| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Eg5 (kinesin spindle protein).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在Eg5运动结构域中，S-三苯甲基-L-半胱氨酸与由多层结构元件（螺旋a2/环L5/螺旋a3）组成的特定口袋结合[1]。通过促信号介导的机制，S-三苯甲基-L-半胱氨酸（1–20 μM）可引起细胞收缩和细胞周期阻滞，持续72小时。丝裂原激活的磷脂和核因子的激活可抑制S-三苯甲基-L-半胱氨酸的作用和细胞周期阻滞。 S-三苯甲基-L-半胱氨酸（IC50 = 700 nM）可诱导HeLa细胞产生有丝分裂信号，其特征是形成单个星形纺锤体[2]。
S-三苯甲基-L-半胱氨酸（STLC）处理（0、1、5、10、20 μmol/L，处理72小时）可剂量依赖性地诱导SH-SY5Y、SK-N-SH和SK-N-BE2神经母细胞瘤细胞凋亡，其中5 μmol/L处理组的凋亡率较对照组显著升高[1]。 流式细胞术分析表明，S-三苯甲基-L-半胱氨酸（STLC）以剂量依赖的方式诱导细胞周期停滞于G2/M期；在 5 μmol/L 浓度下，G1 期向 G2/M 期的转变十分显著 [1]。 蛋白质印迹分析显示，S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 处理（48 和 72 小时）以剂量依赖的方式降低了 SY5Y 细胞中 Eg5 蛋白的表达 [1]。 荧光原位杂交检测显示，S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC)（1 或 5 μmol/L，处理 48 小时）不影响 BE2 细胞中 MYCN 基因的扩增 [1]。 mRNA 微阵列分析（5 μmol/L STLC，处理 72 小时）表明，与对照组相比，S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 激活了 SY5Y 细胞中的 MAPK 和 NF-κB 信号通路 [1]。 |
| 细胞实验 |
细胞系（SH-SY5Y、SK-N-SH、SK-N-BE2）在含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO2 湿润环境下培养 [1]。
对于细胞凋亡检测，将细胞接种于 12 孔板中，并用 0、1、5、10 或 20 μmol/L 的 S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 处理 72 小时。收集细胞，用PBS洗涤，使用凋亡检测试剂盒，在37°C下用Annexin V和7-AAD染色1小时，然后进行流式细胞术分析[1]。 对于细胞周期分析，将3×10⁴个细胞接种于12孔板中，用1、5、10或20 μmol/L的S-三苯甲基-L-半胱氨酸（STLC）处理72小时，收集细胞，固定，在37°C下用10%碘化丙啶染色2小时，然后进行流式细胞术分析，以确定G1期、S期和G2/M期细胞的百分比[1]。 对于免疫荧光，将接种于玻璃盖玻片上的细胞用3%多聚甲醛固定，在4°C下用0.15% Triton X-100透化12小时，然后与一抗孵育。 （抗Eg5，1:200）室温孵育1小时，随后用Alexa Fluor 488二抗孵育45分钟，最后用DAPI（1 μg/ml）室温染色20分钟[1]。 对于蛋白质印迹分析，细胞用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解。蛋白质浓度采用BCA法测定。每个样品取 30 μg 蛋白，经 15% SDS-PAGE 电泳分离后，转移至硝酸纤维素膜，用 5% BSA 封闭，4°C 下与抗 Eg5 (1:400) 和抗 β-actin (1:5,000) 抗体孵育过夜，然后室温下与 HRP 标记的二抗孵育 1 小时，最后使用 LAS-4000 Mini 系统进行扫描 [1]。 对于 FISH，将 BE2 细胞用 1 或 5 μmol/L S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 处理 48 小时，收集细胞并洗涤。使用 Vysis LSI N-MYC SO 探针。将探针混合物（1 μl 探针、2 μl 双蒸水、37 μl 杂交缓冲液）离心，取 10 μl 滴加到载玻片上，盖上盖玻片，72°C 加热 2 分钟，然后在 37°C 湿润培养箱中过夜孵育。载玻片先用 0.4X SSC 溶液在 75°C 洗涤 30 分钟，再用 2X SSC/0.1% NP40 溶液在 37°C 洗涤 1 分钟，风干，用 DAPI II 染色 1 小时，最后在 1000 倍放大倍率下用落射荧光显微镜观察 [1]。 对于 mRNA 微阵列，将 SY5Y 细胞用 0 或 5 μmol/L S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 处理 72 小时，使用 TRIzol 试剂提取总 RNA，并用 RNeasy Mini 试剂盒纯化。使用 GeneChip 单循环靶标标记试剂盒处理 RNA，将其转化为双链 cDNA，生成生物素标记的 cRNA 靶标，并与 GeneChip PrimeView/U133 plus 2.0 人类基因表达芯片进行杂交。芯片在 Fluidics Station 450 中于 45°C 下用 Cy5-dCTP 染色 16 小时，然后在 Affymetrix Scanner 3000 上进行扫描。使用 Gene Spring Software 11.0 [1] 和 MAS 5.0/RMA 算法对数据进行标准化。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(2R)-2-氨基-3-[(三苯甲基)硫代]丙酸是一种苯系芳香化合物。三苯甲基半胱氨酸是半胱氨酸的衍生物，具有抗有丝分裂活性和潜在的抗肿瘤活性。(NCI04)
S-三苯甲基-L-半胱氨酸 (STLC) 是一种选择性 Eg5 变构抑制剂，它能阻断双极纺锤体的形成，导致有丝分裂停滞和细胞凋亡。与莫那司醇或萜烯醇 E 相比，它在诱导有丝分裂停滞方面具有更高的效力[1]。 Eg5 在神经母细胞瘤组织标本和细胞系中过表达，在 BE2 细胞（MYCN 扩增）中的表达高于 SY5Y 和 SK 细胞。然而，STLC的抗肿瘤活性并不依赖于MYCN扩增[1]。 STLC处理（5 μmol/L）在转录水平上显著激活NF-κB和MAPK信号通路，这可能导致细胞凋亡和细胞周期阻滞[1]。 本研究首次证实了S-三苯甲基-L-半胱氨酸（STLC）可诱导神经母细胞瘤细胞系发生细胞凋亡和细胞周期阻滞[1]。 |
| 分子式 |
C22H21NO2S
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|---|---|
| 分子量 |
363.4726
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| 精确质量 |
363.129
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| CAS号 |
2799-07-7
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| PubChem CID |
76044
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
524.7±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
182-183 °C (dec.)(lit.)
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| 闪点 |
271.2±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.642
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| LogP |
5.56
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| tPSA |
88.62
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
392
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1=CC=C(C=C1)C(C2=CC=CC=C2)(C3=CC=CC=C3)SC[C@@H](C(=O)O)N
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| InChi Key |
DLMYFMLKORXJPO-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H21NO2S/c23-20(21(24)25)16-26-22(17-10-4-1-5-11-17,18-12-6-2-7-13-18)19-14-8-3-9-15-19/h1-15,20H,16,23H2,(H,24,25)/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
(2R)-2-amino-3-tritylsulfanylpropanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~68.78 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7513 mL | 13.7563 mL | 27.5126 mL | |
| 5 mM | 0.5503 mL | 2.7513 mL | 5.5025 mL | |
| 10 mM | 0.2751 mL | 1.3756 mL | 2.7513 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
MSI-78A
Cyclo(D-Leu-D-Pro)
Glp-Pro-Val-pNA
Osteocalcin, bovine
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