| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TOPK; ERK-RSK; p53; Caspase-7
HI-TOPK-032 targets T-LAK cell-originated protein kinase (TOPK/PBK), a serine-threonine kinase. It is an ATP-competitive inhibitor, meaning it competes with ATP for binding to the kinase domain of TOPK. It strongly suppresses TOPK kinase activity in vitro but has little effect on extracellular signal–regulated kinase 1 (ERK1), c-jun—NH2—kinase 1, or p38 kinase activities. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
HI-TOPK-032 对 TOPK 休眠活性具有显著的抑制作用，但对 p38、c-jun-NH2-休眠1 或细胞外信号调节休眠 1 (ERK1) 无影响。HI-TOPK-032 可改变 TOPK 的 ATP 结合。该化合物与 LYS30 发生相应的反应，并与 GLY83 和 ASP151 形成氢键。然而，HI-TOPK-032 的最大剂量 (5 μM) 可使染色质中 MEK1 的活性降低 40%。HI-TOPK-032 通过控制 p53、局部 caspase-7 和局部 PARP，也抑制了 ERK-RSK 的磷酸化。细胞壁依赖性和非导航性环状生长会因环状导航细胞数量的增加而受到抑制 [1]。
HI-TOPK-032 通过抑制 TOPK 激酶活性，表现出强大的体外活性。它能阻断底物组蛋白H2AX的磷酸化，降低ERK-RSK的磷酸化水平，调节p53、切割型caspase-7和切割型PARP的丰度，并诱导癌细胞凋亡。它在体外抑制结肠癌和胶质瘤起始细胞的生长。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
与肿瘤治疗组相比，接受 1 或 10 mg/kg HI-TOPK-032 治疗的小鼠 HCT-116 肿瘤生长显著抑制，抑制率超过 60%。小鼠对 HI-TOPK-032 治疗组表现出良好的耐受性。HI-TOPK-032 治疗组中 ERK 及其下游蛋白 RSK 的磷酸化水平显著降低，而 p53 的表达水平则显著升高 [1]。
HI-TOPK-032 可抑制体内肿瘤生长。它能抑制结肠癌和胶质瘤起始细胞的生长。其诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖的能力使其成为一种有前景的癌症治疗候选药物。 |
| 酶活实验 |
通过体外激酶活性测定，使用[γ-32P]ATP和ERK1（活性，500 ng）、非活性RSK2（ERK1底物，1 μg）、JNK1（活性，50 ng）、c-Jun（JNK1底物，1 μg）、p38（活性，200 ng）和ATF2（p38底物，500 ng），评估HI-TOPK-032对ERK1、JNK1和p38活性的影响。简而言之，使用40 μL反应缓冲液，以及10 μCi的[γ-32P]ATP和HI-TOPK-032（0.5、1、2、5 μM）。室温孵育30分钟后，采用SDS-PAGE分离混合物，期间加入10 μL蛋白上样缓冲液终止反应[1]。
HI-TOPK-032的主要体外检测方法是使用纯化的TOPK酶进行激酶活性测定。将酶与肽底物和ATP在不同浓度的化合物存在下孵育。测定磷酸化程度，并确定IC50为2 µM。此外，还使用细胞实验来验证其活性。 |
| 细胞实验 |
将不同浓度的 HI-TOPK-032 (1、2、5 μM) 应用于 HCT-116 结肠癌细胞。孵育 1、2 或 3 天后，加入 20 μL CellTiter96 AQueous One Solution，随后在 37°C、5% CO₂ 培养箱中孵育 1 小时。在 492 nm 处测量吸光度[1]。
HI-TOPK-032 的细胞活性检测包括用该化合物处理结肠癌和胶质瘤等癌细胞系。通过蛋白质印迹法检测其底物组蛋白 H2AX 的磷酸化水平来评估 TOPK 活性的抑制情况。通过检测 caspase-7 和 PARP 的裂解或使用 Annexin V 染色进行流式细胞术分析来评估细胞凋亡的诱导情况。 |
| 动物实验 |
小鼠：小鼠分为四组，分别为：(i) 未处理的载体组；(ii) 1 mg/kg 和 10 mg/kg 体重的 HI-TOPK-032 组；(iii) 10 mg/kg 和 1 mg/kg 体重的 HI-TOPK-032 组；以及 (iv) 无细胞组和 10 mg/kg 体重的 HI-TOPK-032 组。将 HCT-116 细胞悬液置于无血清 McCoy 5A 培养基中，皮下注射至每只小鼠的右侧腹部。连续 25 天，每周三次注射载体或 HI-TOPK-032。计算肿瘤体积[1]。
HI-TOPK-032 的体内疗效已在结肠癌和胶质瘤的小鼠异种移植模型中进行了评估。用该化合物治疗荷瘤小鼠，并监测肿瘤生长抑制情况。同时评估药效学标志物，例如肿瘤组织中组蛋白 H2AX 磷酸化的抑制情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
HI-TOPK-032 的分子量为 369.40 g/mol，分子式为 C20H11N5OS。其 IUPAC 名称为 N-(12-氰基吲哚并[2,3-b]喹喔啉-2-基)噻吩-2-甲酰胺。它在 DMSO 中的溶解度为 2.5 mg/mL。通常以粉末形式储存于 -20°C。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
HI-TOPK-032 是一种研究用化合物，不适用于人体。现有文献对其毒理学特征描述尚不充分。作为一种激酶抑制剂，它可能具有靶向毒性。操作时应遵循标准安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
HI-TOPK-032 是一种高效且选择性的 ATP 竞争性 T-LAK 细胞来源蛋白激酶 (TOPK/PBK) 抑制剂。其 IC50 值为 2 µM，用于癌症研究，以探究 TOPK 在肿瘤发生中的作用。该化合物可在体内抑制肿瘤生长，并可从多家化学试剂供应商处获得，用于科研用途。
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| 分子式 |
C20H11N5OS
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|---|---|
| 分子量 |
369.399241685867
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| 精确质量 |
369.068
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| 元素分析 |
C, 65.03; H, 3.00; N, 18.96; O, 4.33; S, 8.68
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| CAS号 |
487020-03-1
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| 相关CAS号 |
487020-03-1
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| PubChem CID |
1936439
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| 外观&性状 |
Pink to red solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
415.3±45.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
204.9±28.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.808
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| LogP |
2.71
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| tPSA |
111.32
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
635
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1=CC=CS1)NC2=CC3=C(C#N)C4=NC5=CC=CC=C5N=C4N3C=C2
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| InChi Key |
BCSBXWKRZUPFHW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H11N5OS/c21-11-13-16-10-12(22-20(26)17-6-3-9-27-17)7-8-25(16)19-18(13)23-14-4-1-2-5-15(14)24-19/h1-10H,(H,22,26)
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| 化学名 |
N-(12-cyanoindolizino[2,3-b]quinoxalin-2-yl)thiophene-2-carboxamide
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| 别名 |
HI-TOPK-032; HI-TOPK032; HI-TOPK 032; HI TOPK-032; HI TOPK032; HI TOPK 032
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 4~5 mg/mL (10.8~13.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 10 mg/mL (27.07 mM) in 15% Cremophor EL + 85% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 0.25 mg/mL (0.68 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 2.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7071 mL | 13.5355 mL | 27.0709 mL | |
| 5 mM | 0.5414 mL | 2.7071 mL | 5.4142 mL | |
| 10 mM | 0.2707 mL | 1.3535 mL | 2.7071 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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