| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 靶点 |
Gramine targets adiponectin receptor 1 (AdipoR1) with IC50 of 4.2±0.53 μM (validated) [1]; adiponectin receptor 2 (AdipoR2) with IC50 of 3.2±0.2 μM (validated) [1]; mouse β2-adrenergic receptor (β2-AR) (agonist activity confirmed, no numerical EC50 provided) [2]; human β2-adrenergic receptor (β2-AR) (agonist activity confirmed, no numerical EC50 provided) [2].
Gramine primarily targets the adiponectin receptor (AdipoR), acting as an active agonist. It exhibits IC50 values of 3.2 µM for AdipoR2 and 4.2 µM for AdipoR1. Additionally, Gramine is a human and mouse β2-Adrenergic receptor (β2-AR) agonist. Beyond these primary receptors, Gramine has been shown to target CDK2 in cervical cancer cells through a ncRNA-mediated suppression mechanism. Its diverse receptor targeting profile underlies its broad pharmacological activities, including anti-tumor, anti-viral, and anti-inflammatory properties. The compound's ability to modulate multiple receptors makes it a valuable tool for studying adiponectin signaling, adrenergic pathways, and their roles in cancer and metabolic diseases. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
格拉明是脂联素受体 (AdipoR) 的活性激动剂，对 AdipoR2 和 AdipoR1 的 IC50 值分别为 3.2 μM 和 4.2 μM [1]。格拉明是一种潜在的 β2-肾上腺素能受体激动剂 [2]。格拉明（20 μM 至 1.2 nM）对 AdipoR1/adipoR2 激活的肝癌细胞系 (MCF-7 细胞) 的生长呈剂量依赖性抑制，其 IC50 值分别为 9.6±0.9 μM 和 0.1±0.1 μM [1]。体外实验：格拉明是通过基于荧光偏振的竞争性结合实验，从天然产物库筛选中鉴定出的先导化合物，其对 AdipoR1 和 AdipoR2 的初筛 IC50 值分别为 4.5 μM 和 3.6 μM。经验证的IC50值分别为4.2±0.53 μM (AdipoR1)和3.2±0.2 μM (AdipoR2) [1]。
在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中，用IC50浓度的格拉明处理6小时后，通过Western blot检测发现AMPK磷酸化水平升高[1]。 在MCF-7人乳腺癌细胞中，用IC50浓度的格拉明处理6小时后，通过Western blot检测发现p-PPARα水平降低[1]。 用CellTiter-Blue法测定，格拉明处理72小时后，对MDA-MB-231细胞的增殖具有抑制作用，IC50值为9.6±0.9 μM [1]。 用CellTiter-Blue法测定，格拉明对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用，IC50值为9.6±0.9 μM。经 CellTiter-Blue 检测 [1] 测定，处理 72 小时后浓度为 0.1±0.1 μM。 在表达小鼠 β2-AR 的 HEK293 细胞中，格拉明 (100 μM) 在孵育 3 小时后可增加 CRE-荧光素酶活性；用选择性 β2-AR 拮抗剂 ICI-118551 (1 μM) 预孵育可阻断该作用。在表达β2-肾上腺素能受体（β2-AR）的HEK293细胞中，格拉明（Gramine）以浓度依赖的方式（测试浓度范围为0至100 μM）增加荧光素酶活性[2]。在表达人β2-AR的HEK293细胞中，格拉明（100 μM）孵育3小时后可增加CRE-荧光素酶活性，而ICI-118551预处理可消除这种增加[2]。体外研究表明，格拉明可显著抑制HeLa宫颈癌细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡，并触发G0/G1期细胞周期阻滞。此外，格拉明还可通过CUL3-MTDH轴诱导铁死亡，从而抑制三阴性乳腺癌。格拉明具有细胞毒性，在抗肿瘤、抗炎和抗病毒应用方面具有潜在的研究价值。利用载有格拉明纳米颗粒的研究表明，其对HCT-116细胞系具有显著的抗癌活性，与对照组相比，可显著提高氧化应激指标，例如NO、LPO和ROS水平。这些发现表明，格拉明有望成为一种用于癌症治疗的先导化合物，尤其适用于耐药性癌症。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验：将格拉明（Gramine）以20 mg/kg体重的剂量肌注至小鼠股四头肌（每条腿100 μL，用10% DMSO的无菌水稀释），6小时后，通过实时PCR检测发现股四头肌中Nr4a1 mRNA的表达显著升高（p<0.01）。在相同条件下，Nr4a3和PGC-1α4 mRNA的水平未见显著变化[2]。
使用4T1同源和MDA-MB-231异种移植小鼠模型进行的体内实验证实，格拉明在10和20 mg/kg剂量下均能显著抑制肿瘤生长，且未观察到明显的全身毒性或体重下降。在4T1和MDA-MB-231小鼠模型中，格拉明均能显著抑制肿瘤生长，且未引起全身毒性。这些发现表明，格拉明有望成为三阴性乳腺癌（TNBC）治疗的先导化合物，并为靶向治疗耐药性癌症中的铁死亡开辟了新的途径。格拉明在体内也表现出抗炎和抗病毒特性，但针对这些活性的具体体内研究尚不充分。该化合物在治疗剂量下良好的安全性支持其作为潜在治疗药物的持续研究。 |
| 酶活实验 |
本研究开发了一种荧光偏振 (FP) 结合分析法，用于鉴定脂联素受体配体。该分析法使用浓度为 100 nM 的荧光素标记探针 1 (FITC-DAsn-Ile-Pro-Nva-Leu-Tyr-DSer-Phe-Ala-DSer-NH2) 和浓度为 2 μM 的脂联素受体（AdipoR1 或 AdipoR2），反应体系为 19 μL。将测试化合物（包括格拉明）用 5% DMSO 配制成浓度为 10 μM 至 0.078 μM 的半稀释溶液，并转移至分析板中。混合物在 25°C 下孵育 30 分钟。在激发波长 485 nm 和发射波长 538 nm 处测量荧光偏振。通过FP值的降低评估竞争性结合，IC50值通过非线性最小二乘拟合确定[1]。
β2-肾上腺素能受体激动剂活性荧光素酶报告基因检测：将HEK293细胞以1.0×10^5个细胞/孔的密度接种于12孔板中，培养20小时后，采用磷酸钙法转染100 ng pCRE-luc报告质粒（含四个cAMP反应元件拷贝）、10 ng p3×FLAG-β2-AR（小鼠或人源表达质粒）或空载体，以及100 ng pCMV-β-Gal（β-半乳糖苷酶表达质粒）。转染4小时后，更换培养基为含5%葡聚糖-活性炭处理的胎牛血清的DMEM培养基。 24小时后，加入测试化合物（包括格拉明）或DMSO对照（DMSO最终浓度为0.1%）。孵育3小时（剂量反应实验为6小时）后，裂解细胞并测定荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性。荧光素酶活性值通过荧光素酶活性除以β-半乳糖苷酶活性计算得出[2]。格拉明的非细胞结合实验通常包括测定其与脂联素受体（AdipoR）和β2-肾上腺素能受体（β2-AR）的亲和力。这些实验通常采用放射性配体结合技术或表面等离子共振技术来确定IC50或Ki值。对于AdipoR，格拉明对AdipoR2的IC50值为3.2 µM，对AdipoR1的IC50值为4.2 µM。对于β2-肾上腺素能受体（β2-AR），格拉明作为激动剂发挥作用，其结合亲和力可通过表达该受体的细胞膜制备物进行评估。通常采用标记参考配体的竞争性结合试验来确定格拉明对这些受体的效力和选择性。这些试验通常在生理pH值和温度下的缓冲体系中进行，并优化孵育时间以达到结合平衡。 |
| 细胞实验 |
细胞培养：MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞在含 10% 胎牛血清和 1% 青霉素/链霉素的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO₂ 培养箱中培养 [1]。
蛋白质印迹：细胞培养至 80% 汇合度后收集，并在无血清培养基中用不同剂量的格拉明（IC₅₀ 浓度）处理 6 小时。用冰冷的 PBS 洗涤细胞，并在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 裂解缓冲液中裂解细胞。使用 Bio-Rad 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。取等量总蛋白（50 μg）进行 10% Tris-HCl 凝胶电泳，并将蛋白转移至硝酸纤维素膜上。将膜封闭后，与一抗（抗p-AMPKα、抗AMPKα、抗p-PPARα、抗β-actin）孵育，再与二抗孵育，最后使用ECL Plus Western blotting检测系统进行检测[1]。 细胞增殖实验：将细胞接种于384孔板（每孔45 μL），过夜培养使其贴壁，然后用不同浓度的格拉明（20 μM至1.2 nM）处理72小时。使用CellTiter-Blue试剂评估细胞活力；在激发波长530 nm和发射波长590 nm处测量荧光强度。细胞活力值已根据载体对照组进行标准化[1]。 β2-肾上腺素能受体（β2-AR）活性荧光素酶检测：HEK293细胞在含10%胎牛血清（FBS）、100单位/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。将细胞以1.0×10^5个/孔的密度接种于12孔板中，培养20小时后，采用磷酸钙法分别转染pCRE-luc、p3×FLAG-β2-AR或空载体以及pCMV-β-Gal质粒。4小时后，更换培养基为含5%葡聚糖-活性炭处理的FBS的DMEM培养基。24小时后，用格拉明（100 μM，或剂量反应实验中指定的浓度）或DMSO对照处理细胞3-6小时。在拮抗剂研究中，细胞在加入化合物前先用 ICI-118551 (1 μM) 预孵育 30 分钟。然后测定荧光素酶和 β-半乳糖苷酶活性 [2]。 体外细胞实验中，格拉明通常使用癌细胞系，例如 HeLa（宫颈癌）、HCT-116（结直肠癌）和 MDA-MB-231 或 4T1（乳腺癌）。将细胞培养在合适的培养基中，并用不同浓度的格拉明处理特定时间（例如 24-72 小时）。使用 MTT、CCK-8 或类似方法评估细胞活力。使用克隆形成、划痕愈合或 Transwell 实验评估细胞增殖和迁移。使用 Annexin V/PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡，并使用碘化丙啶染色进行细胞周期分析。通过检测NO、LPO和ROS水平等氧化应激标志物来评估其作用机制。通常将格拉明溶解于DMSO中，然后用培养基稀释，并设置DMSO对照组以排除溶剂效应的影响。 |
| 动物实验 |
动物肌注实验方案：7周龄雄性C57BL/6J小鼠用异氟烷麻醉。将格拉明（Gramine）以20 mg/kg体重的剂量直接注射到双侧股四头肌，格拉明溶于10% DMSO的无菌水中（每侧100 μL）。对照组小鼠注射10% DMSO的无菌水（每侧100 μL）。给药6小时后，在异氟烷麻醉下处死小鼠，并迅速切取股四头肌进行RNA提取[2]。格拉明的体内动物研究通常使用4T1同源肿瘤和MDA-MB-231异种移植小鼠模型来评估其抗肿瘤疗效。荷瘤小鼠接受格拉明治疗，剂量为10和20 mg/kg，通常采用口服或腹腔注射给药。在整个研究过程中定期监测肿瘤体积和体重。实验结束时，切除肿瘤并称重，收集组织进行组织学分析和生物标志物评估。通过监测体重减轻、器官重量以及主要器官的组织病理学检查来评估全身毒性。格拉明已被证明能显著抑制肿瘤生长，且不会引起明显的全身毒性。这些方案是评估候选化合物在临床前抗肿瘤活性的标准方法。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
公开资料中关于格拉明（Gramine）的药代动力学数据有限。格拉明是一种分子量约为174.24 g/mol的小分子生物碱，预计可经胃肠道吸收并分布至组织。其在各种溶剂中的溶解度是体外和体内研究中制剂配制的关键因素。格拉明主要通过肝酶代谢，但具体的代谢途径尚未完全阐明。该化合物的抗肿瘤、抗病毒和抗炎特性表明其可能具有良好的组织分布和生物利用度。然而，诸如半衰期、Cmax、AUC和生物利用度等详细的药代动力学参数尚未得到充分报道。动物研究中，格拉明通常采用口服或腹腔注射给药，表明其具有良好的口服生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
格拉明（Gramine）的毒理学数据表明，在治疗剂量下具有良好的安全性。使用4T1同源小鼠和MDA-MB-231异种移植小鼠模型进行的体内实验证实，格拉明在10和20 mg/kg剂量下显著抑制肿瘤生长，且未观察到明显的全身毒性或体重下降。在4T1和MDA-MB-231小鼠模型中，格拉明均显著抑制肿瘤生长，且未引起全身毒性。这些结果表明格拉明具有较宽的治疗窗。然而，包括急性毒性、慢性毒性、遗传毒性和生殖毒性评估在内的全面毒理学研究尚未得到充分证实。作为一种天然生物碱，格拉明的毒性特征可能因化合物的来源和纯度而异。研究级格拉明仅供实验室使用。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
格拉明是一种氨基烷基吲哚，其3位上带有二甲基氨基甲基取代基。它是一种植物代谢产物，具有血清素拮抗剂、抗病毒和抗菌活性。格拉明是一种氨基烷基吲哚、吲哚生物碱和叔胺化合物，是格拉明(1+)的共轭碱。据报道，格拉明存在于大麦（Hordeum vulgare）、哈特维吉松（Pinus hartwegii）和其他具有相关数据的生物体中。格拉明是一种天然吲哚生物碱，存在于芦苇（Arundo donax Linn.）[2]和银枫[1]等高等植物中。研究表明，格拉明衍生物对肠道病毒71具有抗病毒活性，并通过抑制Ca2+进入神经母细胞瘤细胞发挥神经保护作用[2]。在脂联素受体激动剂方面，格拉明(Gramine)对AdipoR1和AdipoR2系统均有活性，根据天然产物库[1]，它来源于银枫。在β2-肾上腺素能受体激动剂方面，格拉明可能通过其β2-肾上腺素能受体激动活性提高cAMP水平，此前有报道称，高浓度的格拉明类似物可提高大鼠主动脉中的cAMP水平[2]。格拉明被认为是治疗低脂联素相关疾病和维持骨骼肌功能的潜在候选药物[1][2]。格拉明（Donaxine）是一种从芦苇（Arundo donax L.）中分离得到的天然吲哚生物碱。格拉明是一种活性脂联素受体（AdipoR）激动剂，对AdipoR2和AdipoR1的IC50值分别为3.2 µM和4.2 µM，同时也是人源和鼠源β2-肾上腺素能受体（β2-AR）激动剂。格拉明具有抗肿瘤、抗病毒和抗炎特性。体外实验表明，它能显著抑制癌细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡，并导致癌细胞周期停滞于G0/G1期。体内实验表明，它能抑制小鼠模型的肿瘤生长，且无全身毒性。格拉明尚未获准用于临床，目前仅作为研究化合物。其广泛的受体靶向特性使其成为研究脂联素信号通路、肾上腺素能通路和癌症生物学的重要工具。
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| 分子式 |
C11H14N2
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|---|---|---|
| 分子量 |
174.24
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| 精确质量 |
174.115
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| CAS号 |
87-52-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
6890
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
293.9±15.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
132-134 °C(lit.)
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| 闪点 |
131.5±20.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.631
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| LogP |
1.9
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| tPSA |
19.03
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
1
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
13
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| 分子复杂度/Complexity |
168
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
OCDGBSUVYYVKQZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H14N2/c1-13(2)8-9-7-12-11-6-4-3-5-10(9)11/h3-7,12H,8H2,1-2H3
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| 化学名 |
3-(Dimethylaminomethyl)indole
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7392 mL | 28.6961 mL | 57.3921 mL | |
| 5 mM | 1.1478 mL | 5.7392 mL | 11.4784 mL | |
| 10 mM | 0.5739 mL | 2.8696 mL | 5.7392 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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