| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AMPK
AMP-activated protein kinase (AMPK): GSK621 is a specific AMPK agonist with IC50 values of 13-30 μM against AML cell lines [1] - Autophagy: GSK621 induces autophagy through activation of AMPK in AML cells [1] - Apoptosis: GSK621 induces apoptosis in AML cells and glioma cells via caspase-dependent pathway [1][3] - eIF2α/ATF4 signaling pathway: GSK621 induces eIF2α phosphorylation (a marker of UPR activation) [1] - Tetraspanin 8 (Tspan8): In glioma cells, GSK621 downregulates Tspan8, a potential oncogene that promotes cancer progression [3] - Mammalian target of rapamycin (mTOR): GSK621 inhibits mTOR activation through AMPK in both AML and glioma cells [1][3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 AML 细胞系和原发性 AML 样本中，GSK621 显着增加 AMPKα T172 磷酸化，这是 AMPK 激活的标志。 GSK621 抑制研究中所有 20 种细胞系的增殖，IC50 值范围为 13 至 30 μM，并增加 17 种细胞系 (85%) 的凋亡。此外，GSK621 还能激活自噬，这也在 AML 细胞死亡中发挥作用。 [1]
AML细胞增殖抑制：GSK621（0-30μM，处理4天）可降低20种不同AML细胞系的增殖，IC50值在13-30μM范围内。它在17种（85%）细胞系中增加了凋亡[1] - 自噬诱导：GSK621（30μM，处理24小时）在AML细胞和原代AML样本中诱导大量细胞质空泡（包括自噬体）的形成[1] - 内质网应激反应：GSK621处理在AML细胞中诱导PERK磷酸化（内质网应激的标志）[1] - AMPK激活：GSK621（30μM）诱导AML细胞中AMPKα T172、ACC（S79）和ULK1（S555）的磷酸化[1] - 胶质瘤细胞抑制：GSK621以浓度和时间依赖性方式抑制胶质瘤细胞（U87MG和U251MG）的存活和增殖，IC50值在10-100μM范围内。它显著减少了存活集落数量并增加了台盼蓝阳性细胞[3] - 胶质瘤细胞凋亡诱导：GSK621剂量依赖性地增加U87MG细胞中caspase-3活性、组蛋白DNA凋亡ELISA OD值和Annexin V百分比。caspase抑制剂（z-DEVD-cho或zVAD-cho）可减弱GSK621诱导的凋亡和细胞毒性，证实其通过caspase依赖性机制[3] - 选择性：与癌细胞相比，GSK621对正常造血祖细胞、人黑素细胞、HCN-1a神经元细胞和原代人星形胶质细胞显示最小的细胞毒性[1][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GSK621（30 mg/kg，腹腔注射）通过增加 AMPK 活性和诱导细胞凋亡，减少白血病生长，并显着提高 MOLM-14 异种移植裸鼠的存活率。 [1]
AML异种移植模型：GSK621（30mg/kg，腹腔注射，每日两次）可减少MOLM-14细胞异种移植到裸鼠中的白血病生长，并显著延长生存期，与溶媒处理的动物或接受10mg/kg每日两次处理的动物相比[1] - 胶质瘤异种移植模型：GSK621（可用数据中未完全描述）在胶质瘤模型中显示抗肿瘤活性，但具体细节有限[3] - TMZ增敏作用：GSK621（10μM）显著增强替莫唑胺（TMZ，100μM）对胶质瘤细胞的敏感性和致死性，表明在体内可能存在协同效应[3] |
| 酶活实验 |
将 HEPG2 细胞暴露于剂量不断增加的 A-769662 或 GSK621，并使用商业 ELISA 试剂盒作为 AMPK 激活的替代品来测量 ACC S79 的磷酸化。
使用ELISA的AMPK活性检测：用递增剂量的GSK621或对照化合物（A-769662）处理HEPG2细胞。使用商业ELISA试剂盒检测ACC（S79）磷酸化作为AMPK激活的替代标志物。结果以相对于溶媒处理细胞的百分比表示[1][3] - 激酶磷酸化的Western印迹分析：用GSK621（30μM）处理细胞（AML或胶质瘤）6小时。制备蛋白质提取物并进行SDS-PAGE，转移至膜上，并用针对磷酸化AMPKα T172、ACC（S79）、ULK1（S555）、PERK、eIF2α和其他相关标志物的抗体进行检测。β-肌动蛋白用作上样对照[1][3] |
| 细胞实验 |
将 20 个 AML 细胞系用 GSK621 进行 log10 稀释，并使用 CellTiter-Glo? 测定来评估相对活力。使用 Prism 软件，计算 GSK621 对这 20 种细胞系中每一种的 IC50，并显示为 log[C]，其中 [C] 以 mol/l (M) 表示。每个面板的结果中代表了五种不同的细胞系。
细胞增殖检测：将AML细胞系（MV4-11、OCI-AML3、OCI-AML2、HL-60、Kasumi、HEL、UT7、NB4、TF-1、KG1A、Nomop28、SKM-1、U937、YHP1、MOLM-14、Mo7e、K562、MOLM-13、EOL-1、SET-2）或胶质瘤细胞（U87MG、U251MG）接种于96孔板中。加入浓度范围为0-30μM（AML）或0-100μM（胶质瘤）的GSK621。在AML细胞中培养4天后，或在胶质瘤细胞中培养24-72小时后，使用MTT法测量细胞活力。从剂量-反应曲线计算IC50值[1][3] - 自噬检测：用GSK621（30μM）处理AML细胞或原代AML样本24小时。然后通过显微镜检查细胞质空泡（自噬体）的形成[1] - 凋亡检测：用不同浓度的GSK621处理胶质瘤细胞24-48小时。通过caspase-3活性检测、组蛋白DNA凋亡ELISA或Annexin V结合检测测量凋亡。为了研究机制，在添加GSK621前1小时用caspase抑制剂（z-DEVD-cho或zVAD-cho）预处理细胞[3] - 集落形成检测：用GSK621（10-100μM）处理胶质瘤细胞24小时，然后洗涤并以低密度重新接种于新鲜培养基中。7-10天后，固定、染色并计数集落[3] - AMPK敲低研究：将靶向AMPKα的慢病毒shRNA或空载体对照转染到细胞中。用嘌呤霉素筛选稳定细胞系。加入GSK621（30μM）处理24-48小时，通过MTT检测、Annexin V结合和Western印迹分析细胞活力、凋亡和信号通路[3] - 显性负性AMPK研究：将编码显性负性AMPKα（T172A）的质粒或空载体转染到细胞中。筛选稳定细胞系。加入GSK621（30μM）处理24-48小时，分析细胞活力和信号通路[3] |
| 动物实验 |
裸鼠携带 MOLM-14 异种移植瘤
30 mg/kg，每日两次 腹腔注射 AML 异种移植瘤模型：将 MOLM-14 细胞（AML 细胞系）皮下或静脉注射到裸鼠体内。当肿瘤达到可测量大小时，将小鼠随机分组。将GSK621溶解于合适的溶剂（可能是基于 DMSO 的制剂）中，并以 30 mg/kg 的剂量腹腔注射，每日两次。溶剂对照组注射相同体积的溶剂。通过游标卡尺测量或生物发光成像（如果细胞表达荧光素酶）监测肿瘤生长。每日记录生存情况[1] - 胶质瘤异种移植瘤模型：将 U87MG 或 U251MG 细胞颅内或皮下植入裸鼠或 SCID 小鼠体内。当肿瘤形成时，即可开始使用GSK621进行治疗（现有数据中未完全描述）。可联合使用替莫唑胺（TMZ）进行治疗，以评估其协同作用[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GSK621 是一种新型噻吩并吡啶酮衍生物，可特异性激活 AMPK [1][2]
- GSK621 对 AML 细胞而非正常造血祖细胞的选择性细胞毒性，源于一种独特的合成致死相互作用，涉及 AMPK 和 mTORC1 的同时激活。 AML细胞的致死性可通过化学或基因手段消除mTORC1信号通路而消除[1] - 在AML细胞中，GSK621的细胞毒性涉及eIF2α/ATF4信号通路，该通路特异性地由mTORC1激活引起[1] - 在胶质瘤细胞中，GSK621激活AMPK以抑制mTOR并下调四跨膜蛋白8 (Tspan8)，Tspan8是一种潜在的癌基因，可促进癌症进展和替莫唑胺耐药性[3] - GSK621可能为mTORC1过度激活的癌症（包括AML和胶质瘤）提供治疗机会[1][3] |
| 分子式 |
C26H20N3O5CL
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|---|---|
| 分子量 |
489.907
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| 精确质量 |
489.109
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| 元素分析 |
2934.99.9001
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| CAS号 |
1346607-05-3
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| 相关CAS号 |
1346607-05-3
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| PubChem CID |
54577153
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.674
|
| LogP |
4.04
|
| tPSA |
93
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
778
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
COC1C=CC=C(N2C(=O)NC3=C(N(C(=C3)Cl)C3=CC=C(C4=CC=CC(OC)=C4O)C=C3)C2=O)C=1
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| InChi Key |
KURYSXLJGKKDHT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H20ClN3O5/c1-34-18-6-3-5-17(13-18)30-25(32)23-20(28-26(30)33)14-22(27)29(23)16-11-9-15(10-12-16)19-7-4-8-21(35-2)24(19)31/h3-14,31H,1-2H3,(H,28,33)
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| 化学名 |
6-chloro-5-[4-(2-hydroxy-3-methoxyphenyl)phenyl]-3-(3-methoxyphenyl)-1H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidine-2,4-dione
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| 别名 |
GSK-621; GSK621; GSK 621
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~97 mg/mL (~198.0 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 1.25 mg/mL (2.55 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O: 5mg/mL 配方 5 中的溶解度: 10 mg/mL (20.41 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0412 mL | 10.2060 mL | 20.4119 mL | |
| 5 mM | 0.4082 mL | 2.0412 mL | 4.0824 mL | |
| 10 mM | 0.2041 mL | 1.0206 mL | 2.0412 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
