| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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HA15（CAS#: 1609402-14-3）是一种噻唑苯磺酰胺类化合物，被开发为一种先导抗癌药物。它特异性靶向内质网分子伴侣BiP/GRP78/HSPA5，抑制其ATPase活性并引发持续性内质网应激。这会导致未折叠蛋白反应（UPR）、自噬和细胞凋亡功能障碍。HA15对黑色素瘤、肾上腺皮质癌和恶性胸膜间皮瘤（MPM）细胞（包括对标准疗法耐药的细胞）均显示出强大的抗肿瘤活性，且对正常细胞毒性低。[1][2][3]
| 靶点 |
BiP/GRP78/HSPA5
BiP (GRP78/HSPA5) – binds to and inhibits BiP ATPase activity; no IC50/Ki/EC50 values provided in these references. [1][2][3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
HA15（10 μM；1-24 小时）可诱导早期内质网应激（ER 应激）[1]。
HA15（0-10 μM；24 小时）在 A375 细胞中的 IC50 为 1-2.5 μM，与对照组（DMSO）相比，其以剂量依赖的方式降低黑色素瘤细胞的活力[1]。 HA15（1-10 μM；24 小时）可诱导 A375 细胞凋亡[1]。 HA15（1-24 μM；24 小时）可诱导自噬[1]。 HA15（10 μM；48 小时）对 BRAF 抑制剂耐药的黑色素瘤细胞具有高效的内质网应激诱导和细胞死亡作用。此外，HA15 通过内质网应激触发的细胞凋亡和自噬途径抑制肿瘤生长[1]。 低剂量或高剂量的 HA15 均未对人成纤维细胞或正常人黑素细胞的活力产生负面影响[1]。 HA15（10 μM，48 小时）降低了人黑色素瘤细胞系（A375、SKMel28、Mel501 等）的活力，IC50 值介于 1–2.5 μM 之间；浓度高达 100 μM 时，对正常人黑素细胞或成纤维细胞无细胞毒性。 [1] HA15 (10 μM) 可诱导黑色素瘤细胞 (A375) 快速发生内质网应激：1 小时内 PERK 和 eIF2α 磷酸化，ATF4 和 CHOP 表达增加，XBP1 剪接，以及内质网囊泡扩张（电镜观察）。HA15 与 ER Tracker（重叠率 82%）和 BiP（重叠率 64%）共定位。在无细胞实验中，HA15 以剂量依赖性方式（0–100 μM）抑制 BiP ATPase 活性。[1] HA15 可诱导 A375 细胞凋亡（Annexin V、cleaved caspase-3/9、PARP 表达增加）和自噬（LC3B-II 转化、Beclin1 表达增加、自噬小泡形成）。CHOP 敲低可阻断细胞凋亡和自噬，并挽救细胞活力。 [1] HA15（10 μM，48 小时）降低了 BRAF 抑制剂耐药的黑色素瘤细胞（A375-R、SKMel28-R、WM9-R）和患者来源的耐药细胞的活力，并增加了 CHOP 的表达。[1] HA15（10 μM，48 小时）杀死了多种其他癌细胞系：MIA PaCa-2（胰腺癌，对吉西他滨耐药）、ImarR（髓系白血病，对伊马替尼耐药）、MDA-MB-453（乳腺癌）、HT29（结肠癌）、HCT116 等。在所有细胞中均诱导了 CHOP 和 PARP 的裂解；LC3B 的转化程度各不相同。 [1] HA15（在H295R肾上腺皮质癌细胞中增殖IC50为3.8 μM）以剂量依赖的方式降低细胞活力和增殖。与米托坦具有协同作用（联合指数<1）。诱导DDIT3 mRNA、XBP1剪接、CHOP蛋白和ATF6核转位。通过下调类固醇生成酶（HSD3B2、CYP11A1、CYP21A2、CYP17A1）降低福斯克林刺激的皮质醇和DHEA-S生成。 [2] HA15（在 MPM 细胞系中 IC50 范围为 5.71–20.51 μM）选择性地抑制 MPM 细胞（MESO-1、MESO-4、H28、JL-1、MSTO-211H、H2052、原代 BE261T）的活力，而对正常成纤维细胞（hFb16Lu）和间皮细胞（Met-5A）的抑制作用较弱。[3] HA15（20 μM）诱导 MPM 细胞发生内质网应激/未折叠蛋白反应（EIF2AK3、ERN1、ATF4、DDIT3 mRNA 增加；p-eIF2α、CHOP 蛋白）、自噬（ATG5、BECN1、LC3B-II）和细胞凋亡（BCL2L11、BBC3、cleaved caspase-7、PARP）。 CHOP 敲低减弱了这些影响并恢复了细胞活力。[3] HA15 (20 μM) 可有效降低经顺铂/培美曲塞长期处理产生的耐药性 MPM 细胞（MESO-1R、MESO-4R、H28R）的活力，并增加与亲代细胞相似的 UPR 和凋亡标志物。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
HA15（0.7 mg/只/天；ih；持续2周）可抑制小鼠黑色素瘤的生长，未观察到明显的毒性，且对小鼠的行为、体重或肝脏重量无影响，表明未出现肝肿大[1]。
HA15（0.7 mg/只/天；ip；每周5天）可抑制体内MPM肿瘤的生长[3]。 HA15（0.7 mg/只/天，ip，持续14天）可显著抑制裸鼠体内A375黑色素瘤异种移植瘤的生长，其效果与PLX4032（0.7 mg）相当。肿瘤重量减轻。小鼠体重、肝脏重量或血清AST/ALT水平无变化。肿瘤中TUNEL、CHOP和LC3B染色增强。 [1] HA15（0.7 mg/只/天，腹腔注射，每周5天，持续5周）可抑制裸鼠体内BRAF抑制剂耐药的A375异种移植瘤的生长，而PLX4032则无此作用。[1] HA15（0.7 mg/只/天，腹腔注射，每周5天，持续5周）可抑制NSG小鼠体内患者来源的异种移植瘤（BE261T）的生长，其效果优于顺铂/培美曲塞（3.75/83 mg/kg，每周腹腔注射）。未观察到明显的体重减轻。肝脏组织学和AST/ALT水平正常。肿瘤组织显示CHOP、Beclin-1、LC3B-II、裂解型PARP/caspase-3/caspase-7表达升高。[3] |
| 酶活实验 |
BiP ATPase活性抑制实验：将重组人BiP（0.25 μM）与HA15（0–100 μM）在20 mM Tris（pH 7.5）、50 mM KCl、1.5 mM MgCl₂缓冲液中孵育。加入100 μM ATP启动反应（30分钟，37 °C）。采用孔雀绿-磷酸盐法测定释放的游离磷酸盐（吸光度620–640 nm）。HA15呈剂量依赖性地抑制BiP ATPase活性。[1]
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| 细胞实验 |
细胞系：A375细胞
浓度：1 μM、2.5 μM、5 μM、7.5 μM、10 μM 孵育时间：24小时 结果：与对照组（DMSO）相比，A375细胞中黑色素瘤细胞的活力呈剂量依赖性降低。 细胞活力检测：MTT法、酸性磷酸酶（APH）法或台盼蓝排除法。将细胞接种于96孔板中，用HA15处理24-72小时。计算IC50值。[1][2][3] 克隆形成实验：将细胞接种于6孔板（1000个/孔），用HA15处理14天（每3天更换一次培养基），用结晶紫染色并计数克隆。 [1][3] 细胞凋亡检测：Annexin V-FITC/PI染色后进行流式细胞术分析；或通过Western blot检测裂解型caspase-3、-7、-9和PARP。[1][2][3] Western blot：用RIPA缓冲液提取蛋白，经SDS-PAGE分离后转移至PVDF/硝酸纤维素膜，用针对BiP、PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、IRE1α、LC3B、Beclin-1、裂解型caspase-7、PARP、β-actin等的抗体进行检测。[1][2][3] qRT-PCR：用RNeasy试剂盒提取RNA，进行cDNA合成，采用TaqMan或SYBR Green法检测UPR、自噬和细胞凋亡相关基因。以GAPDH或TBP作为内参进行标准化。 [1][2][3] XBP1 剪接分析：使用位于剪接位点两侧的引物进行 RT-PCR，产物在 4% 琼脂糖凝胶上进行电泳分离。[1][2] 免疫荧光：细胞固定、透化后，用抗 BiP、抗 LC3B、抗 ATF6 或 ER Tracker 抗体以及 DAPI 染色；共聚焦显微镜观察。[1][2] 电子显微镜：细胞用戊二醛/四氧化锇固定，包埋、切片，观察内质网扩张和自噬空泡。[1] |
| 动物实验 |
6周龄雌性BALB/c nu/nu（裸鼠）A375黑色素瘤细胞异种移植[1]
0.7 mg/只/天 皮下注射；持续2周 小鼠异种移植（黑色素瘤，参考文献1）：雌性无胸腺裸鼠（6周龄）。皮下注射A375细胞（1.5×10⁶）。8天后（肿瘤体积约50 mm³），分别腹腔注射载体（Labrafil）、PLX4032（0.7 mg/只/天）或HA15（0.7 mg/只/天），每日一次，持续14天。每3-4天测量一次肿瘤体积。实验结束时，称量肿瘤重量，采集血液样本进行AST/ALT检测，并固定肝脏进行H&E染色。 [1] 小鼠异种移植（BRAF耐药性黑色素瘤）：采用类似的方案，使用A375-R细胞（1.5×10⁶），从第7天开始治疗。[1] 小鼠PDX（MPM，参考文献3）：NSG小鼠（NOD-scid IL2Rγnull）。将BE261T原代MPM细胞（1×10⁶）与Matrigel混合后皮下注射。当肿瘤可触及时，将小鼠随机分为三组：载体组（对照组）、顺铂（3.75 mg/kg）+培美曲塞（83 mg/kg）腹腔注射组（每周一次，持续5周）或HA15（0.7 mg/只）腹腔注射组（每周5天，持续5周）。每3天测量一次肿瘤体积。终点时，采集血液样本检测AST/ALT，进行肝脏和肿瘤组织学检查，并进行caspase-3的免疫组化染色。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
HA15在小鼠模型中未显示出明显的毒性：无体重减轻、无行为改变、肝脏组织学正常，且在给药剂量（0.7 mg/只/天，持续2-5周）下血清AST/ALT水平正常。[1][3]
体外实验表明，浓度高达100 μM的HA15对正常人黑素细胞、成纤维细胞（hFb16Lu）或间皮细胞（Met-5A）的活力没有影响。[1][3] 经处理的小鼠肝酶和肝组织学均未见显著变化。[1][3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
HA15 是一种磺酰胺，由 5-(二甲氨基)萘-1-磺酸的磺酸基团与 3-(2-乙酰氨基-1,3-噻唑基)苯胺的苯胺氮缩合而成。据报道，HA15 可通过触发内质网 (ER) 应激反应降低黑色素瘤细胞的活力，且对正常细胞无毒性。它具有抗肿瘤活性。HA15 是一种磺酰胺类化合物，其结构包含 1,3-噻唑、乙酰胺、叔胺、氨基萘和联芳基等基团。HA15 是一种噻唑苯磺酰胺，靶向内质网分子伴侣 BiP/GRP78。它通过使 BiP 与 PERK、IRE1α 和 ATF6 解离来诱导内质网应激，从而导致持续的未折叠蛋白反应 (UPR) 激活。这可诱导癌细胞凋亡和自噬。HA15 对黑色素瘤（包括 BRAF 抑制剂耐药型）、肾上腺皮质癌（与米托坦具有协同作用）和恶性胸膜间皮瘤（包括化疗耐药型）均有效。它对正常细胞和体内毒性较低。这些研究结果支持进一步的临床研究。[1][2][3]
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| 分子式 |
C23H22N4O3S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
466.58
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| 精确质量 |
466.113
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| 元素分析 |
C, 59.21; H, 4.75; N, 12.01; O, 10.29; S, 13.74
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| CAS号 |
1609402-14-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
73890923
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| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.701
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| LogP |
4.56
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| tPSA |
128
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
757
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C1=C([H])C([H])=C([H])C2C(=C([H])C([H])=C([H])C=21)N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])(N([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C(C2=C([H])SC(N([H])C(C([H])([H])[H])=O)=N2)=C1[H])(=O)=O
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| InChi Key |
LBSMEKVVMYSTIH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H22N4O3S2/c1-15(28)24-23-25-20(14-31-23)16-7-4-8-17(13-16)26-32(29,30)22-12-6-9-18-19(22)10-5-11-21(18)27(2)3/h4-14,26H,1-3H3,(H,24,25,28)
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| 化学名 |
N-[4-[3-[[5-(dimethylamino)naphthalen-1-yl]sulfonylamino]phenyl]-1,3-thiazol-2-yl]acetamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1433 mL | 10.7163 mL | 21.4326 mL | |
| 5 mM | 0.4287 mL | 2.1433 mL | 4.2865 mL | |
| 10 mM | 0.2143 mL | 1.0716 mL | 2.1433 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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