| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
常春藤皂苷B对EV71 C3亚型和EV71 C4a亚型均表现出抗病毒活性,EC₅₀值分别为24.77 ± 12.56 μg/ml和41.77 ± 0.76 μg/ml,该活性通过磺基罗丹明B (SRB) 细胞病变效应 (CPE) 降低法测定。EV71 C3亚型的治疗指数 (TI = CC₅₀/EC₅₀) 为2.02,EV71 C4a亚型的治疗指数为1.18。[1]
- 相反,利巴韦林(用作阳性对照)对两种EV71亚型均未显示出显著的抗病毒活性,因为它既不能降低CPE,也不能降低病毒蛋白的表达。 [1] - Western blot 分析显示,在感染 EV71 C3 或 EV71 C4a 的 Vero 细胞中,用 50 μg/ml 的常春藤皂苷 B 处理 48 小时后,病毒衣壳蛋白 VP2 (34 kDa) 的表达显著降低,表明病毒衣壳蛋白的合成受到抑制。[1] - 显微镜观察显示,常春藤皂苷 B (50 μg/ml) 可阻止 EV71 C3 或 EV71 C4a 诱导的可见细胞病变效应 (CPE) 的形成,而利巴韦林则不能保护细胞免受病毒诱导的 CPE 的影响。[1] |
|---|---|
| 细胞实验 |
抗病毒活性测定(SRB法检测细胞病变效应减少):感染前一天,将Vero细胞以2×10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔板中。次日,移除培养基,用PBS洗涤细胞,并向每孔加入0.09 ml稀释的病毒悬液(含50%细胞培养感染剂量,CCD₅₀),以在48小时内诱导细胞病变效应。然后,加入0.01 ml含胎牛血清(FBS)的培养基,其中含有5倍系列稀释的常春藤皂苷B(0.4至50 μg/ml)。病毒感染但未处理的细胞和未感染但未处理的细胞作为对照。在 5% CO₂、37 °C 条件下培养 2 天后,用冰冷的 70% 丙酮(−20 °C)固定细胞 30 分钟,干燥,用 0.4% SRB 的 1% 乙酸溶液在室温下染色 30 分钟,用 1% 乙酸洗涤 5 次,干燥。用 10 mM Tris 碱溶液(100 μl)溶解结合的 SRB,并在 540 nm 处读取吸光度(参考波长 620 nm)。保护率计算公式为:(OD_EV71 处理组 − OD_EV71 对照组)/(OD_mock − OD_EV71 对照组)× 100。[1]
- 细胞毒性试验:将 Vero 细胞以 2×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中。 24 小时后,将细胞与病毒感染的培养物平行,在维持培养基中加入不同浓度的常春藤皂苷 B,于 37 °C 下培养 48 小时。采用上述相同的 SRB 法评估细胞毒性,并测定 CC₅₀(抑制细胞生长 50% 的浓度)。对于常春藤皂苷 B,其对 EV71 C3 和 C4a 的 CC₅₀ 均 >50 μg/ml,表明在测试浓度下无显著细胞毒性。[1] - VP2 蛋白的 Western blot 分析:在用 EV71 C3 或 EV71 C4a 感染前 24 小时,将 Vero 细胞以 5×10⁶ 个细胞/孔的密度接种于 6 孔板中。感染细胞用浓度为 50 μg/ml 的常春藤皂苷 B 或利巴韦林处理 48 小时。以假感染细胞(0.1% DMSO)和病毒感染细胞(0.1% DMSO)作为对照。细胞在冰冷的 RIPA 裂解缓冲液(含 Tris-HCl pH 7.4、NaCl、NP-40、脱氧胆酸钠、SDS、EDTA、抑蛋白酶、亮抑蛋白酶、PMSF、氟化钠和原钒酸钠)中裂解。取 30 μg 蛋白样品,于 100 °C 煮沸 10 分钟,在 12% 丙烯酰胺凝胶上以 100 V 电压电泳 1 小时进行分离,然后使用转印装置以 20 V 电压转印至硝酸纤维素膜上,转印时间为 7 分钟。将膜在 4℃ 下用 5% 脱脂奶粉 PBST 溶液封闭过夜,然后与小鼠抗肠道病毒 71 单克隆抗体(1:1000 稀释)孵育以检测 VP2,或与小鼠抗 α-微管蛋白单克隆 IgG1 抗体(1:1000 稀释)孵育作为上样对照。用 PBST 洗涤后,将膜与 HRP 标记的羊抗小鼠二抗(1:5000 稀释)在室温下孵育 1 小时。采用增强化学发光法 (ECL) 显色。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在Vero细胞中,常春藤皂苷B的CC₅₀ >50 μg/ml,表明浓度高达50 μg/ml时,该化合物不会降低细胞活力,并且通过SRB试验和细胞形态的显微镜观察评估,未显示出细胞毒性迹象。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
据报道,常春藤皂苷B存在于银莲花、紫叶藻和其他一些有相关数据的生物体中。
- 常春藤皂苷B是一种三萜皂苷。先前的研究表明,三萜皂苷可能抑制病毒核苷酸的合成(例如,针对1型单纯疱疹病毒),作者推测常春藤皂苷B可能通过类似的机制发挥其抗EV71的作用,即抑制肠道病毒的复制。[1] - 含有常春藤皂苷B的30%乙醇提取物已在临床上作为一种安全有效的药物用于治疗儿童支气管炎。该提取物在体外对EV71 C3(EC₅₀ = 6.58 μg/ml,TI = 7.59)和EV71 C4a(EC₅₀ = 22.00 μg/ml,TI = 4.55)均表现出显著的抗病毒活性,提示该提取物本身可能被开发为抗EV71治疗药物。[1] - 目前尚无获批的抗病毒药物用于治疗肠道病毒71感染。常春藤皂苷B是一种潜在的广谱抗病毒候选药物,对多种EV71亚基因型(C3和C4a)有效。[1] |
| 分子式 |
C59H96O25
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|---|---|
| 分子量 |
1205.3786
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| 精确质量 |
1204.624
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| 元素分析 |
C, 58.79; H, 8.03; O, 33.18
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| CAS号 |
36284-77-2
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| PubChem CID |
21626480
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
223-226 °C
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| 折射率 |
1.630
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| LogP |
6.11
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| tPSA |
392.59
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| 氢键供体(HBD)数目 |
14
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| 氢键受体(HBA)数目 |
25
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| 可旋转键数目(RBC) |
13
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| 重原子数目 |
84
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| 分子复杂度/Complexity |
2350
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| 定义原子立体中心数目 |
32
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| SMILES |
O(C1([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])O1)O[H])O[H])OC1([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O1)O[H])O[H])O[H])C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C2(C([H])([H])[H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C3(C([H])([H])[H])C4(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C5(C(=O)OC6([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])OC7([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])O[H])O7)OC7([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O7)O[H])O[H])O[H])O[H])O[H])O6)O[H])O[H])O[H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C5([H])C4=C([H])C([H])([H])C32[H])C1(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]
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| InChi Key |
NVSLBOBPSCMMSO-BVLVEXITSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C59H96O25/c1-24-34(62)38(66)42(70)49(77-24)82-46-29(21-60)79-48(45(73)41(46)69)76-23-30-37(65)40(68)44(72)51(80-30)84-53(74)59-18-16-54(3,4)20-27(59)26-10-11-32-56(7)14-13-33(55(5,6)31(56)12-15-58(32,9)57(26,8)17-19-59)81-52-47(36(64)28(61)22-75-52)83-50-43(71)39(67)35(63)25(2)78-50/h10,24-25,27-52,60-73H,11-23H2,1-9H3/t24-,25-,27-,28-,29+,30+,31-,32+,33-,34-,35-,36-,37+,38+,39+,40-,41+,42+,43+,44+,45+,46+,47+,48+,49-,50-,51-,52-,56-,57+,58+,59-/m0/s1
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| 化学名 |
[(2S,3R,4S,5S,6R)-6-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl] (4aS,6aR,6aS,6bR,8aR,10S,12aR,14bS)-10-[(2S,3R,4S,5S)-4,5-dihydroxy-3-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-1,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydropicene-4a-carboxylate
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| 别名 |
Hederagenin B; Hederacoside B
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~82.96 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8296 mL | 4.1481 mL | 8.2961 mL | |
| 5 mM | 0.1659 mL | 0.8296 mL | 1.6592 mL | |
| 10 mM | 0.0830 mL | 0.4148 mL | 0.8296 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。