GPNA

别名: gamma-(p-硝基苯胺)-L-谷氨酸盐酸盐;L-谷氨酸γ-(P-硝基苯胺)盐酸;γ-(p-硝基苯胺)-L-谷氨酸盐酸盐
目录号: V21742 纯度: ≥98%
GPNA HCl 是众所周知的 γ-谷氨酰转移酶 (GGT) 底物。
GPNA CAS号: 67953-08-6
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
500mg
Other Sizes

Other Forms of GPNA:

  • L-γ-Glutamyl-p-nitroanilide
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
GPNA HCl 是 γ-谷氨酰转移酶 (GGT) 的已知底物。GPNA HCl 是谷氨酰胺 (Gln) 转运蛋白 ASCT2 的特异性抑制剂。GPNA HCl 还能抑制钠离子依赖性转运蛋白,例如 SNAT 家族 (SNAT1/2/4/5) 和钠离子非依赖性亮氨酸转运蛋白 LAT1/2。GPNA 可逆性地诱导 A549 细胞凋亡。
GPNA(CAS 67953-08-6),又名 L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺或 γ-谷氨酰-对硝基苯胺,是一种用于检测和测定 γ-谷氨酰转移酶 (GGT) 活性的显色底物。它是一种合成的二肽类似物,由一个谷氨酰残基与对硝基苯胺连接而成。该化合物经GGT酶切后释放出对硝基苯胺,可通过分光光度法进行定量分析。GPNA广泛应用于临床诊断和生化研究中,用于评估血清和其他生物样本中的GGT水平,作为肝功能和肝胆疾病的指标。
生物活性&实验参考方法
靶点
GPNA targets γ-glutamyltransferase (GGT), an enzyme that catalyzes the transfer of the γ-glutamyl group from peptides to other amino acids or water. As a substrate for GGT, GPNA is cleaved by the enzyme, releasing p-nitroaniline, which is detectable by colorimetric measurement. GGT is a membrane-bound enzyme involved in glutathione metabolism and is elevated in various hepatobiliary disorders, making GPNA a useful diagnostic tool.
体外研究 (In Vitro)
在A549细胞中,GPNA(10-1000 μM;48小时)可导致细胞活力呈剂量依赖性降低[1]。
在体外,GPNA可作为GGT活性测定的显色底物。当与含有GGT的样品(例如血清、组织匀浆或细胞裂解液)孵育时,GPNA发生酶促水解,释放出对硝基苯胺,其具有特征性的黄色,最大吸收波长为405 nm。对硝基苯胺的生成速率与GGT活性成正比。该测定在较宽的酶浓度范围内呈线性关系,可用于动力学或终点测定。
体内研究 (In Vivo)
GPNA通常不用作体内治疗药物;相反,它是一种用于检测生物样本中GGT活性的诊断试剂。血清中GGT水平的常规检测采用基于GPNA的检测方法,用于评估肝功能、检测肝胆疾病和监测酒精滥用。GGT活性升高与胆汁淤积、肝硬化、肝炎和其他肝脏疾病相关。
酶活实验
使用GPNA进行GGT活性测定:将样品(血清、血浆或组织匀浆)与GPNA底物在测定缓冲液(通常为Tris-HCl或甘氨酰甘氨酸缓冲液,pH 8.0-8.5)中于37°C下混合。通过测量405 nm处吸光度随时间的变化来监测反应进程。对于终点测定,通过加入乙酸终止反应,并读取吸光度值。GGT活性可使用对硝基苯胺的标准曲线或摩尔消光系数进行计算。
细胞实验
细胞活力测定 [1]
细胞类型: A549 细胞
测试浓度: 10、100、250、500 和 1000 μM
孵育时间: 48 小时
实验结果: 诱导的细胞活力呈剂量依赖性降低,IC50 值约为 250 μM。
对于基于细胞的 GGT 活性测定,将细胞裂解或在合适的培养基中培养,并与 GPNA 底物孵育。或者,也可以使用表达 GGT 的活细胞进行活性染色。孵育后,通过测量 405 nm 处的吸光度分析上清液或细胞裂解液中对硝基苯胺的生成量。GGT 活性以蛋白质浓度进行标准化。
动物实验
GPNA通常用于诊断应用,而非动物研究。为了验证GGT检测方法,需要使用基于GPNA的方法分析动物血清样本(例如,来自诱导肝损伤啮齿动物的血清样本)。通过比较健康模型和疾病模型中的GGT活性水平,可以验证该检测方法的诊断效用。
药代性质 (ADME/PK)
GPNA的化学式为C₁₁H₁₃N₃O₄,分子量约为251.24。它是GGT的显色底物,经酶切后释放出对硝基苯胺,可在405 nm处检测。该化合物在推荐的储存条件下稳定,并且与多种生物样品(包括血清、血浆和组织匀浆)兼容。
参考文献

[1]. γ-Glutamyltransferase enzyme activity of cancer cells modulates L-γ-glutamyl-p-nitroanilide (GPNA) cytotoxicity. Sci Rep. 2019 Jan 29;9(1):891.

其他信息
GPNA是一种显色底物,用于临床诊断和生化研究中测定γ-谷氨酰转移酶(GGT)活性。它广泛用于评估肝功能、检测肝胆疾病和监测酒精滥用。该测定原理基于酶促释放对硝基苯胺,可通过分光光度法进行定量。GGT升高与胆汁淤积、肝硬化、肝炎和其他肝脏疾病相关。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C11H14CLN3O5
分子量
303.69900
精确质量
303.062
CAS号
67953-08-6
相关CAS号
7300-59-6;67953-08-6 (HCl);
PubChem CID
9839424
外观&性状
Solid powder
沸点
590.6ºC at 760 mmHg
闪点
311ºC
LogP
2.823
tPSA
138.24
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
6
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
347
定义原子立体中心数目
1
SMILES
C1=CC(=CC=C1NC(=O)CC[C@@H](C(=O)O)N)[N+](=O)[O-].Cl
InChi Key
OJEVFSFTVARWQX-FVGYRXGTSA-N
InChi Code
InChI=1S/C11H13N3O5.ClH/c12-9(11(16)17)5-6-10(15)13-7-1-3-8(4-2-7)14(18)19;/h1-4,9H,5-6,12H2,(H,13,15)(H,16,17);1H/t9-;/m0./s1
化学名
(2S)-2-amino-5-(4-nitroanilino)-5-oxopentanoic acid;hydrochloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~411.59 mM)
H2O : ~2 mg/mL (~6.59 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


配方 4 中的溶解度: 1 mg/mL (3.29 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.2927 mL 16.4636 mL 32.9272 mL
5 mM 0.6585 mL 3.2927 mL 6.5854 mL
10 mM 0.3293 mL 1.6464 mL 3.2927 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们