| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 2g |
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| 5g |
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| 10g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Gramine targets adiponectin receptor 1 (AdipoR1) with IC50 of 4.2±0.53 μM (validated) [1]; adiponectin receptor 2 (AdipoR2) with IC50 of 3.2±0.2 μM (validated) [1]; mouse β2-adrenergic receptor (β2-AR) (agonist activity confirmed, no numerical EC50 provided) [2]; human β2-adrenergic receptor (β2-AR) (agonist activity confirmed, no numerical EC50 provided) [2].
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| 体外研究 (In Vitro) |
格拉明是脂联素受体 (AdipoR) 的活性激动剂，对 AdipoR2 和 AdipoR1 的 IC50 值分别为 3.2 μM 和 4.2 μM [1]。格拉明是一种潜在的 β2-肾上腺素能受体激动剂 [2]。格拉明（20 μM 至 1.2 nM）对 AdipoR1/adipoR2 激活的肝癌细胞系 (MCF-7 细胞) 的生长呈剂量依赖性抑制，其 IC50 值分别为 9.6±0.9 μM 和 0.1±0.1 μM [1]。体外实验：格拉明是通过基于荧光偏振的竞争性结合实验，从天然产物库筛选中鉴定出的先导化合物，其对 AdipoR1 和 AdipoR2 的初筛 IC50 值分别为 4.5 μM 和 3.6 μM。经验证的IC50值分别为4.2±0.53 μM (AdipoR1)和3.2±0.2 μM (AdipoR2) [1]。
在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中，用IC50浓度的格拉明处理6小时后，通过Western blot检测发现AMPK磷酸化水平升高[1]。 在MCF-7人乳腺癌细胞中，用IC50浓度的格拉明处理6小时后，通过Western blot检测发现p-PPARα水平降低[1]。 用CellTiter-Blue法测定，格拉明处理72小时后，对MDA-MB-231细胞的增殖具有抑制作用，IC50值为9.6±0.9 μM [1]。 用CellTiter-Blue法测定，格拉明对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用，IC50值为9.6±0.9 μM。经 CellTiter-Blue 检测 [1] 测定，处理 72 小时后浓度为 0.1±0.1 μM。 在表达小鼠 β2-AR 的 HEK293 细胞中，格拉明 (100 μM) 在孵育 3 小时后可增加 CRE-荧光素酶活性；用选择性 β2-AR 拮抗剂 ICI-118551 (1 μM) 预孵育可阻断该作用。在表达β2-AR的HEK293细胞中，格拉明以浓度依赖的方式增加荧光素酶活性（测试浓度范围为0至100 μM）[2]。在表达人β2-AR的HEK293细胞中，格拉明（100 μM）在孵育3小时后增加CRE-荧光素酶活性，而ICI-118551预处理可消除这种增加[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内试验：将格拉明（Gramine）以20 mg/kg体重的剂量肌注至小鼠股四头肌（每条腿100 μL，用10% DMSO的无菌水稀释），6小时后，通过实时PCR检测发现股四头肌中Nr4a1 mRNA的表达显著增加（p<0.01）。在相同条件下，Nr4a3或PGC-1α4 mRNA水平未观察到显著变化[2]。
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| 酶活实验 |
本研究开发了一种荧光偏振 (FP) 结合分析法，用于鉴定脂联素受体配体。该分析法使用浓度为 100 nM 的荧光素标记探针 1 (FITC-DAsn-Ile-Pro-Nva-Leu-Tyr-DSer-Phe-Ala-DSer-NH2) 和浓度为 2 μM 的脂联素受体（AdipoR1 或 AdipoR2），反应体系为 19 μL。将测试化合物（包括格拉明）用 5% DMSO 配制成浓度为 10 μM 至 0.078 μM 的半稀释溶液，并转移至分析板中。混合物在 25°C 下孵育 30 分钟。在激发波长 485 nm 和发射波长 538 nm 处测量荧光偏振。通过FP值的降低评估竞争性结合，IC50值通过非线性最小二乘拟合确定[1]。
β2-肾上腺素能受体激动剂活性荧光素酶报告基因检测：将HEK293细胞以1.0×10^5个细胞/孔的密度接种于12孔板中，培养20小时后，采用磷酸钙法转染100 ng pCRE-luc报告质粒（含四个cAMP反应元件拷贝）、10 ng p3×FLAG-β2-AR（小鼠或人源表达质粒）或空载体，以及100 ng pCMV-β-Gal（β-半乳糖苷酶表达质粒）。转染4小时后，更换培养基为含5%葡聚糖-活性炭处理的胎牛血清的DMEM培养基。 24小时后，加入测试化合物（包括格拉明）或DMSO对照（DMSO最终浓度为0.1%）。孵育3小时（剂量反应实验为6小时）后，裂解细胞并测定荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性。荧光素酶活性值通过荧光素酶活性除以β-半乳糖苷酶活性计算得出[2]。 |
| 细胞实验 |
细胞培养：MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞在含 10% 胎牛血清和 1% 青霉素/链霉素的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO₂ 培养箱中培养 [1]。
蛋白质印迹：细胞培养至 80% 汇合度后收集，并在无血清培养基中用不同剂量的格拉明（IC₅₀ 浓度）处理 6 小时。用冰冷的 PBS 洗涤细胞，并在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 裂解缓冲液中裂解细胞。使用 Bio-Rad 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。取等量总蛋白（50 μg）进行 10% Tris-HCl 凝胶电泳，并将蛋白转移至硝酸纤维素膜上。将膜封闭后，与一抗（抗p-AMPKα、抗AMPKα、抗p-PPARα、抗β-actin）孵育，再与二抗孵育，最后使用ECL Plus Western blotting检测系统进行检测[1]。 细胞增殖实验：将细胞接种于384孔板（每孔45 μL），过夜培养使其贴壁，然后用不同浓度的格拉明（20 μM至1.2 nM）处理72小时。使用CellTiter-Blue试剂评估细胞活力；在激发波长530 nm和发射波长590 nm处测量荧光强度。细胞活力值已根据载体对照组进行标准化[1]。 β2-肾上腺素能受体（β2-AR）活性荧光素酶检测：HEK293细胞在含10%胎牛血清（FBS）、100单位/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。将细胞以1.0×10^5个/孔的密度接种于12孔板中，培养20小时后，采用磷酸钙法分别转染pCRE-luc、p3×FLAG-β2-AR或空载体以及pCMV-β-Gal质粒。4小时后，更换培养基为含5%葡聚糖-活性炭处理的FBS的DMEM培养基。24小时后，用格拉明（100 μM，或剂量反应实验中指定的浓度）或DMSO对照处理细胞3-6小时。在拮抗剂研究中，细胞在加入化合物前先用 ICI-118551 (1 μM) 预孵育 30 分钟。然后测定荧光素酶和 β-半乳糖苷酶活性 [2]。 |
| 动物实验 |
肌内注射动物实验方案：7周龄雄性C57BL/6J小鼠用异氟烷麻醉。将格拉明（Gramine）以20 mg/kg体重的剂量直接注射到双侧股四头肌，格拉明溶于10% DMSO的无菌水中（每侧100 μL）。对照组小鼠注射10% DMSO的无菌水（每侧100 μL）。给药6小时后，在异氟烷麻醉下处死小鼠，并迅速切取股四头肌用于RNA提取[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
格拉明是一种氨基烷基吲哚，其3位上带有二甲基氨基甲基取代基。它是一种植物代谢产物，具有血清素拮抗剂、抗病毒和抗菌活性。格拉明是一种氨基烷基吲哚、吲哚生物碱和叔胺化合物，是格拉明(1+)的共轭碱。据报道，格拉明存在于大麦（Hordeum vulgare）、哈特维吉松（Pinus hartwegii）和其他具有相关数据的生物体中。格拉明是一种天然吲哚生物碱，存在于芦苇（Arundo donax Linn.）[2]和银枫[1]等高等植物中。研究表明，格拉明衍生物对肠道病毒71具有抗病毒活性，并通过抑制Ca2+进入神经母细胞瘤细胞发挥神经保护作用[2]。在脂联素受体激动剂方面，格拉明(Gramine)对AdipoR1和AdipoR2系统均有活性，根据天然产物库[1]，它来源于银枫。在β2-肾上腺素能受体激动剂方面，格拉明可能通过其β2-肾上腺素能受体激动活性提高cAMP水平，此前有报道称，高浓度的格拉明类似物可提高大鼠主动脉中的cAMP水平[2]。格拉明被认为是治疗低脂联素相关疾病和维持骨骼肌功能的潜在候选药物[1][2]。
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| 分子式 |
C11H14N2
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|---|---|---|
| 分子量 |
174.24
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| 精确质量 |
174.115
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| CAS号 |
87-52-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
6890
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
293.9±15.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
132-134 °C(lit.)
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| 闪点 |
131.5±20.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.631
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| LogP |
1.9
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| tPSA |
19.03
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
1
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
13
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| 分子复杂度/Complexity |
168
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
OCDGBSUVYYVKQZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H14N2/c1-13(2)8-9-7-12-11-6-4-3-5-10(9)11/h3-7,12H,8H2,1-2H3
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| 化学名 |
3-(Dimethylaminomethyl)indole
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7392 mL | 28.6961 mL | 57.3921 mL | |
| 5 mM | 1.1478 mL | 5.7392 mL | 11.4784 mL | |
| 10 mM | 0.5739 mL | 2.8696 mL | 5.7392 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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