Glycyrrhetic Acid 3-O-β-D-Glucuronide

别名: 单葡萄糖醛酸甘草次酸;(2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(3S,4aR,6aR,6bS,8aS,11S,12aR,14aR,14bS)-11-羧基-4,4,6a,6b,8a,11,14b-七甲基-14-氧代-2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14a-十二氢-1H-苉-3-基]氧基]-3,4,5-三羟基四氢吡喃-2-羧酸;L-半胱氨酸盐酸盐水合物;甘草次酸单葡萄糖醛酸苷;甘草次酸 3-O-单-beta-D-葡糖苷酸
目录号: V34379 纯度: ≥98%
甘草次酸 3-O-β-D-葡萄糖醛酸是三萜类的天然产物。
Glycyrrhetic Acid 3-O-β-D-Glucuronide CAS号: 34096-83-8
产品类别: Natural Products
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述

描述:甘草酸 3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷是三萜类化合物的天然产物。它从甘草中分离得到,是具有抗过敏活性的甘草酸(GL)的重要衍生物。甘草次酸-3-O-β-D-葡糖醛酸苷 (GAMG) 的研究表明,β-葡糖醛酸酶 (β-GUS) 是 GAMG 生成的关键酶,具有将甘草酸 (GL) 直接转化为 GAMG 的巨大潜力。甘草次酸-3-O-β-D-葡糖醛酸苷是一种有价值的甜味剂。


18β-甘草次酸-3-O-β-D-葡糖醛酸苷 (GAMG) 是人肠道细菌 LJ-22 链球菌 (Streptococcus LJ-22) 将甘草酸 (GL) 转化而来的产物。它具有抗过敏活性,并且比 GL 更甜。GAMG 可抑制 RBL-2H3 细胞释放 β-己糖胺酶和被动皮肤过敏反应,表明其具有作为新型甜味食品添加剂和抗过敏剂的潜力 [1]。
甘草酸 3-O-β-D-葡糖醛酸苷 (GAMG) 是甘草酸的重要衍生物,具有高甜度(是蔗糖的 941 倍)和增强的生物活性。它比甘草酸 (GL) 具有更高的生物利用度和更强的生理活性,可用作食品和饮料中的高效低热量甜味剂,也是一种有前景的抗癌和抗炎药物 [2]。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
甘草次酸3-O-β-D-葡糖醛酸苷可抑制RBL-2H3细胞释放β-己糖胺酶,IC50值为0.28 mM[2]。甘草次酸3-O-β-D-葡糖醛酸苷(GAMG)以剂量依赖的方式显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞中的亚硝酸盐浓度,其IC50值为120 μM[2]。
GAMG抑制IgE诱导的RBL-2H3细胞释放β-己糖胺酶,其IC50值为0.28 mM。GL和GA的IC50值分别为0.37 mM和0.23 mM。参考药物色甘酸钠 (DSCG) 的 IC50 值为 0.50 mM [1]。
GAMG 可抑制 LPS 诱导的 RAW264.7 细胞中一氧化氮 (NO) 的产生,其 IC50 值为 0.12 mM。GL、GA 和地塞米松的 IC50 值分别为 0.09 mM、0.05 mM 和 0.01 mM [1]。
GAMG 在 DPPH 自由基和超氧自由基生成系统中未显示任何抗氧化活性 [1]。
18α-GAMG 对人肝癌 SMMC-7721 和胃癌 MGC-803 细胞的抗增殖活性高于阳性对照药物阿霉素。它可影响细胞周期阻滞并下调 p65 和 hTERT 蛋白的表达。 18α-GAMG对人正常胃黏膜细胞GES-01和正常肝细胞L-02均无毒性作用(IC50均为3.0 mM)[2]。
18α-GAMG的EGFR抑制活性强于GLs和厄洛替尼,分子对接结果表明其与EGFR的结合亲和力更高(18α-GAMG与ASP831、GLU738、THR766、LYS721形成六个氢键,并与LYS692形成电荷相互作用;18β-GAMG形成三个氢键和三个电荷相互作用)[2]。
体内研究 (In Vivo)
腹腔注射(ip)5 mg/kg 的 GAMG 可抑制小鼠被动皮肤过敏反应(PCA),抑制率为 42.7±1.2%。口服(po)5 mg/kg 的 GAMG 可抑制 28.5±3.1%。GA(ip 5 mg/kg)的抑制率为 61.0±1.5%,DSCG(po 50 mg/kg)的抑制率为 38±0.2%,而阿泽司汀(5 mg/kg)的抑制率分别为 70.0±5.6%(ip)和 71.5±4.3%(po)[1]。在恶唑酮诱导的接触性超敏反应模型中,1% 的 GAMG 可抑制小鼠耳廓增厚。GL 也未显示出抑制作用。 GA 表现出较弱的抑制活性,而地塞米松则表现出较强的抑制活性[1]。
GAMGs(18α-GAMG 和 18β-GAMG)对 S180 和 HepG2 异种移植小鼠的肿瘤生长抑制作用更强,且与 GLs 相比,EAC 荷瘤小鼠的生存期更长[2]。
18α-GAMG通过下调 p65 和 hTERT 蛋白的表达并抑制肿瘤细胞的过度增殖,改善了 DEN 诱导的大鼠肝肿瘤的病理变化[2]。
18α-GAMG通过阻断 NF-κB 和 MAPKs 信号通路的激活,改善了 CCl4 相关的肝纤维化的病理变化[2]。
细胞实验
RBL-2H3细胞脱颗粒实验:将RBL-2H3细胞培养于含10%胎牛血清和L-谷氨酰胺的DMEM培养基中。将细胞以每孔5×10⁵个的密度接种于24孔板中,培养基中含有0.5 μg/mL小鼠单克隆IgE,并在37℃、5% CO₂条件下孵育过夜以进行致敏。用Siraganian缓冲液(pH 7.2:119 mM NaCl、5 mM KCl、0.4 mM MgCl₂、25 mM PIPES、40 mM NaOH)洗涤细胞,然后在160 μL Siraganian缓冲液(含5.6 mM葡萄糖、1 mM CaCl₂、0.1% BSA)中于37℃孵育10分钟。将细胞暴露于 40 μL 测试化合物中 20 分钟,随后加入 20 μL 抗原(DNP-HSA,1 μg/mL)于 37°C 处理 10 分钟以诱导脱颗粒。反应在冰上终止 10 分钟。离心后,取 25 μL 上清液转移至 96 孔板,并加入 20 μL 底物(1 mM 对硝基苯基-N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷)于 37°C 孵育 1 小时。加入 0.2 mL NaOH 终止反应,并在 405 nm 处测量吸光度 [1]。
RAW264.7 细胞 NO 生成测定:用 LPS (1 μg/mL) 和测试化合物刺激 RAW264.7 细胞 24 小时。细胞短暂离心后,取150 μL细胞培养上清液与150 μL Griess试剂混合,避光室温孵育5-10分钟。使用酶标仪在540 nm处测定吸光度,并以硝酸钠标准曲线为参照[1]。
抗增殖活性测定(综述):使用人肿瘤细胞系(HepG2、HeLa、A549)评估抗增殖活性。测定EGFR抑制活性。进行分子对接以分析GAMGs与EGFR活性位点之间的结合相互作用(PDB ID 1M17)[2]。
动物实验
被动皮肤过敏反应 (PCA):雄性 ICR 小鼠(25-30 g)背部两个已剃毛的皮肤部位分别皮内注射 10 μg 抗 DNP IgE,注射部位用不溶于水的红色记号笔标记。48 小时后,每只小鼠经尾静脉注射 200 μL 含 200 μg DNP-HSA 的 3% 伊文思蓝 PBS 溶液。在 DNP-HSA 激发前 1 小时,分别以指定剂量(例如,GAMG、GL、GA 为 5 mg/kg;DSCG 为 50 mg/kg;阿泽拉斯汀为 5 mg/kg)经口服 (po) 或腹腔注射 (ip) 给药。抗原注射30分钟后,处死小鼠并取其背部皮肤。用1 mL 1.0 N KOH和4 mL丙酮/0.6 N磷酸(13:5)提取染料,并在620 nm处测定吸光度[1]。
接触性超敏反应(恶唑酮诱导的皮炎):将100 μL 1.5%恶唑酮乙醇溶液涂抹于雌性ICR小鼠(25-28 g)腹部进行致敏。致敏7天后,每3天在小鼠双耳两侧涂抹20 μL 1%恶唑酮丙酮/橄榄油(4:1)溶液。在每次涂抹恶唑酮前30分钟和后3小时,分别在小鼠双耳两侧涂抹20 μL浓度为1%的GAMG、GL或GA。在每次使用恶唑酮后 72 小时,使用数显测微器测量耳廓厚度 [1]。
肿瘤异种移植模型(综述):在小鼠中使用肉瘤细胞 S180、肝癌细胞 HepG2 和 Ehrlich 腹水细胞 EAC。测定肿瘤生长抑制率和生存时间 [2]。
DEN 诱导的大鼠肝肿瘤模型(综述):在给予 18α-GAMG 后检查显微特征 [2]。
药代性质 (ADME/PK)
当口服给予人体时,GL主要通过肠道细菌代谢为GA,少量通过GAMG代谢为GA。GAMG代谢为GA的速度比GL快[1]。
GL从胃吸收后,部分(约40%)在胃上皮细胞内转化为GAMG,然后在肝脏中完全代谢为GAMG,经胆管排泄,并被肠道细菌代谢为GA。GA及其代谢物从肠道转运至肝脏[2]。
GL和GAMG跨细胞膜转运:GAMG具有合适的分子极性,使其能够穿过疏水性和亲水性细胞膜,因此与GL相比,其生物利用度和生物活性更高[2]。
参考文献

[1]. Anti-allergic activity of 18beta-glycyrrhetinic acid-3-O-beta-D-glucuronide.Arch Pharm Res. 2004 Jan;27(1):57-60.

[2]. Glycyrrhetic Acid 3‐O‐Mono‐β‐d‐glucuronide (GAMG): An Innovative High‐Potency Sweetener with Improved Biological Activities. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety.

其他信息
甘草次酸3-O-葡萄糖醛酸苷是一种三萜皂苷,具体来说是甘草次酸的3-O-β-葡萄糖醛酸苷。它是甘草中甘草酸的代谢产物,可能是假性醛固酮增多症发病机制中的致病因子。它具有多种功能,包括抗过敏活性、甜味、EC 1.1.1.146(11β-羟类固醇脱氢酶)抑制剂、人体异生素代谢物和植物代谢物。它是一种单糖衍生物,属于β-D-葡萄糖醛酸、三萜皂苷、五环三萜、氧代二羧酸和烯酮类化合物。其功能与甘草次酸相关。
GAMG比GL更甜。 GAMG的甜度是蔗糖的940倍,而GL的甜度是蔗糖的170倍[2]。
GAMG可作为一种新型食品添加剂和抗过敏剂[1]。
GAMG比GL具有更高的溶解度和更好的口感(更少的余味)。它可以与有机酸盐或5%的盐溶液混合,以提高水溶性和甜度[2]。
在日本,含有GAMG的酶改性甘草提取物被用作巧克力、冰淇淋、可可、咖啡、汤和乳制品等食品的甜味剂。 GAMG 和 GL (3:7) 的混合物用于含盐食品,例如酱油 [2]。
GAMG 也可用作化妆品中的乳化剂或增溶剂 [2]。
GAMG 的抗过敏机制涉及抑制肥大细胞释放 β-己糖胺酶和抑制 LPS 诱导的巨噬细胞中 NO 的产生,但并非通过抗氧化活性发挥作用 [1]。
18α-GAMG 通过阻断 NF-κB 和 MAPK 信号通路发挥抗炎活性 [2]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C36H54O10
分子量
646.8080
精确质量
646.372
CAS号
34096-83-8
PubChem CID
161800
外观&性状
White to off-white solid
密度
1.31g/cm3
沸点
785ºC at 760mmHg
闪点
240.7ºC
LogP
4.329
tPSA
170.82
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
10
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
46
分子复杂度/Complexity
1340
定义原子立体中心数目
14
SMILES
O([C@@]1([H])[C@@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])([C@@]([H])(C(=O)O[H])O1)O[H])O[H])O[H])[C@@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]2(C([H])([H])[H])[C@@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])[C@@]3(C([H])([H])[H])[C@]4(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]5(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C(=O)O[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[C@@]5([H])C4=C([H])C([C@@]32[H])=O)C1(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]
InChi Key
HLDYLAJAWSKPFZ-QDPIGISRSA-N
InChi Code
InChI=1S/C36H54O10/c1-31(2)21-8-11-36(7)27(34(21,5)10-9-22(31)45-29-25(40)23(38)24(39)26(46-29)28(41)42)20(37)16-18-19-17-33(4,30(43)44)13-12-32(19,3)14-15-35(18,36)6/h16,19,21-27,29,38-40H,8-15,17H2,1-7H3,(H,41,42)(H,43,44)/t19-,21-,22-,23-,24-,25+,26-,27+,29+,32+,33-,34-,35+,36+/m0/s1
化学名
(2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(3S,4aR,6aR,6bS,8aS,11S,12aR,14aR,14bS)-11-carboxy-4,4,6a,6b,8a,11,14b-heptamethyl-14-oxo-2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14a-dodecahydro-1H-picen-3-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~250 mg/mL (~386.51 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5460 mL 7.7302 mL 15.4605 mL
5 mM 0.3092 mL 1.5460 mL 3.0921 mL
10 mM 0.1546 mL 0.7730 mL 1.5460 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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