Hoechst S 769121

目录号: V29444 纯度: ≥98%
Hoechst S 769121 是 Hoechst 系列的标记染料。
Hoechst S 769121 CAS号: 74681-68-8
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
100mg
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产品描述
Hoechst S 769121 是 Hoechst 系列标记染料中的一种。Hoechst 系列染料是活细胞核标记染料。Hoechst 通过与 DNA 双链的小沟结合来标记核酸。Hoechst 更倾向于与富含 A/T 的 DNA 链结合。同时,富含 A/T 的双链 DNA 能显著增强荧光强度。Hoechst 可以穿过细胞膜并与活细胞或固定细胞结合。Hoechst 染料的荧光强度随溶液 pH 值的升高而增强。
Hoechst S 769121(核黄,CAS 74681-68-8)是一种细胞渗透性荧光染料,属于Hoechst系列DNA结合染料。它能与双链DNA小沟中富含腺嘌呤-胸腺嘧啶(A/T)的区域强力结合。与DNA结合后,Hoechst S 769121会发出荧光,其激发/发射波长最大值分别约为335/495 nm。它可用于标记活细胞和固定细胞中的DNA,应用于荧光显微镜、微孔板荧光测定和流式细胞术。
生物活性&实验参考方法
靶点
DNA (minor groove, A/T-rich regions).
体外研究 (In Vitro)
Hoechst工作液的配制 1.1 储备液的配制 用DMSO配制1 mg/mL的Hoechst储备液。注意:Hoechst储备液配制后建议避光保存于-4℃或-20℃。1.2 工作液的配制:使用前,向储备液中注入优质的无血清细胞培养基或PBS。最终Hoechst工作液的浓度为10 μg/mL。注意:请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度,使其适合使用。2. 悬浮细胞染色 (2.1):离心细胞,加入PBS,每次5分钟,重复洗涤两次。当细胞密度达到1×10⁶/mL时,2.2 加入1 mL Hoechst工作液,孵育3-10分钟。2.3 400 g离心3-4分钟,弃去上清液。2.4 用PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。 2.5 将细胞重悬于1 mL无血清培养基或PBS中,并使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。3. 细胞染色(贴壁)3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 将盖玻片从培养基中取出,吸除多余的细胞。3.3 加入100 μL染料工作液,轻轻摇晃使染料完全覆盖细胞,留出3-10分钟的空白。3.4 吸除染料工作液,用培养基洗涤2-3次,每次5分钟,并使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。注意事项:1. 请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度。2. 本产品仅供专业人员进行科学研究,不得用于临床诊断或治疗,也不得用于食品或药品。3. 为了您的安全和健康,操作时请穿戴实验服和手套。
在体外,Hoechst S 769121 能与 DNA 结合,与富含 A/T 的双链 DNA 结合后荧光强度显著增强。它可用作活细胞核标记染料,用于活细胞或固定细胞的细胞核染色。该染料可用于活细胞标记,并且由于其独特的激发/发射光谱,适用于多重实验。
体内研究 (In Vivo)
Hoechst S 769121 不用作体内治疗剂;它是一种用于细胞染色的实验室试剂。由于该化合物仅用作细胞生物学研究中的荧光染料,因此没有体内活性数据报道。
酶活实验
DNA结合实验是将Hoechst S 769121与纯化的DNA(例如,小牛胸腺DNA、质粒DNA或合成寡核苷酸)在合适的缓冲液(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,100 mM NaCl,1 mM EDTA)中于室温下孵育。使用荧光计或荧光酶标仪测量荧光强度,激发波长为335 nm,发射波长为495 nm。通过用固定浓度的染料滴定递增浓度的DNA,并绘制荧光强度增加与DNA浓度的关系图来评估结合亲和力。可以使用未标记的DNA结合化合物进行竞争性结合实验。对于序列特异性分析,使用富含A/T和富含G/C的寡核苷酸来证明其对富含A/T序列的优先结合。
细胞实验
细胞(例如,贴壁细胞或悬浮细胞系)在合适的培养基中培养。对于活细胞染色,将细胞与浓度为 0.5-5 μg/mL 的 Hoechst S 769121 在培养基或 PBS 中于 37℃ 孵育 15-30 分钟。然后洗涤细胞,并通过荧光显微镜(激发波长 335 nm,发射波长 495 nm)观察或通过流式细胞仪分析。对于固定细胞染色,细胞用多聚甲醛或甲醇固定,必要时进行透化处理,然后用染料染色。该染料也兼容使用其他荧光探针的多重染色实验。最佳染色条件应根据每种细胞类型通过实验确定。
动物实验
Hoechst S 769121 是一种研究用试剂,不用于动物治疗。对于离体组织染色,将组织切片在室温下用染料(0.5-5 μg/mL)的 PBS 缓冲液孵育 15-30 分钟,洗涤后封片,用于荧光显微镜观察。对于体内成像研究,该染料可局部或全身给药于动物模型以标记细胞核,但此类应用受到限制。目前尚无标准化的体内实验方案。
药代性质 (ADME/PK)
Hoechst S 769121(核黄)的分子式为C2₅H2₈Cl3N₇O2S,分子量为596.96。该染料可透过细胞膜,无需固定即可对活细胞进行染色。它可溶于DMSO和其他合适的溶剂。避光保存时,该化合物性质稳定。与DNA结合后,该染料的荧光强度显著增强,富含A/T的序列产生的信号最强。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
该染料属于实验室试剂,应按照标准安全预防措施进行操作。目前尚无关于Hoechst S 769121的具体毒性数据报告。作为一种DNA结合染料,它可能具有遗传毒性,应作为潜在诱变剂进行处理。应使用适当的个人防护装备。该化合物仅供研究使用,不得用于人体治疗或诊断。
参考文献

[1]. Latt SA, Stetten G, Juergens LA, Recent developments in the detection of deoxyribonucleic acid synthesis by 33258 Hoechst fluorescence. The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society 23 (7): 493-505.

[2]. a b c "Hoechst Stains". Invitrogren (Molecular Probes).

[3]. Portugal J, Waring MJ. Assignment of DNA binding sites for 4',6-diamidine-2-phenylindole and bisbenzimide (Hoechst 33258). A comparative footprinting study. Biochimica et Biophysica Acta 949.

其他信息
Hoechst S 769121(核黄)是一种DNA选择性荧光染料,广泛应用于细胞生物学研究。它是Hoechst系列染料中的一种,该系列染料是荧光显微镜和流式细胞术中最常用的核染料之一。该染料优先结合双链DNA小沟中富含A/T的区域,结合后激发/发射波长最大值约为335/495 nm。核黄用于标记活细胞和固定细胞中的DNA含量,其荧光强度可通过荧光显微镜、微孔板荧光法或流式细胞术进行测量。该化合物为研究级染料,并非获批的诊断或治疗药物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H25N7O2S.3[HCL]
分子量
596.95952
精确质量
595.109
CAS号
74681-68-8
PubChem CID
123837
外观&性状
Light yellow to green yellow solid powder
熔点
>300℃
tPSA
132
氢键供体(HBD)数目
6
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
38
分子复杂度/Complexity
837
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
NZVGXJAQIQJIOY-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C25H25N7O2S.3ClH/c1-31-10-12-32(13-11-31)18-5-9-21-23(15-18)30-25(28-21)17-4-8-20-22(14-17)29-24(27-20)16-2-6-19(7-3-16)35(26,33)34;;;/h2-9,14-15H,10-13H2,1H3,(H,27,29)(H,28,30)(H2,26,33,34);3*1H
化学名
4-[6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzimidazol-2-yl]-1H-benzimidazol-2-yl]benzenesulfonamide;trihydrochloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ≥ 6 mg/mL (~10.05 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (8.38 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6752 mL 8.3758 mL 16.7515 mL
5 mM 0.3350 mL 1.6752 mL 3.3503 mL
10 mM 0.1675 mL 0.8376 mL 1.6752 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们