([C@]1(C[C@H]1C(F)F)NC([C@@H]1C[C@@H]2CN1C([C@H](C(C)(C)C)NC(=O)O[C@@H]1CCC[C@H]1OCC=CC(C1C(=NC3C=CC=CC=3N=1)O2)(F)F)=O)=O)=O)(=O)=O |c:41|

MLSQGNCUYAMAHD-ITNVBOSISA-N

InChI=1S/C38H46F4N6O9S/c1-35(2,3)28-32(50)48-19-20(17-24(48)30(49)46-37(18-21(37)29(39)40)33(51)47-58(53,54)36(4)14-15-36)56-31-27(43-22-9-5-6-10-23(22)44-31)38(41,42)13-8-16-55-25-11-7-12-26(25)57-34(52)45-28/h5-6,8-10,13,20-21,24-26,28-29H,7,11-12,14-19H2,1-4H3,(H,45,52)(H,46,49)(H,47,51)/b13-8+/t20-,21+,24+,25-,26-,28-,37-/m1/s1

(3aR,7S,10S,12R,21E,24aR)-7-tert-butyl-N-{(1R,2R)-2(difluoromethyl)-1-[(1-methylcyclopropane-1-sulfonyl)carbamoyl]cyclopropyl}-20,20-difluoro5,8-dioxo-2,3,3a,5,6,7,8,11,12,20,23,24a-dodecahydro-1H,10H-9,12methanocyclopenta[18,19][1,10,17,3,6]trioxadiazacyclononadecino[11,12-b]quinoxaline-10carboxamide

ABT-493; ABT493; ABT 493; A-1282576; A 1282576; A1282576; A-1282576.0; Glecaprevir; MAVYRET.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : 83.3 ~100 mg/mL ( 99.30 ~119.2 mM )
Ethanol : ~100 mg/mL

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: ≥ 2.08 mg/mL (2.48 mM)

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。